Способ количественного определения натриуретического фактора

 

Союз Советскнх

Соцнапнстнческнх республнн

Qll ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДВТИЛЬСТВУ ((() 631821 (61) Дополнительное к авт. свил-ву— (22) Заявлено 09.07. 76;(21) 2382278/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет 2 (51) М. Кл

Ст 01 К ЗЗ/16.

Государственный номнтет

Совета Мнннстрев СССР ов делам нэобретеннй н атнрытнн (43) Опубликовано05.11.78.Бюллетень % 41 (45) Дата опубликования описания 05.11.78 (53) УЖ 615.475 (088 B) (72) Авторы изобретения

Р. Б. Косуба и Ю. И. Иванов

Черновицкий государственный медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕС ВЕННОГО ОПРКДЕЛКНИЯ

НАТРИУРЕТИЧЕСКОГО ФАКТОРА

Изобретение относится к медицине н может быть использовано для изучения роли натриуретического фактора в регуляции водно-солевого обмена в организме человека и животных.

Известен способ количественногo онре- 5 деления натриуретического фактора цутем введения тестируемого материала в инкубаииоощю срейу(1).

Однако известный способ обладае низкой чувствительностью. то

11елью изобретения является повьппение чувствительности способа.

Эта пель достигается тем, что в. инкубационную среду помещают изолированный отрезок тонкой кипщи, вывернутый и 15 завязанный с двух концов, и выдерживают его при температуре 36-37 С s течение 55-60 минут, взвешивают, после чего в среду добавляют тестируемый ма териал, выдерживают в нем 30-35 минут, повторно вэветпивают и по изменению веса определяют количество тестируемого материала, по которому судят о коли честве натриуретического фактора.

Способ осуществляют следующим образом.

Животных эа 18-22 часа до начала як аперимента лишают пищи, воду не ограничивают. После декапитапии изолируют отрезок тощей киитки длиной 4-5 см (от одного животного можно взять:нес« колько отрезков кишки). Отрезок кишки выворачивают, после чего завязывают с обоих коннов. Образовавшийся,вывернутьтй кишечный мешочек помещают для инкубапии в раствор следующего состава, мм/л:МаСВ -135; КСв-4,5, С 2,5;

>-1,18т)(аНСО -5,0; Ка 1,84; а НРО40,46; глюкоза - 12, при рН

7,4ттемпературе 37 С и постоянной

О аэрации среды. Всасывательную функцию тощей кишки оценивают по изменению ве са вывернутого мешочка через 30 минут после добавления исследуемого материала. При определении количества натриуретнческого фактора в ясследуемом материале готовят 3-4 таких препарата ки (шечника. К каждому отрезку кишки через

1 час после начала инкубации s цитатель ной среде добавляют исследуемый материал l,ïëaçìó крови) s количестве от

0,01 до 0,2 мл на 10 мл йнкубапионной среды, s зависимости от предполагаемого количества натриуретнческого фактора. у а затем производят повторное взвешивание. После опыта вывернутый мешочек высушивают до постоянного веса. Расчет изменения веса препарата (прибавку или убыль) производят на 1 г веса сухой ткани кишки. По полученным результатам строят график на миллиметровой бумаге. На осн ординат откладывают из мененин в весе в мг/г (прибавку или уменьшение) после добавлении нсследуе- 1j мого материала, на осн. абсцисс - количество тестируемого материале. За 1 ки шечную единицу действия натриуретичес-, кого фактора принимают такое его коли чество, которое полностью блокирует вша- 20 сывание жидкости отрезком кишкк, Это количество соответствует пересечению графака с осью абсцисс. Количество на триуретнческого фактора выражают в ки шечных едниннек действия.в 1 мл тестя 39 руемого материала (киш.ед./мл), для это» го.расчет производят по формуле".

1 я,»»» где К количество иатриуретического 3ф фактора, кнш.ед./млг

М» величина» полученная нз графкхщ

Ъ оличество иатрнщэетнческк о < енто ра в плазме крови ннтактных крыс» опре» деленное данным способом, составляет 35

6,0 + О;42нит.вд./мл, у крыс после уве- личения объема внеклеточной жидкости путем введения s вену изотщщческого солевого раствора в количестве 3 %I от Ве»

40 са тела количество натрнуретическогD фактора составляет 15,6 + 1,12 киш. ед.lмл, т.е. наблюдается его увеличение.

Количество натрнуретического фактора в плазме крови интактных кроликов, определенное предлагаемым способом, сос» тавляет 8,6 g 0,99 кнш.ед./мл, у кроликов после увеличения объема внеклеточной жидкости аналогичным способом количество натрнуретического фактора составляет 22;4 + 1,86 кнш.ед./мл.

Предлагаемый способ обеспечивает простоту исследования, быстроту, аостаточную информативность и возможность количественного выражения.

Формула изобретения

Способ количественного определения натриуретнческого фактора путем введе нна тестируемого материала в инкубапион» ную среду, отличающийся тем, что, с целью повышении чувствительности способа, в инкубационную сре ду помепимот изолированный отрезан тонкой кишки, вывернузътй и завязанный с двух

3». 37в в течение 55-60 „минут, взвешивают, но сле чего в среду добавляют тестируемый материал, выдерживают в нем 30-35 ми нут, повторно взвешивают и по изменению веса определяют количество тести,,руемого материала, по которому судят о количестве натриуретического фактора.

Источники информации, принятые во вам анне прн экспертизе:

1. Иванов Ю. И., Гапон Л.. И. Патофязиология, 1974, 2, с. 65-67.

Составитель С. Малютина

Редактор О. 8saaosa Техред H. Андрейчук Корректор W. Демчик

Заказ 6335/43 Тираж 1070 Подписное

БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий

113035, Москва, Ж-35» Раушскан, наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4