Способ диагностики сахарного диабета

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ САХАРНОГО .ДИАБЕТА путем определения содержания гликозилированного гемоглобина в эритроцитах крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагностики , дополнительно определяют содержание ферритина и трансферрина в сыворотке крови и при повышении содержания гликозилированного гемоглобина и ферритина и снижении уровня трансферрина диагностируют сахарный диабет. (Л С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК,.SUÄÄ 115723 зЮ А 61 В 10/00 с .

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ "

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTMA

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3488725/28-13 (22) 10.09.82 (46} 30.09.84. Бюл. N - 36 (72) А.П. Андреева, А.A. Левина, С.Д.Арапова, А.Г.Мазовецкий и Ю.Н.Токарев (71) Институт эксгериментальной эндокринологии и .химии гормонов АМН

СССР и Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (53) 616.07(088.8) (56) 1. Н.Bebegeil-Diabetes Mellitas. ЧЕВ. Justan Fisiher, verlag, 1979.

2. Андреева А.П., Арапова С.Д., Левина А.А., Мазовецкий А.Г., Токарев Ю.Н. Содержание гликозилированного гемоглобина у больных латентным диабетом. — "Советская медицина", 1981, И- 10, с. 30-33 (прототип). (54)(57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ САХАРНОГО ДИАБЕТА путем определения содержания гликозилированного гемоглобина в эритроцитах крови, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, дополнительно определяют содержание ферритина и трансферрина в сыворотке крови и при повышении содержания гликозилированного гемоглобина и ферритина и снижении уровня трансферрина диагностируют сахарный диабет.

1115723

Изобретение отнОсится к медицине, в частности к эндокринологии и гематологии, и может быть использовано для диагностики сахарного диабета, 5

Известен способ диагностики сахарного диабета путем определения содержания иммунореактивного инсу лина в крови при проведении пробы на толерантность к глюкозе 1

Однако этот способ характеризуется невысокой точностью.

Известен способ диагностики сахарного диабета путем определения содержания гликозилированного гемо- 15 глобина в эритроцитах крови (2 J.

Недостатком известного способа является его невысокая точность, поскольку повышенное содержание гликозилированного гемоглобина может быть 20 у лиц с повышенным содержанием фемального гемоглобина, при наличии других генетических обусловленных аномальных форм гемоглорина, например у больных уремией.. 25

Цель изобретения — повышение точности диагностики.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики сахарного диабета путем определе- 5р ния содержания гликозилированного гемоглобина в эритроцитах крови,дополнительно определяют содержание ферритина и трансферрина в сыворотке крови и при повьппении содержания ферритина и гликозилированного гемоглобина и снижении уровня транс— феррина диагностируют сахарный диабет.

Способ осуществляют следующим об- 40 разом.

В крови испытуемого проводят количественные определения трех биохимических маркеров: ферритина, трансферрина и гликозилированного гемоглоби- 45 на.

Для определения ферритина и трансферрина берут 5 мл венозной крови в сухую пробирку и отделяют сыворотку.

Для определения ферритина в пробир-, 50 ку, содержащую 0,5 мл взвеси биогеля

P-300, связанного с антителами против ферритина печени, добавляют 0,1 мл исследуемой сыворотки, инкубируют пробирку 3 ч при 37 С. Избыток сы- 55 воротки отмывают 3 раза физиологическим раствором, в пробирку вносят

0,1 мл антисыворотки, меченой

XHBAlc

1 где Эт оптическая плотность фракции, содержащей НвА оптическая плотность исходного гемолизата; разведение исходного гемолизата; объем фракции, мл. йодом-125, и инкубируют 30 мин при

37 С; затем избыток меченой антисыворотки отмывают 3 раза физиологическим раствором, Радиоактивность определяют на счетчике g-ëó÷åé и по активности высчитывают количество ферритина на основе предварительно построенной кривой связывания стандартных количеств ферритина в приведенных условиях, Определение трансферрина проводят следующим образом.

1 мл антисыворотки против трансферрина смешивают с 10 мл IX-ного о агара Дифко, разогретого до 56 С, и выливают в чашку Петри, охлаждают, делают лунки величиной 0,05 мм специальным пробойником, в лунки вносят по 2 мкл стандартной сыворотки в 3-х разедениях и исследуемых сывороток. На следующий день измеряют величину кольца преципитации, по стандартным разведениям строят кривую и по ней определяют содержание трансферрина в исследуемой пробе.

Для определения гликозилированного гемоглобина (ГЛИ-Нв) 1 мл эритро цитов отмывают 3 раза физиологическим раствором, гемолизируют, добавляя 3 мл дистиллированной воды, диализуют в течение ночи против дистиллированной воды, центрифугируют при

8000 об/мин 1 ч и получают гемолизат. 1 мл гемолизата забуферивают, пропуская через колонку с БерЬ

g-2S, забуференную фосфатным буфером, рН 6,7; 0,1 M. 1 мл забуференного гемолизата наносят на колонку с БИО-Рекс-70, предварительно забуференную тем же буфером. Собирают первые 70 мл, измеряют оптическую плотность при 414 нм. Одновременно измеряют оптическую плотность исходного гемолизата. Процент гликозилированного Нв рассчитывают по фор-. муле

1115?23

Составитель Н.Валеева

Редактор Е.Копча Техред И.Асталош Корректор M.Øàðîøè

Заказ 6803/3 Тираж 68? Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Содержание ферритина, трансферрина и гликозилированного гемоглобина в норме соответствует:: 180

30 мкг/мм; 260+20 кг7. и 2,1+0,6Х.

В тех случаях, когда содержание ферритина и гликозилированного гемоглобина выше нормы, а трансферрина ниже нормы, диагностируют. сахарный диабет.

Пример 1. У больной Л., 50 лет, при массовом эпидемиологическом обследовании выявлены следующие данные: ферритин 598 мкг/л, трансферрин 160 мг 7., Гли-Нв-2Х, базальное содержание глюкозы 95 мг Х, гликозо. толерантный тест (ГТТ): натощак

86 мг 7., через 1 ч после нагрузки

140 мг X через 2 ч ?6 Х, что соответствовало нормальным значениям, кроме уровня ферритина и трансферрина.

Учитывая,что у,больной была отягощена наследственность в отношении сахарного диабета (мать и сестра болели сахарным диабетом), ее включили в группу потенциального диабета. Повторное обследование было проведено через 3 мес., результаты по ферритину и трансферрину оставались повышенными, содержание Гли-Нв также повысилось (12,5X), но тест на толерантность к глюкозе бып еще не изменен. Следующее обследование было проведено через 4 мес, при этом обследовании содержания ферритина, трансферрина и Гли-Нв оставались увеличенными, но и показатели ГТТ были к этому времени также изменены: натощак 98 мг7., через 1 ч 220 мгХ, через 2 ч 1?0 мг7.. По совокупности всех данных был поставлен диагноз латентного диабета.

Пример 2. Больной А., 20 лет, при обследовании было выявлено повышение ферритина 410 мкг/л, понижение трансферрина 145 мгХ, однако уровень Гли-Нв был повышен незначительно (6,5X), а ГТТ был нормальным: натощак ?5 MrX, через 1 ч 135 мгХ, через 2 ч ?2 мгХ. Больной был выписан иэ стационара с рекомендацией повторного обследования через 4 мес.

При повторном обследовании, кроме повышения ферритина и трансферрина, наблюдалось уже значительное повышение Гли-Нв (16,57), а также изменения в ГТТ: натощак 100 мгХ, через

1 ч после нагрузки 250 мгХ, через

2 ч 190 мг7.. Больному был поставлен диагноз латентного диабета, а через год был диагностирован сахарный диабет.

П р .и м е р 3. Больная А-ва, 6 лет. Диагноз — -талассемия. При обследовании было выявлено повышение ферритина 500 мкг/л и Гли-Нв ?X, однако трансферрин оставался в пределах нормы 265 кг7., ГТТ тоже был в пределах нормы. При последующих наблюдениях нарушения углеводородного обмена обнаружено не было.

Использование изобретения в медицинской практике позволяет повысить точность диагностики сахарного диабета на 25-30Х и может быть использовано при диагностике потенциальной и латентной форм сахарного диабета.