Способ получения хлопкового аллергена

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛОПКОВОГО АЛЛЕРГЕНА путем экстракции исходного сырья, прессования полученной смеси и отделения экстракта центрифугированием , с последующей обработкой экстракта бензойно-кислым натрием,охлажденным ацетоном,, выделением, очисткой и высушиванием целевого продукта, отличающийся тем. что. с целью повЕлиения специфичности целевого продукта, в качестве исходного сырья используют хлопок-сырец, вытрепку, пыгь чесального и прядильного цехов и цеха суровой сортировки, взятых в равных соотношениях, экстракцию ведут О,1%-ным раствором аммиака при рН 8,5-9,0, температуре 16-18°С в течение 5-7 суток при соотношении сырье:экстрагирующий раствор 1:8,.до и после прессования осуществляют фильтрацию, экстракт, непосредственно после центрифугирования выдерживают 16-20 ч, обработк ацетоном проводят непосредственно после обрабоч;ки бензойно-кислым натрием , выделение целевого продукта t осуществляют с помощью фильтрации, очистку проводят обработкой охлажденным ацетоном и высушенный целевой продукт обрабатывают нейтральный фосфатным буфером, содержащим 0,250 ,30% фенола, в течение 72-96-Ч при температуре 2-10°С.

СОЮЗ GOBETCMHX

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУЬЛИН

3(5В А 61 К 39 35

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬГГИЙ

ТЕЗЛФЧЖЫЙ ф1 ф И Щ фф А

Н АВтсеСномм свиДктЕЛьСтВМ

I (21) 3316663/28-13 (22) 13.07.81 (46) 07 ° 04 ° 83, Бюл. У 13 (72) Н.С. Бакулева и М.Э. Капитонова (71) Ивановский государственный медицинский институт нм. A.Ñ. Бубнова и Предприятие по производству бактерийных препаратов Московского научноисследовательского института вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова (53) 576.8.097(088.8) (56) 1. Berrens С., Joung E. "Preparation and properties of purified

house dust allergen", hiature, 1961,, 190. 536-537 (прототип). (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛОПКОВОГО

АЛЛЕРГЕНА путем экстракции исходного сырья, прессования полученной смеси и отделения экстракта центрифугированием, с последующей обработкой экстракта бенэойно-кислым натрием,охлажденным ацетоном,. выделением, очисткой и высушиванием целевого продукта, отличающийся тем, что, -с целью повьиаения специфичности целевого продукта, в качестве исходного сырья используют хлопок-сырец, вытрепку, пыль чесального и прядильного цехов и цеха суровой сортировки, взятых в равных соотношениях, экстракцию ведут 0,1%-ным раствором ам.миака при рН 8 5-9,0, температуре

16-18 С в течение 5-7 суток при соотношении сырье:экстрагирующий раствор 1:8, до и после прессования осуществляют фильтрацию, экстракт. непосредственно после центрифугирования выдерживают 16-20 ч, обработк ацетоном проводят непосредственно после обработки бензойно- кислым натpReM выделение цедевого продукта осуществляют с помощью фильтрации, очистку проводят обработкой охлажденным ацетоном и высушенный целе.вой продукт обрабатывают нейтральным С» фосфатным буфером, содержащим 0,250,30% фенола, в течение 72-96-ч при температуре 2-10. С. ъФ

1009472

Составитель П. Бонарцев

Редактор О. Юркова Техред М. Гергель Корректор М. Демчик

Заказ 25 39/4 Тираж 711 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к.аллергологии и может быть использовано для диагностики аллергических заболеваний у рабочих хлопкоперерабатывающих предприятий.

Известен способ получения аллергена из пыли путем экстракции исходного сырья — пыли жидкостью эванс-ко, ка с фенолом,прессования полученной смеси и отделения экстракта центрифугированием с последующей фильтрацией,10 обработкой экстракта бензойно-кислым натрием, охлажденным до — 10 С ацетоном, выделением с помощью экстрагирования жидкостью эванс-кока, очисткой центрифугированием, диализоми высу- )5 шиванием целевого продукта (1) .

Однако йзвестный способ не обеспечивает получения целевого продукта высокой специфичности.

Целью изобретения является повышение специфичности целевого продукта.

Цель достигается тем, что по споСобу получения аллергена из пыли пуа тем экстракции исходного сырья, прессования полученной смеси и отделения экстракта центрифугированием с последующей обработкой экстракта бензойно-кислым натрием, охлажденным ацетоном, выделением, очисткой и высушиванием целевого продукта, в качестве исходного сырья используют хлопоксырец, вытрепку,пыль чесального и прядильного цехов и цеха суровой сортировки, взятых в равных соотношениях, экстракцию ведут 0,1%-ным раствором аммиака с рН 8,5-9,0, температуре 16-18 С в течение 5-7 сут при соотношении сырье:экстрагирующий раствор 1:8, до и после прессования осуществляют фильтрацию,экст-/ 4П ракт непосредственно после центрифугирования выдерживают 16-20 ч, обработку ацетоном проводят непосредственно после обработки бензойнокислым натрием, выделение целевого продукта осуществляют с помощью фильтрации, очистку проводят обработкой охлажденным ацетоном и высушенный целевой продукт обрабатывают нейтральным фосфатным буфером, содержащим 0,25-0,30% фенола в течение 7296 ч при температуре 2-10 С.

Пример. Исходное сырье (хлопковое волокно, вытрепка, пыль цеха сусуровой сортировки, пыль чесального и прядильного цехов, взятые в равных количествах, экстрагируют 0,1Ъ-ным раствором аммиака рН 8,2-9,0 при

16-18 С в течение 5-7 суток при соотношении сырье:экстрагент 1:8. Полученную смесь фильтруют через 2 слоя батиста, осадок прессуют и удаляют, экстракт повторно фильтруют, затем фильтрат центрифугируют при 25000 в течение 30 мин, осадок удаляют, а экстракт выдерживают при 2-10 С в течение 16-20 ч. К экстракту добавляют бензойно-кислый натрий из расчета 20 ч/л, устанавливают рН 3,4-3,7

2н.НС1. В результате образуется бензойная кислота, на которой адсорбируется аллерген. Для отделения аллергена от бензойной .кислоты осадок растворяют в ацетоне, охлажденном до

-20 С и выдерживают 18 ч при темпео

1 о ратуре от -20 до -30 С. Выдерживание в ацетоне необходимо для полного отделения аллергена. Аллерген отделяют от ацетона фильтрованием, фильтрат удаляют, а осадок дополнительно промывают охлажденным до -20 C ацетоном и подсушивают, после чего обрабатывают нейтральным фосфатным буфером с 0,25-0,3% фенола в течение

72 ч при температуре 8 С при периодическом встряхивании для лучшего растворения осадка.

Изобретение позволяет повысить специфичность аллергена (В положительных реакций 82,1%, по известному способу — 26%),