Способ химической идентификации гексоз

 

- Союз Советскик

Социалистические

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 22.03.78 (21) 2594144/28-13 с присоединением заявки РЙ (23 ) Приоритет

Опубликовано 15. 12,79. Бюллетень РЙ46

Дата опубликования описания 18. 12.79 (5!)М. Кл. а, 01 8 33rOO Веудератеееьй квинтет

CCCP ао лелем нзебретевив н еткрытве (53) У@К 547.4. .627 (088. B) (72) Авторы изобретения

Н. B. Егоров, Ф. М. Шемякин и И. И. Чакалева

Первый Московский ордена Ленина и ордена. Трудового Красного

Знамени медицинский институт им. И. М, Сеченова (73) Заявитель (54) СПОСОБ ХИМИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАБИИ ГЕКСОЗ

Изобретение относится к фармацевти, ческой химии, а именно к способам идентификации стереоизомеров различных сахаров, применяемых в лекарственных: смесях, имеющих большое значение при различных нарушениях углеводного обмена.

Известен фармакопейный метод индентификации глюкозы, заключающийся в том, /. что навеску препарата в количестве 0,2 r растворяют в 5 мл воды, добавляют 10мл раствора Феллннга, нагревают до температуры кипения, выпадает кирпично-красный осадок. Аналогичная реакция описана для молочного сахара (1).

Недостатком этого способа является неспецифичность и малая чувствительность реакции (реактив Феллинга - групповой. реактив на альдегидную группу сахаров).

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ идентификации глюкозы, предусматривающий реакцию взаимодействия исследуемой пробы с концентрированной серной кислотой при наг2 реванни с последукецнм визуальным определением реакции скрашивания смеси Г2).

Способ заключается в том, что исследуемая проба обрабатывается свежеприготовленным сернотимоловым реактивом (0,25 г тимола на 100 г концентрированной серной кислоты пробы по Савалю) с последующим кипячением полученного раствора на водяной бане в, течений 10 мин, и моментальным охлаждением. т6

Недостатком этого способа является неспецифичность (другие сахара дают ту же реакцию), экспериментальные трудности, связанные со строгим соблюдением

15 времени нагревания ы охлаждения, несоблюдение которых искажает результаты(2т, Белью изобретения является повышение точности, специфичности H упрощение проведения анализа.

Бель достигается тем, что по предлагаемому способу в исследуемую пробу одновременно с серной кислотой дополнительно: вводят фюсфорную кислоту в соотношении 1:1 и в случае окрашивания сме3 .. 703763

4 си в красный цвет иэ ряда гексоз иден- лем термометра. Извлекают пробирку из

-тифицируютА-глюкозу, а в случае окраши» стакана и оставляют при комнатной тем» ваний в желтый цвет из ряда гексоз пературе йа 2 мин. Раствор приобретает

- — -- идентифицируют 01 -галактозу, а темпера- стабильное желтое окрашивание. Фуру нагревания устанавливают равной > Аналогичные результаты получаются о

85-90 C,- . . при использовании смеси концентрированСущность способа состоит s гом, что ных серной и фосфорной кислот в соотноше исследуемая проба обрабатывается смесью ниях 0,9-1,1 - 1,1-0,9. концентрированных серной и фосфорной Концентрация препарата глюкозы при

-кислотой в соотношении 1:1 и полученную 10" данном определении снижается в 100 раз о смесь нагревают до 85-90 С. - :." " по сравнению с фармакопейным методом.

В результате подбора оптимальных " Получаемые окрашенные продукты реактУСаЛОВИй РЕаКЦИИ ИДЕНтнфИКаЦИИ d.- ГЛЮ- ЦИИ 01 - ГЛЮКОЭЫ И 4- ГаЛаКтОЭЫ ЧЕТКО коэи или 4-- галактозы рекоменгдуетася" различаются по цвету и стабильны в те= применение не менее 0,0002 r препара- t5 чейни 24 ч. та "a ka4ecrae реакатива используется: Таким образом, предлагаемый способ . смесь концентрированных серной и фос- позволяет надежно идентифицйровать форной кислот с удельным весом соот- d- -, глюкозу и 01,- галактозу иэ ряда

- .-ввтственно для серной кислоты 1,83 г/см у ексоз, . уйростить методику, снизить кодля фосфорной 1,71 г/см . Нагртевание 20 личества реагентов, повысить точность и .растворов идет под контролем термомет« специфичность определения. ,рра до 85-90 С, так как при более""нй:-рких темпйратурах реакция йе идет, а при Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я более выеоких - происходит Й:ммейие.

Количество испоаьзуемо о реак гива не, 25 .. Способ химической идентификации гек" влидяет на окраску раствора.,соэ, предусматривающий реакцию взаимоСпособ позволяет идентифицировать иэ . действия исследуемой пробы с концентри ряда ге»соз Ф - глюкозу и pL» галактозу. рованной серной кислотой при нагревании

Пример. 1.; с-последующим .визуальным определением Йевуеску йреперата оС- глюкозы в ко- 30 реакции окрашиваййя смеси, о т л и ч а личестие 0,0002 г"поомещают в пробир- ю m и и с я тем, что, с целью повышеку, добавляют 0;3 мл реактйвта "сйбси". ния точности, специфичности и упрощения " койцен1тфровацн рх серной и фосфорной проведения анализа, в исследуемую пробу каслот "в соотйошеййи 1:1. Ставят пр6- одновременно с серной кислотой вводят бирку в химиЧеский ei акай с водой цри M фосфорную кислоту в соотношении 1:1 и

"кбмнвтной температур е и наррейщЯ"дО в случае окрашиванйя смеси в краснйй

85 С под контролем термометра. Иэвле- цвет "из ряда гексоз идентифицируют д кают пробирку йз стакана и остамяютт глюкозу, а в случае окрашивания в желйрг и комйатной темзпера уре на 1 мин..тый цвет иэ ряда гексоз идентифицируют

Раствор" приобретает стабильное красное о.. Ф.- галактозу,""а "температуру на ревания

" окрраайвазние .— ", --- -. :::: "-:::::- : -: : устанавливают равной 88-900С.

П р и м е:р 2 l . . - Источники инфьрмации, Навеску препарата 0(,- галаКтозы"в принятые "во вйимание при эксйертизе. количестве 0,0002 г помещают в пуобир- 1. Гос. Фармакопея СССР Х издер М., ку, добавляют 0,3 мл реактива смеси 4> Медицина, 1968, с. 354, 601. г.

- концоентрароЬаннйхг серцой и: фосфорногй - -2. Берестов ) Биохимия и морфология кислот 1: 1, Ставят йргоЬиркгу в " хидмиздчзес-. крови пушныхг зверей . Иэд. Карелия,", кий стакан с водой при комнатной темпе- . Петдрозаводск, 1971.," с. 219-221 (проратуре и нагревают до 90 С aog контре- ",;: тотип).

"Сос задвгитель И. Привалова

Ре ддв казтзор II. Ватайова Тепрел. Э. Чужак Корректор M. Попо

Заказ 7309/39 .: Тараж 1073 Подпасков

0НИИПИ Государственного комитета СССР .по делам изобретений и открытий

1,13033, Моокеа, Ж-SS, Раужокаа ваб., д. 4/3

Филпвл ППП Петект", г. Ужгород, ул, Проекткаа, 4