Способ восстановления серологически атипичных штаммов микроорганизмов в @ -форму

 

СПОСОБ ВОССТАНОВЛЕНИЯ СЕРОЛОГИЧЕСКИ АТИПИЧНЫХ ШТАММОВ МИКРООРГАНИЗМОВ В S-ФОРМУ путем вьращивания микроорганизмов в питательном бульоне, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, микроорганизмы выращивают в питательном бульоне в присутствии 0,2-0,4%-ной дрожжевой РНК в течение 16-20 ч.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

69) 01) 4(51) С 12 N 1/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ, НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ H ОТКРЫТКОЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К ILCTOPCPlOMV CBWIETTOVCTRV (21) 3553996/28-13 (22) 30. 12 ° 82 (46) 23.01.85. Бюл. № 3 (72) В.Я.Чаплинский и В.С.Сотников (71) Днепропетровское. предприятие по производству бактерийных препаратов (53) 576.8.093.1(088.8) (56) 1. Braun W., Mhallon 3 .Э. Proceeding. -"National Academical Science", U SA, 1954, 4, 162.

2. Регламент производства бактерийных. диагностикумов из микробов семейства кишечных, ¹ 21-75, с. 3 (прототип) . (54) (57) СПОСОБ ВОССТАНОВЛЕНИЯ СЕРОЛОГИЧЕСКИ АТИПИЧНЬИ ШТАММОВ МИКРООРГАНИЗМОВ В Я-ФОРМУ путем выращивания микроорганизмов в питательном бульоне, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, микроорганизмы выращивают в питательном бульоне в присутствии 0,2-0,4Х-ной дрожжевой PHK в течение 16-20 ч.

Составитель Г.Смирнова

Редактор Н.Егорова Техред А.Бабинец Корректор M.Ëåoíòþê

Заказ 10245/16 Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул . Проектная, 4

1 11357

Изобретение относится к микробиологии и может найти применение в производстве бактерийных препаратов.

Известен способ восстановления серологически атипичных штаммов бруцелл в 5 -форму путем выращивания в среде в присутствии смеси ДНК-ДНКазы, подавляющей размножение В-клеток (1) .

Известен также способ восстановления серологически атипичных штам- 10 мов микроорганизмов в 5 -форму пу" тем выращивания микроорганизмов в питательном бульоне методом пассажей (2) .

Однако известный способ длителен, а первый способ по эффективности восстановления не имеет преимуществ по сравнению с методом пассажей и неэкономичен, так как требует использования двух препаратов. 20

Целью изобретения является ускорение способа.

Эта цель достигается тем, что согласно способу восстановления серологически атипичных штаммов мик- 25 роорганизмов в 8 -форму путем выращивания микроорганизмов в питательном бульоне, выращивание микроорганизмов осуществляют в питательном бульоне в присутствии 0,2-0.,4Х дрож-. жевой PHK в течение 16-20 ч.

Способ предназначен для восстановления атиничнык штаммов микроорганиз мов кишечной группы и синегнойной палочки.

П р H м е р 1. Микробные штаммы культивируют на питательной среде, которую готовят следующим образом: в стерильный питательный бульон (рН 7,6-7,7) вводят коммерческую

40 дрожжевую PHK в количестве 0,20,4Х, затем обогащенный бульон стерилизуют дробно текущим паром при

100 С три дня подряд по 10 мин. Сре0 ду разливают в пробирки по 15 мл и 4 под ватными пробками сохраняют при

4-6 С в течение 2-3 мес.

0 !

54 2

Перед использованием пробирку с .питательным бульоном подогревают до 37 С и бактериологической петлей вносят в бульон взвесь атипичной микробной культуры, помещают посевы в термостат при 37 С на 16-18 ч.

В 92Х случаев достаточно однократного выращивания в бульоне с PHK для восстановления атипичных культур в исходное состояние.

Для сальмонелл и шигелл оптимальной концентрацией.PHK является 0,2О,ЗЖ, а для энтеропатогенных колимикроорганизмов и синегнойной палочки — 0,3-0,4Z. !

Пример 2. Для посева используют культуру Salmonella paratyphi В

N - 205 с атипичными свойствами — колонии на плотной среде мутные, шероховатые, с изъединенными краями, проба кипячения положительная, реакция агглютинации со специфическими и неспецифическими сыворотками.

Микроорганизмы высевают в питательный бульон Хоттингера с 0,27 дрожжевой PHK культивируют в течение

20 ч. Проверка культуры на плотной среде показывает, что колонии вырастают гладкие с ровными краями, проба кипячения отрицательная, реакция агглютинации положительная только со специфическими монорецепторными сыворотками. В З встречаются колонии шеpoxоватые.

По известному способу методом пассажей этот эффект получен за 5 дней.

Результаты восстановления стабильны, Использование предлагаемого способа позволяет восстановить атипичные штаммы в течение суток, что имеет большое значение при производстве бактерийных препаратов, экономить питательные среды, снизить себестоимость производства бактерийных препаратов.