Способ дезагрегации почечной ткани лабораторных животных

 

Союз Советски к

Социалистические

Республик

ОП ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

< ц 825628 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 03.11.77(21) 2539588/28 13 с присоединением заявки М (51)M. Кл.

С 12 K 9/00

6кударствеииый комитет

СССР (23) Приоритет

Опубликовано 30.04.8 1. Бюллетень,% 16 но делам изооретеиий и открытий (53) УДК591.461..2(088.8) Дата опубликования описания 05.05.81 (72) Авторы изобретения

Г. Оме ьяйец т

1

t институт инфекционных

Е. А. Суптель, H. Б. Загорная, Т.. и Г, П. Михайличенко

Киевский научно-исследовательский болезней (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДЕЗАГРЕГАЦИИ ПОЧЕЧНОЙ ТКАНИ

ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к технике получения клеток из тканей лабораторных животных для последующего культивирования их вне организма. Эти клеточные культуры широко используют для выделения и идентификации вирусов, определения ток5

-сичности лекарств, вирулентности бактерий и т.д.

Известный способ дезагрегации пбчечной ткани заключается в том, что раствор

10 фермента нагнетают через сосуд извлеченной почки специальным аппаратом до тех пор, пока под капсулой не образуются трещинки, после чего корковый слой почки подвергают дезагрегации в ростовой среде с последукнцей посадкой клеток (1);

Основным недостатком способа является незначительный выход жизнеспособных клеток (до 50%).

Наиболее близок к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату способ дезагрегации почек лабораторного животного, заключающийся в том,. что животному под общим наркозом

2 1 вскрывают грудную полость и через левый желудочек в аорту вводят физиологический раствор для освобождения организМа от крови. Затем. кровеносную систему заполняют ферментативным раствором. По скан« чании этой процедуры почки извлекают, помещают в сосуд с подогретым раствором трипсина и инкубируют в течение часа при 36-37 С. После этого почки измельчают и ресуспендируют в питательной среде (21.

Недостаток данного способа — недостаточно высокий выход жизнеспособных клеток.

Uem изобретения — повышение выхо1 да жизнеспособных клеток.

Поставленная цель достигается тем, что ферментативный раствор вводят1п ч1чо в кровеносное русло лабораторного животного, которое не менее чем через 1 ч после этого забивают и извлекают дезатьрегируемые почки, Пример 1. Мыши дважды на протяжении одного часа в хвостовую вену вводят 0,25%-ный раствор трипсина из расчета 1 мл на 20 r веса, Через

30 мин после последнего введениц животное обескровливают. Затем карковый слой извлеченной почки подвергают дезагрегации s ростовой среде с последующей посадкой клеток, Пример 2. Морской свинке в поверхностную вену уха вводят дважды на .протяжении одного часа 0,25%-ный раст вор трипсина из расчета 1 мл на 20 г веса. Через 30 мин после последнего введения животное обескровливают. Затем корковый слой извлеченной почки подвергают девагьегации в ростовой среде с по следующей посадкой клеток, Предлагаемыи способ обеспечивает abgход жизнеспособных клеток.до 80%.

Ì28

Формула изобретения

Способ дезагрегации почечной ткани лабораторных животных > включающий введение ферменгативного раствора в пееагрегируемые почки через их кровеносные сосуды и извлечение почек из обескровленногоживотнаго, отл и чаю щ яйся тем, что, с целью повышения выхода жиз ð неспособных клеток, введение ферменгативного растваца в: кровеносные сосуды животного осуществляют ih V(YO

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

N 340698, кл. С 12 К 9/00, 1970.

2. Миронова Л. Л. Культуры клеток и применение их для изготовления прогивовирусных препаратов, М., 1968 с. 81-84, Составитель Т. Васильева

PeaaKrcp Л. Пчелинская Техред Н.Майорош Корректор Л. Иван

Заказ 2ф11/48 Тираж 528 . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035; Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул, Проектная, 4