Способ диагностики хронических заболеваний печени

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ путем определения фосфолипидов в крови, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повьшения точности способа, определяют концентрацию фосфолипидов в мембранах эритроцитов в расчете на гемоглобин и при значениях 2,38-3,75 ммоль диагностируют хронический персистирующий гепатит, 1,59-1,97 ммоль - хронический активный гепатит, 0,45-1,47 ммоль - цкрро9 печени. (О

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) 4(51) А 61 В 10 00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ HOMHTET СССР

re ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРытИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3555919/28-13 (22) 10.01 83 (46) 28.02.85. Бюл. М 8 (72) А.Н. Дунаева, А.А. Волкова и Е.И. Шабунина (71) Горьковский научно-исследовательский педиатрический институт (53) 616.07(088.8) (56) 1. Гольэанд И.В., Благословенский Г.С. В кн.: "Хронические гепатиты у детей". Л., "Медицина", 1978, с. 180.

2. Маркова М.Н. Липидный обмен .при хронических эаболеваниях печени.

Клинико-экспериментальные исследования. Докт. дис. М., 1978 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ путем определения фосфолипидов в крови, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью ускорения и повьипения точности способа, определяют концентрацию фосфолипидов в мембранах эритроцитов в расчете на гемоглобин и при значениях 2,38-3,75 ммоль диагностируют хронический персистирующий гепатит, 1,59-1,97 ммоль — хронический активный гепатит, 0,45-1 47 ммоль — цирроз печени.

1 1 142

Изобретение относится к области медицины, в частности к гепатологии, и касается способов диагностики заболевания печени.

Известен способ диагностики хронических заболеваний печени путем биохимического исследования различных ферментов крови: фруктозомонофосфатальдолазы, аланинтрансферазы, аспарттрансферазы (11. 10

Однако данный способ является информативным лишь при диффузных обширных поражениях печени, протекающих с умеренной или выраженной активностью процесса. При малоактивном про- 1 цессе или доброкачественном течении заболевания они почти не изменяются или изменяются в малом проценте случаев (у 30-35 больных).

Известен также способ диагности- 20 ки хронических заболеваний печени путем определения фосфолипидов в крови (2l

Однако этот способ пригоден для диагностики хронических заболеваний 25 печени лишь на более поздних стадиях развития патологического процесса в органе, при этом он недостаточно точен, поскольку при ранних формах хронических заболеваний печени содер-30 жание фосфолипидов в сыворотке крови обычно не изменяется, а обнаруживаемые в 20 случаев отклонения являют-! ся следствием нарушения транспорта фосфолипидов в желчь и кровь. Кроме

35 того, данный способ трудоемок.

Целью изобретения является ускорение и повышение точности способа.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу диагностики 40 хронических заболеваний печени путем определения фосфолипидов в крови определяют концентрацию фосфолипидов в мембранах эритроцитов в расчете на гемоглобин и при значениях 2,38- 45

3,75 ммоль диагностируют хронический персистирующий гепатит; 1,59-.

1,97 ммоль — хронический активный гепатит; 0,45-1,47 ммоль — цирроз печени. 50

Способ осуществляют следующим образом.

Кровь для исследования берут утром натощак в количестве 5 мл в пробирку с гепарином. После центрифуги- 55 рования при 4 С отделяют плазму от о эритроцитов. Отмывают эритроциты трехкратно изотоническим фосфатным

105 2 буфером (рН 7,4) в объеме 100 мл и определяют в 50 -ной эритроцитарной суспензии уровень гемоглобина. Липидный экстракт мембран эритроцитов получают последовательным добавлением метанола и хлороформа по 5 мл, фильтруют через 30 мин, добавляют

4 мл 0,06 КС1, выпаривают, разбавляют хлороформом (2 мл), определяют содержание липидного фосфора в микромолях на -1 r гемоглобина.

Приме р 1. Люда Б., 6 лет

11 мес (история болезни 9 1495/80 r.) поступила в клинику института с жало. бами на повышенную утомляемость, сниженный аппетит . As анамнеза установлено, что девочка в возрасте

4 лет.перенесла вирусный гегатит средней тяжести. Через 2 года у нее на фоне физических перегрузок появились боли в правом подреберье, повышенная утомляемость.

При осмотре выявлен астено-вегетативный синдром, расширение венозной сети на коже передней поверхности грудной клетки, увеличение размеров печени по Курлову до 13-9-8 см с выступанием из подреберья по средне ключичной линий до 6 см, увеличение селезенки: длинник 11 см, попе- . речник 9,5 см, из подреберья до 2 см.

При изучении функциональных проб печени изменений ферментативных показателей крови не отмечалось.

При морфологическом исследовании гепатобиоптата выявлена умеренная гисто-лимфоцитарная инфильтрация портальных полей, выраженная белковая дистрофия гепатоцитов с наличием разрушенных наружных оболочек у части из них, небольшого количества гепатоцитов в состоянии некробиоза, активации купферовских клеток не отмечено.

В плазме крови содержание фосфолипидов у больной составляло

1,28 ммоль / л, в эритроцитах количество фосфолипидов составляло

3,78 ммоль/гНв, что указывало на персистирующую форму хронического гепатита.

Пример 2. Саша Б., 10 лет (история болезни Р 308/82 г.) поступил в клйнику с жалобами на снижение аппетита, периодическую головную боль, повышенную утомляемость к вечеру, редкие спонтанные носовые кровотечения.

3 11421

В анамнезе вирусный гепатит в

1977 r., выявленный по контакту, после которого сохранялась гепатомегалия, беспокоили боли в животе после еды и физической нагрузки приступо- образного характера, локализовавшиеся в правом подреберье, в области пупка.

При клиническом осмотре обнаружены явления гиповитаминоза, усиление венозного рисунка на коже в области грудной клетки соответственно проекции печени, гепатомегалия по Курлову 11,5 (+2,5) — 7,5 — 6 см

1 с уплотненным нижним краем,15

При эхолокации ткани печени полу;чены диффузные среднеамплитудные отражения в обеих долях. Изменений гемодинамики печени по данным реографии не отмечалось. В гемограмме выявлен лимфоцитоз в лейкоцитарной формуле до 637, показатели гемокоагуляции определялись нормальными.

Согласно исследования функциональных печеночных проб выявлен гепаторкив1 ный синдром I ст. по гипоальбуминемии 56 г/л в протеинограмме, небольшое снижение уровня восстановленного глютатиона до 994,5 ммоль/л, как проявление нарушений окислительно-восстановительных процессов в печени. Синдромов цитолиза и холестаза не обнаружено. При морфологическом исследовании гепатобиоптата обнаружены легкая инфильтрация

«35 портальный полей, дистрофия гепатоцитов, группы гепатоцитов с разрушенными оболочками, умеренная активация купферовских.клеток, расширение синусоидов. )

У больного определено содержание фосфолипидов в плазме крови, которое составляло 1,44 ммоль/л, а также количество фосфолипидов в мембранах эритроцитов, составившее

3,44 ммоль/г гемоглобина. Заключе ние — персистирующий гепатит.

Пример 3. Витя С., 9 лет (история болезни Р t099/81 r.) поступил в клинику в состоянии средней тяжести с жалобами на повышенную утомляемость, йериодические, необильные носовые кровотечения, снижение аппетита. кого гепатита.

Пример 4. Дима К., 13 лет (история болезни У 2106/80 г.).

Больной в 1973 ã. перенес беэжелтушную форму вирусного гепатита, после

45 которой в течение длительного времени сохранялась гепатомегалия, стойкая Нв антигенемйя, гиперферментемия.

При морфологическом исследовании гепатобиоптата в 1974 r. выявлена

50 дегенерация многих гепатоцитов, выраженная гистолимфоцитарная инфильтрация портальных полей и паренхимы, карушение пограничной мембраны с проникновением инфильтрации внутрь долек, 55 активация купферовских клеток.

Все это позволило диагносцировать хронический активный, серепозитивный гепатит. Лечение заболевания провоВ анамнезе безжелтушная форма вирусного гепатита в возрасте 5 лет, после которого длительно сохраня05 4 лась гепатомегалия, гиперферментемия, антигенемия.

В клинике отмечено проявления астеко-вегетативкого синдрома, гиповитаминоза, увеличение размеров печени по Курлову до 12,5-7,5-6 см с выступакием нижнего края по среднеключичкой линии до 3,5 см, отчетливым уплотнением печени при пальпации. Размеры селезенки были увеличены: дликник составлял 11,5 см, поперечник — 9,5 см, из подреберья край

° выступал на 1,5 см.

При эхографии печени отмечены множественные средне-низкоамплитудные отражения в обеих долях, свидетельствующие об умеренных структурных нарушениях в печени. .Функциональные пробы печени характеризовались увеличением активности фруктозомонофосфатальдолазы до

2,8 ед. (NO-1 ед.); аланинтрансферазы до 1,6 ммоль/л-ч; аспартаттрансферазы до 0,6 ммоль/л ч; томоловой пробы до 16 ед.; гамма-глобуликов до 22,5 г/л, с гипоальбуминемией до

48,6 г/л в протеинограмме. Из крови выделен НЬзАр антиген.

Исследование биоптата выявило значительную гисто -лимфоцитарную инфильтрацию портальных полей, наличие соедикителькотканкых тяжей в паренхиме, активацию купферовских клеток, дистрофические и некротические изменения гепатоцитов.

В плазме крови снижение фосфолнпидов достигало 0,9 ммоль/л, в эритроцитарных мембранах — 2,20ммоль/гНв °

Заключение — активная форма хроничес1142105 6 дилось клюкокортикоидами в течение

2 лет непрерывно. Под влиянием терапии была достигнута стабилизация процесса в печени в 1977 r.

При обследовании больного в 5

1980 r. по катамнезу в пубертатном возрасте на фоне активного образа жизни (с физическими переутомлениями во время занятий спортом) выявлено обострение хронического гепатита. 10

Обнаружены сосудистые звездочки на коже, увеличение печени по Курлову

13-9-8 см с выступанием по сосковой линии до 2,5 см. Выявлены отчетливые структурные нарушения в обеих до- 15 лях печени по данным эхографии. Показатели общих фосфолипидов в плазме крови больного составляли 1, 12 ммоль/л, в мембранах эритроцитов—

1,60 ммоль/гНв.

29

Заключение — хронический активный гепатит.

Пример 5. Наташа Ч., 13 лет, история болезни 951/82 г. В анамнезе безжелтушная форма вирусного гепатита в возрасте 1,5 лет, после которого сохранялись изменения активности ферментов крови, увеличение печени. По данным клинического ос Р мотра обнаружены явления полигиповитаминоза кожи, умеренная пальмарная эритема и гипергидроз ладоней, гепатомегалия по Курлову 11 (+2 см)9-7 см, увеюй чение селезенки до

1,5 см по передне-аксиллярной линии. 35

При исследовании периферической крови выявлено ускорение СОЗ до, 16 мм/ч, эозинофилия до 6% в лейкоцитарной формуле. Показатели геморрагического компЛекса крови, протромбиновый индекс не отклонялись от- нормы. По данным эхолокации печени получены патологические среднеамплитудные отражения в обеих долях. В результате функциональных проб печени имели место цитолитический синдром II

III ст., по активности фруктозомонофосфатальдолазы = 3 ед., аланинтрансферазы 3,4 ммоль на 1 л/ч, аспартаттрансферазы 1,8 ммоль на л/ч, 0 воспалительный синдром II ст. (тимоловая проба 28 ед., увеличение гаммаглобулинов в протеинограмме до

24 г/л), ускорение СОЭ до 16 мм/ч в гемограмме, гепатопривный синдром

I-II ст., проявляющийся гипоальбуминемиай до 53 г/л, снижением восстановленного глютатиона до

806 ммоль/л (норма 1045 г/л). Из крови неоднократно выделен Hbs-антиген.

При исследовании фосфолипидов крови их количество в плазме составило 1,44 ммоль/л, что существенно не отличалось от нормы; количество фосфолипидов в мембраннах эритроцитов было сниженным до 1,7 ммоль на 1 r гемоглобина. Заключение— хронический активный гепатит.

Пример 6. Вика 3., 12 лет (история болезни N - 1056/83 r.) поступила в клинику в тяжелом состоянии с жалобами на слабость, быструю утомляемость, заторможенность, тошноту, анорексию.

Из анемнеза установлено, что девочка в 1980 г перенесла тяжелую форму вирусного гепатита с сохранением в последующем увеличенной печени, значительной ферментации и гипербилирубинемии.

Курсы проводимой глюкокортикоидной терапии были непродолжительными (около 3-4 мес.), давали кратковременный эффект.

В клинике выявлена иктеричность кожных покровов и слизистых, пастозность лица, -голеней, яркая пальмарная эритема, геморрагическая сыпь на нижних конечностях, усиленный венозный рисунок кожи в проекции печени и селезенки, признаки наличия жидкости в брюшной полости.

Верхняя граница печени перкуторно определялась в V межреберье, из подреберья по средне-ключичной линии печень выступала на 4 см, левая доля пальпировалась не отчетливо. Селезенка имела длинник 19 см, поперечник

16 см, выступая из подреберья до

8 см, консистенция ее была очень плотной.

Отмечены выраженные структурные нарушения в обеих долях печени и в селезенке на эхогепато- и эхоспленограмме в виде множественных средневысокоамплитудных отражений.

Рентгенологически в нижней трети пищевода выявлена прерывистость складок слизистой, обусловленная варикозом .,вен. 1

В гемЬграмме при неоднократных исследованиях отмечалась панацитопения (эритроциты 3,2-10 /л, 9

Нв — 110 г/л, лейкоциты 3,0 -10 /л, 9 тромбоциты 25% 80,0.10 /л), свиде9

142105

Составитель И. Емельяненко

Редактор Н.. Швыдкая Техред А.Бабинец Корректор И. Муска

Заказ 590/5 Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

7 1 тельствующая о наличии гиперспленизма. СОЭ крови была ускорена до

22 мм/ч. В биохимических показателях сыворотки крови выявлена активность органоспецифических ферментов: фруктозомонофосфатальдолаза = 1,8 ед., аланинтрансфораза = 3,06 ммоль/л ч, аспартрансфераза = 1,63 ммоль/л ч, высокая тимоловая проба — 33 ед. (N0 — 5 ед.), гамма-глобулины

27,6 г/л (норма 14 г/л), резкая гипербилирубинемия до 104 мкмоль/л, с увеличением связанного билирубина до 56 мкмоль/л, отчетливая гипоальбуминемия до 52 г/л в протеинограмме. Имелись отклонения кислотножелчного баланса крови в сторону алкалоза без почечной компенсации.

Содержание фосфолипидов в плазме крови было снижено до 1,!8 ммоль/л, в мембранах их количество составляло

1,50 ммоль/гНв. Заключение — цирроз печени.

Таким образом, предложение позволяет определить степень мембранных нарушений при различных формах и фазах хронических гепатитов у детей, !

О проводить своевременную и адекватную патогенетическую терапию заболевания, определить сраки диспансерного наблюдения за больными.

Способ высокочувствителен и превосходит ранее известные методы ди агностики хронических заболеваний печени.