Матрица для иммобилизации биологически активных веществ

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

© (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 220180 (21) 2878323/28-13 с присоединением заявки É9 (23) Приоритет

Опубликовано 151181 Бюллетень Но 42

Дата опубликования описания (51)м Кл

А 61 К 9/70

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий

<5З) < 616 — 089..22(088.8) (72) Автор изобретения

Л.Г.Власов

Всесоюзный научно-исследов ательский институт текстильно-галантерейной промышленности (71) Заявитель (54) МАТРИЦА ДЛЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИ "

АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

Изобретение относится к биохимии и иммунологии, а точнее к матрицам (носителям) для иммобилизации различных биологически активных веществ: .белковых тел, например ферментов, антигенов, антител лекарственных препаратов, ингибиторов ферментов, и может быть использовано в медицине, биохимии, иммунологии, афинной хроматографии при лечении различного рода заболеваний, а также в производстве вакцинно сывороточных препаратов,для разработки тест-систем ранней диагностик и различных заболеваний.

Текстурированные высокообъемные нити из синтетических полимеров применяются для изготовления различного ассортимента одежды t;1). целью изобретения является расширение- ассортимента матриц для иыиобили- 2О эации биологически активных веществ.

Эта цель достигается применением в качестве матриц для иммобилизации биологически активных веществ комплексных текстурированных высокообъем-ных нитей из синтетических полимеров .

II р и м е р 1. Для эксперимента на плоскофанговой машине 10 класса изготавливаются три вида вязаного полотна: из капроновой мононити 5 текси ЗО х 2, из капроновой многофиламентной нити 5 текс х 2 и из текстурирован— ной высокообъемной нити 5 текс х 2.

Полученные вязанные полотна тщательно отстирывают и затем гидролиэуют в ЗЪ-ной соляной кислоте. После отмывки дистиллированной водой и сушки на воздухе от каждого полотна отрезают по два образца весом 0,1 r, и все образцы вместе активируют глутаровым альдегидом. После активации тщательно отмывают дистиллированной водой.

Затем активированные образцы (также все вместе) помещают в 1 — ный раствор трипсина в фосфатном буферном растворе, имеющим рН = 6,75 и ставят для инкубации в холодильник (4"С) на

18 ч. Далее образцы вязаных материалов тщательно отмывают фосфатным буферным раствором и определяют их протеолитическую активность. Субстратом служит 1%-ный раствор казеина в фосфатном буфере. Активность привито"о фермента оценивают по оптической тлотности раствора, обработанного по общепринятым методикам нингидрином. Измерения проводят на фотоэлектроколориметре ФЭК вЂ” 56, толщина кюветы - 1 см. После выдерживания текстильных образцов в растворе каэеина

880427 в течение 2 ч их извлекают, раствор обрабатывают для измерения оптической плотности, а извлеченные образцы после тщательной промывки буферным раствором снова помещают в свежий раствор казеина на 2 ч и эту опера- . цию повторяют в течение пяти раз.

В табл. 1 показана активность трипсина, иммобилиэованного на капроновых сетеполотнах, изготовленных из нитей

5 текс х 2 (средние данные из двух определений для каждого типа образца)

Пример 2. На вязальной машине КОД вяжут три образца трубок: из капроновой мононити 1,67.текс х 3, из капроновой многофиламентной. нити

1,67 текс х 3 и из текстурированной 15 капроновой высокообъемной нити 1,67 текс х 3. Обработку и испытания полученных образцов трубок ведут аналогично примеру 1. . В табл. 2 представлена активность 20 трипсина, иммобилизованного на капро.новых трубках, изготовленных иэ нитей 1,67 текс х 3.

Как видно из представленных в табл. 1 и 2 результатов существенно более лучшим носителем для иммобили- -. зации биологически активного белка (трипсина) служат текстильные материалы, полученные на основе текстурированной высокообъемной нити. Испыта- Зу ния капроновых матриц с привитым антигеном показывают, что 20 мл сыворотки полностью исчерпываются 3 г текстильного материала с привитым антигеном, изготовленным на основе тек- З стурированной нити, и не происходит заметного исчерпания сыворотки, если в качестве матрицы используют материТаблица 1

Оптическая плотность раствора, в опытах

Образец

0,86

0,67 0,71

0,69

0,75

0,39

0,37

0,43

0,49

0,46

0,20

0,25

0,32

0,35

0,35

Полотно из мононити

Контрольный раствор казеина

0,00 0 01 0,01

0,00

0,01

Полотно их текстурированной нити

S !

Полотно из многофиламентной нити ал на основе многофиламентных или мононитей даже в случае добавления к ней 20 г такого материала. Для проверки поведения текстильных матриц с иммобилизованными ингибиторами ферментов в качестве сорбентов для афинной хроматографии изготовлены образцы на основе капроновых мононитей, многофиламентных нитей и текстурированных нитей с привитой на них E:аминокапроновой кислотой. Образцы испытываются на поглощение трипсина.

Полученные результаты также подтверждают, что образцы, изготовленные на основе текстурированных нитей, значительно более активны в качестве биоспецифических сорбентов, чем образцы, изготовленные из многофиламентных или мононитей, При иепольэовании других методов .активации, в частности, гидразинолиэа, получены аналогичные результаты при использовании синтетических по,лиэфирных нитей. Таким образом, полученные экспериментальные результаты указывают на то, что использование текстурированных нитей позволяет изготавливать существенно более активйые матрицы для иммобилизации биологически активных препаратов. При,менение текстурированных высокообъем.ных нитей и изделия на их основе в качестве матриц для иммобилизации биологически активных препаратов позволяет повысить активность носителя, а потому имеет определенные преимущества перед текстильными матрицами, изготовленными из сырья других типов .

Кроме этого, активность таких матриц является высокой.

880427,Таблица 2

Оптимальная плотность раствора, д, в опытах

Образец

Трубка из текстурированной нити

1,15

1,08

1,20

1,10

1,23

Трубка иэ многофиламентной нити

0,71 0,63 0,68

0,82

0,81

0,61 0,57 0,59

0,61

0,58

Трубка иэ мононити

Контрольный раствор казеина

О, 03 0,02

0,00 . 0,01

0,00

Сост авит ель С. Малютин а

Редактор К.Волощук Техред М.Рейвес Корректор E.Ðoøêî

Эаказ 9789/9 Тираж 690 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

ФиЛиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Формула изобретения

Применение комплексных текстурированных высокообъемных нитей из синтетических полимеров в качестве матрища30 для иммобилизации биологически активных веществ.! Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Смирнов A.Ñ. Технология трикотажа из текстурированных нитей. М., "Легкая индустрия", 1975, с. 68.