Способ введения атропина

 

СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ АТРОПИНА путем создания депо-формы препарата с помощью высокомолекулярных соединений , о тлич ающий ся тем, что, с целью пролонгирования действия атропина In vivo, предварительно парентерально вводят низкоаффинные гомологичные или гетерологичные специфичные к атропину антитела с титром 1:80-1:160 и содержанием иммуноглобулинов класса IgG, равным 20-50%, с последующим введением через 16-32 ч атропина в дозе 1-10 мг/кг.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИК

O9} OI}

pe} А 6.1 В 10/00, А 61 K 31/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН Я " =

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3436859/28-13 (22) 05.05.82 (46) 15.09.84. Бюл. Ф 34 (72) В.И. Кулешов, С.Н. Голиков, В.К. Козлов, Ю.А. Любиков, В. К. Суханкин, Г. А. Гурьянов., А.Я. Беспалов и С.Г. Кузнецов (71) Институт токсикологии (53) 576.8.07(088.8) (56) 1. Патент США Ф 3901967, кл. А 61 К 27/12, 1973. (54) (57) СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ АТРОПИНА путем создания депо-формы препарата с помощью высокомолекулярных соединений, отличающийся тем, что, с целью пролонгирования действия атропина 1п vivo предварительно парентерально вводят низкоаффинные гомологичные или гетерологичные специфичные к атропину антитела с титром 1:80-1:160 и содержанием иммуноглобулинов класса IgG, равным 20-507., с последующим введением через 16-32 ч атропина в дозе 1-10 мг/кг.

1113094

Изобретение относится к медицине, а именно к использованию полимерных соединений в качестве депообразующей системы при пролонгировании фармакологического действия лекарственных веществ.

Существуют различные способы пролонгирования фармакологического действия лекарственных соединений с применением в качестве депообразующих 1О систем полимеров различного строения, которые по механизмам реализации эффекта пролонгирования и по конечной цели имеют отношение к изобретению.

Специфичные к низкомолекулярным со15 единениям антитела ранее не использовали для продления фармакологического действия этих соединений. Способы, 90 мг атропина в 5 мл. Препараты применяют перорально, освобождение активного начала происходит в желудочно-кишечном тракте. Препарат оказывает терапевтический эффект в течение 24 ч после приема.

Однако в известном способе атро40 пин депонируется пассивно и для полу-45 чения депо-форм препарата требуются значительные его дозы. Освобождение атропина из депо-формы зависит от диффузионных свойств использованных полимеров и не зависит от радиального уменьшения концентрации атропина в пределах биофазы структуры мишени.

Цель изобретения — цролонгирование действия атропина in vivo.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу введения атро,пина путем создания депо-формы препарата с помощью высокомолекулярных

55 обеспечивающие пролонгацию фармакологического действия атропина с по- 20 мощью антител, также не были описаны.

Известен способ введения атропина путем создания депо-формы препарата с помощью высокомолекулярных со- 25 единений j1) . В этом препарате в качестве депообразующих соединений использованы нерастворимые, но набухающие в воде полимеры, полученные из винил-, стирол-, или винилпропан сульфоновых кислот, а также из сополимеров моно- и диэфиров акриловой и метакриловой кислот с многоатомными спиртами. Депо-форму атропина получают п vitro при вымачивании этих полимеров в течение 12 ч в физиологическом растворе, содержащем более соединений, предварительно парентерально вводят низкоаффинные гомоло1 гичныеили гетерологичные специфичные к атропину антитела с титром 1:801:160 и содержанием иммуноглобулинов класса IgG, равным 20-50Х, с последующим введением через 16-32 ч атропина в дозе 1-10 мг/кг °

Предлагаемый способ реализуется следующим образом.

Животным вводят парентерально гомологичные или гетерологичные, специфичные к атропину антитела, которые могут применяться в виде антисыворотки или глобулиновой фракции сыворотки. Антисыворотки, специфичные к атропину, получают от кроликов или мышей, которых иммунизируют коньюгатами БСА (бычьего сывороточного альбумина) с химически модифицированным атропином. Глобулиновые фракции сывороток получают высаливанием насыщенным водным раствором сульфата аммония при 40Х насыщении.

Используемые антисыворотки должны име-ь следующие характеристики: титр антител к атропину 1:80-1:160 (определяется в реакции непрямой гемагглютинации = РНГА с эритроцитарным диагностикумом с гаптенной детерминантой - модифицированным атропином); содержание антител класса IgG 20-50Х (определяется по РНГА в присутствии

0,2М водного раствора меркаптоэтанола); специфичность антител устанавливается по ингибированию РНГА атропином.

Доза вводимых специфических антител к атропину рассчитывается по формуле

Д = (240-260) х Э где Д вЂ” доза вводимого антиатропинового Р-глобулина (мг/кг);

Д вЂ” атропина (мг/кг).

Через 0,5-1,5 сут после введения специфичных к атропину антител вводят атропин любым способом в дозе 1-10 мг/кг.

Таким образом, осуществление последовательности приведенных выше операций делает возможным формирование депо-формы атропина in vivo, с применением в качестве высокомолекулярной депообразующей системы специфичных к атропину антител.

Использование предлагаемого способа пролонгирования фармакологического действия атропина позволяет увеличить

13094 4 сов.

Атропин +

Специфическое Комплекс ееропиие со антитело специфическим антителом

20 з 11 длительность действия атропина в

2-8 раз.

К моменту введения атропина в крови у животных циркулируют специфичные к атропину антитела. Взаимодействие атропина со специфическими антителами приводит к образованию комплексов атропина со специфическими

Применение данной депообразующей системы делает возможным постепенное высвобождение атропина, что поз- 15 воляет достигнуть пролонгации его действия без увеличения вводимой дозы препарата и, соответственно, увеличить эффективно действующую его дозу, так как атропин находится в связанной форме и уменьшены потери за счет неспецифической сорбции.

Необходимо отметить, что данный способ пролонгации фармакологического действия атропина предусматривает 25 использование специфических антиатропиновых антител только определенных вышеуказанных характеристик.

При использовании специфических к ате ропину антител с отличающимися от приведенных свойствами можно получить либо отмену действия атропина, либо отсутствие пролонгации.

Таким образом, предлагаемый способ предполагает практическое исполь-3 зование совершенно нового свойства специфических антител к атропину— пролонгацию его действия.

Для исследования длительности фармакологического действия атропи- 40 на применяются общепринятые фармакологические модели, наиболее адекватные для анализа холинолитических эффектов атропина: модель ареколинового тремора; измерение частоты пуль-45 са; измерение величины зрачка. Вследствие того, что центральные эффекты атропина .не ярко выражены, а ареколин холиномиметик преимущественно центрального действия, для оценки 50 длительности действия атропина были использованы и другие модели, позволяющие объективно исследовать про-, должительность действия препарата.

По данным, полученным при измере- 55 нии частоты пульса и величины зрачка, длительность действия атропина (при пролонгировании pro предлагаемым антителами (депо-формы атропина), при диссоциации которых выделяется

1 свободный атропин. Изменение концентрации свободного атропина приводит к смещению равновесея в данной обратимой реакции, то вызывает увеличение диссоциации комппекспособом) увеличивается до 8 раз.

Длительность пролонгации определяется сроком персистенции в орган;изме комплекса атропина с антителами и вводимой дозой атропина.

Предлагаемый способ пролонгации применим для увеличения длительности действия и других лекарственных соединений при условии получения специфичных к ним антител нужных характеристик.

Предлагаемый способ пролонгирования фармакологических эффектов атропина с применением специфических антител определенных характеристик может найти применение в клиниках внутренних и глазных болезней при лечении язвенной болезни желудка, холецистита, бронхиальной астмы, терапии воспалительных заболеваний глаз и так далее.

Пример 1. Пролонгирование фармакологического действия атропина на модели ареколинового тремора с применением специфичных антител в виде антисыворотки.

Эксперименты выполняют на разнополых белых лабораторных мьппах массой 16-20 граммов в осенне-зимний период. Опытным мышам за 24 ч до введения атропина внутрибрюшинно вводят по 6 мл прогретой в течение

30 мин при 56 С кроличьей сыворотки со следующими характеристиками: титр специфичных к атропину антител 1:80; содержание антител класса IgG не менее 50Х. Контрольные животные получают равные количества аналогично обработанной нормальной кроличьей сыворотки. Антропин вводят подкожно в дозе 2,5 мг/кг через 24 ч после введения сывороток.

Пример 2. Эксперимент: выполняют аналогично примеру 1, но антись7воротку (как и нормальную кроличью

1113094 сыворотку — НКС) вводят за 16 ч до введения атропина.

Пример 3. Эксперимент выполняют аналогично примеру 1, но атропин вводят через 32 ч после введения 5 сывороток.

Hp и.м е р ы 4 и 5. Эксперименты выполняют аналогично примеру 1, но вводят 5 и 10 мг/кг атропина перорально.

H p и м е р ы 6-8. Эксперименты выполняют аналогично примеру 1, но кроличья антисыворотка к атропину имеет следующие характеристики: титр антител к атропину 1:160; содержание антител класса IgG — 207. Атропин вводят в дозах 2 5 5 0 и 10 0 мг/кг.

Пример ы 9-11. Эксперименты выполняют аналогично примеру 1, но опытным мышам вводят по 0,5 мл уравновешенного по белку со специфичной к атропину антисывороткой 17-глобулина специфичного к атропину со следующими характеристиками: титр антиатропиновых антител 1:80; содержание антител класса IgG — 507. Контрольные животные получают равное количество нормального кроличьего -глобулина. Атропин вводят в дозах 2,5; 5 0 и 10 мг/кг внутримьнпеч- ЗО но.

На животных, подвергнутых перечисленным в примерах 1-11 воздействиям, Длительность эффекта атропина в минутах после введения его в дозах

Группы экспериментальных жиКоличествотных во мьппей

2,5 мг/кг 5 мг/кг 10 мг/кг 25 мг/кг

Введение нормальной сыворотки кролика

90

150

180

Введение нормального кроличьего -глобулина

180

90

150

Введение антиатропиновой сыворотки:титр 1:20, IgG -50X*

120

180

150

Введение антиатропиновой сыворотки:титр 1:160, IgG -207.

150

150

180

Интактные мьппи 270 оценивают продолжительность защитного действия укаэанных доз атропина от 2 ЕД® ареколина. 3а критерий фармакологического действия атропина принимают полное отсутствие клиники ареколинового тремора у мьппей после введения атропина.

Результаты продолжительности защитного действия атропина при предварительном введении мьппам специфических антиатропиновых тел, полученные в экспериментах, перечисленных в примерах 1-11, суммированы в таблице. Из представленных данных следует, что пассивная иммунизация животных к атропину и последующее его введение, т,е. предлагаемый способ пролонгирования фармакологического действия атропина обеспечивает удлинение в

2-8 раз длительности действия атропина и увеличение эффективно действующей дозы препарата (снижение необходимой для получения эффекта атропина дозы).

Как видно из представленных данных, пассивная иммунизация к атропину антителами определенных характеристик и последующее его введение, т.е. предлагаемый способ пролонгирования фармакологического действия, обеспечивает пролонгирование действия атропина in vivo.

90 150 180

1113094

Продолжение таблицы

Группы экспериментальных жиКоличествотных во мышей

150

180

150

120

90

180

180

Отсутствие эффекта пролонгации действия атропина, так как используются антитела с другими характеристиками.

Составитель П. Бонарцев

Редактор С. Лисина Техред И. Асталош Корректор С. Шекмар

Заказ 6487/5 Тираж 687 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Введение антиатропинового глобулина:титр 1:801:160, IgG

-20-50

Введение антиатропиновой сыворотки: титр

1: 320-1: 640.

IgG -100 +

Введение антиатропиновой сыворотки: титр

1: 1280-1: 5120, IgG от 20 до

50 *

Длительность эффекта атропина в минутах после введения его в дозах

2,5 мг/кг 5 мг/кг 10 мг/кг 25 мг/кг