Способ количественного определения1,2,5-триметил-4- пропионилокси-4-фе-нил-пиперидина гидрохлорида

 

Союз Советскик

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 03,0q.q9 (2! ) 2q89q59/23-04 (53) М. Кл.

3 с присоединением заявки ЙУ

G N 21/64

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 30д 581. Бюллетень l49 20

Дата опубликования описания 30Р581 (53) УДК 543.426 (088.8) (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1,2,5-ТРИМЕТИЛ-4-ПРОПИОНИЛ-ОКСИ-4ФЕНИЛПИПЕРИДИНА ГИДРОХЛОРИДА

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения 1,2,5-, -триметил-4-пропионил-окси-4-фенилпиперидина гидрохлорида (промедола).

Известен способ определения 1,2,5-триметил-4-пропионил-окси-4-фенилпиперидина гидрохлорида путем обработки анализируемой пробы раствором перманганата калия в серной кислоте с последующим добавлением воды до появления флуоресценции (1).

Недостаток способа — низкая избирательность определения.

Наиболее близким к предлагаемому 15 изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения

1,2,5-триметил-4-пропионил-окси-4-фенилпиперидина гидрохлорида, заклю- 20 чающийся в титровании анализируемой пробы раствором хлорной кислоты в присутствии кристаллического фиолетового (2) .

Недостаток способа состоит в низ" 25 кой чуствительности (4 мкг/мл).

Цель изобретения — повышение чувствительности определения.

Поставленная цель достигается тем, что в способе количественного 30 определения 1,2,5-триметил-4-пропионил-окси-4 -фенилпиперидина гидрохлорида, обрабатывают анализируемую пробу раствором формальдегида в серной кислоте с последующим добавлением к полученному раствору воды и флуориметрировании полученного раствора.

Чувствительность реакции

0,08 мкг/мл, что позволяет проводить определение препарата в лекарственных формах и биологических жидкостях.

Линейная зависимость между концентрацией промедола и интенсивностью флуоресценции прослеживается.от 0,08 до

80 мкг на 1 мл. Максимум спектра возбуждения при 398 нм и 434 нм.

Пример 1. Определение промедола в 2%-ном растворе.

1 мл 2Ъ раствора препарата из ампули переносят в колбу на 50 мл. Доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают. К 1 мл полученного раствора осторожно приливают 9 мл 1% раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, тщательно перемешивают переворачиванием. К 1 мл данного раствора прибавляют 9 мл дистиллированной воды и замеряют интенсивность флуоресценции. Содержание промедола рассчитывается по калибровочному гра4

834467

Промедол

Метрологические характеристики

Х = 0,0192

4,3

3,8

3,7 ) = +0,0012

4,1

=+20,000847

0,95

3,9

3,9

3,6

Истинное значение определяемой величины:

А = 0,019210,000847

A = 0,0192+0,000847

3,9

3,5

3,7

Т аблица 2

Метрологические характеристики

Навеска таблеток промедола, г

Найдено промедола

Из расчета на одну таблетку, г

По калибровочному графику, мкг/мл (0,103 4,8

0,0240

0,0225

0,099 4,5

Х = 0,02325 фику, который строят следующим образом. К 1 мл стандартного водного раствора промедола с содержанием 500 мкг/мл приливают 9 мл 1% раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, тщательно перемешивают. Затем отмеривают 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 и

1,0 мл полученного раствора и добавПо калибровочному В 2% раство графику, мкг/мл гр/мл

О, 0215

0,0188

0,0183

0,0204

0,0199

0,0199

0,0179

0,0199

0,0177

0,0183

Пример 2. Определение промедола в таблетках 0,025 r.

0,1 г (точная навеска) мелкоиэ- 40 мельченных таблеток переносят в мерную колбу на 50 мл, прибавляют 30 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают до полного растворения.

Затем, доливают дистиллированной водой до метки и снова тщательно пере- 45 мешивают. К 1 мл данного раствора прибавляют 9 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, перемешивают . К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл < 50 дистиллированной воды и замеряют иншяют дистиллированную воду до 10 мл.

Полученные растворы флуориметрируют параллельно с растворами исследуемых образцов. По результатам этих измерений строят калибровочный график.

Результаты флуориметрического определения 2%-ного раствора промедола представлены в табл. 1.

Таблица 1 тенсивность флуоресценции. Содержание промедола определяют по стандартному раствору, для приготовления которого к 1 мл стандартного водного раствора с содержанием препарата

1000 мкг/мл прибавляют 9 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 9,5 мл дистиллированной воды и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.

Результаты флуориметрического определения промедола в таблетках по 0,025 r представлены в табл. 2.

834467 продолжение табл. 2

0,099

0,102

0,096

0,100

4,6

Ь =+ 0,0 0198

4,6

4,6

4,6

=+20,001493

0,098

4,5

Истинное значение определяемой величины:

A = 0,02325+

+ 0,001493

0,102

4,6

0,101 4,7

0,104

5,0

П г

7,0

7,9

35,0

39,5

Х = 35,8

Ь = +3 76

34,5

6,9

7,4

7,9

5,9

37,0, 39,5

29,5 o,95=+ 2 6 8 8

Истинное значение определяемой величины:

А = 35,8+2,688

32,5

6,5

33,5

6,7

42,0

8,4

7,0

35 0

Пример 3. Определение про медола в сыворотке крови.

° 5 мл исследуемой оксалатной крови помещают в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 30 мин при 8 тыс.об/мин. К 2 мл центрифугата в делительной воронке прибавляют

10 мл хлороформа и перемешивают в течение 20 мин.,Хлороформный слой отделяют в чашку для выпаривания.

Экстрагирование повторяют. Хлороформ выпаривают на водяной бане при температуре не выше 90ОС. К сухому остатку приливают 1 мл 1% раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, тщательно перемешивают, добавляют 9 мл дистиллированной воды и переносят в кювету флуо0,0230

0,0230

0,0230

0,0230

0,0225

0,0230

0,0235

0,0250 риметра. Флуориметрируют одновременно со стандартными образцами. Количество промедола в исследуемом образ3Q це определяется по калибровочному графику для построения которого к

1 мл стандартного водного раствора препарата с концентрацией 1000 мкг/мл прибавляют 9 мл 1Ъ-ного раствора

35 формальдегида в концентрированной серной кислоте. К 0,1, 0,5 и 1,0 мл данного раствора приливают соответственно 9,9, 9,5 и 9,0 мл дистиллиро:ванной воды. Стандартные образцы .флуориметрируют одновременно с исследуемыми растворами.

Данные по определению промедола в сыворотке крови приведены в табл. . Таблица 3

834467

Метрологические характеристики

8,2

Х = 41,2

7,6

38,0

40,0

Ь = +1,797

8,0

8,4

42,0

Я =+1,284

o9S—

8,4

42,0

8,2

41<0

45,0

40,0

9,0

Истинное значение определяемой величины:

A = 4i,2+284

8,0

41,0

8,2

0,05

0,1

0,2

0,3

60

0,001

0,005

74

Пример 4. Определение промедола в моче.

К 2 мл мочи в делительной воронке прибавляют 10 мл хлороформа и перемешивают в течение 10 мин. Экстрагирование повторяют. Хлороформный слой отделяют в фарфоровую чашку для выпаривания. Выпаривают на водяной бане при 90 С. К сухому остатку приливают

1 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте,. тщательно перемешивают, добавляют

9 мл дистиллированной воды. Полученный раствор переносят в кювету флуориметра и флуориметрируют одновременно

Количество промедола в мо

По калибровоч- В 1 мл моч ному графику, мкг/мл мкг/мл

8,4 42,0

Определение производилось на отечественном электронном флуориметре

ЭФ-3NA с фильтрами В„ -1 и В -2 °

Спектры измерялись на флуоресцентном спектрофотометре "Хитачи" модель MPF-2A производства Японии.

Концентрация раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, используемого для обработки анализируемой пробы, составляет от

0,001 до 0,3 г/мл. Оптимальными концентрациями являются от 0,01 до

0,1 г/мл. Фактически для определения,промедола использовалась концентрация формальдегида в концентрированной серной кислоте 0,01 г/мл.

Зависимость интенсивности флуоресценции от коэффициента формальдегида в серной кислоте приведена в табл. 5

Т а б л и ц а 5 со стандартными образцами. Количество промедола в исследуемой пробе определяют по калибровочному графику, для построения которого к 1 мп стандартного водного раствора препарата с концентрацией 1000 мкг/мл прибавляют

9 мл 1Ъ-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте.

К 0,1, 0,5 и 1,0 мл данного раствора приливают 9,9, 9,5 и 9,0 мл дистиллированной воды. Стандартные образцы флуориметрируют одновременно с исследуемыми растворами.

Данные по определению промедола в моче отражены в табл. 4.

Таблица 4

При изучении оптимальных условий проведения флуоресцентной реакции промепола с формальдегидом в серной кислоте выявлено влияние соотНошения объемов водной фазы (стандартный водный раствор промедола) и фазы концентрированной серной кислоты с формальдегидом на интенсивность флуоресценции (табл. 6). Оптимальными являются соотношения объемов 3:1 (раствор формальдегида в концентрированной серной кислоте: водный раствор промедола).

Зависимость относительной интенсивности флуоресценции от соотношения объемов фаз серной кислоты и

834467

Таблица 7

Соотношение объемов (вода : кислота) Относительная интенсивность флуоресценции,%

Таблица 6

99:1

49:1

19:1

90 (0

100

19г1

9:1

100

100

9:1

4:1

100

5:1

3:1

100

4:1

2:1

98

3:1

95

2,5:1

Формула изобретения

2:1

1,5:1

Составитель Л. Соломенцева

Техред Н. Келушак Корректор О. Билак

Редактор Е. Кинив

Заказ 4056/64 Тираж 907 Подписное. ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 водного раствора промедола приведена в табл. 6 °

Соотношение объемов Относительная (кислота : вода) интенсивность! флуоресценции

При исследовании оптимальных соотношений объема смеси промедола с форм-у» альдегидом в кислоте, приливаемого объема дистиллированной воды и получении флуоресцирующего раствора выявлено, что оптимальными являются соотношения объемов не больше, чем 49:1 и не меньше, чем 9:1.

В табл. 7 приведена зависимость относительной интенсивности флуоресценции от разбавления водой анализируемой пробы.

Способ количественного определения 1,2,5-триметил-4-пропионил-окси-4-фенилпиперидина гидрохлорида, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения, анализируемую пробу обрабатывают раствором формальдегида в серной кислоте с последующим добавлением к полученному раствору воды и флуориметрировании полученного раствора.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Инструктивно-методические указания. Вып. 1. M., 1976, с. 45.

2. Государственная фармакология

СССР. 10-е изд. М., 1968, с. 563 (прототип).