Способ постановки реакции микроагглютинации

 

СПОСОБ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ МИКРОАГГЛЮТИНАЦИИ путем соединения на стекле в каплях различных разведений иммунной сыворотки и антигена, отличающийся тем, что, с целью определения титра антител в сыворотке к растворимому антигену и повышения чувствительности реакции, предварительно к каждому разведению исследуемой сыворотки добавляют в соотношении 1:10 (по объему) 17в-ную стабилизированную суспензию стафилококканосителя протеина А, и затем взвесь концентрируют .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ сОцИАлистических

РЕСПУБЛИК

4 @ А 61 В 10/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPGHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3635996/28-13 (22) 16.08.83 (46) 30.03.85. Бюл. № 12 (72) Л. И. Райхер, В. Н. Сперанская, Е. Х. Хазина и 3. Ц. Айнбиндер (71) Пермский ордена Трудового Красного

Знамени научно-исследовательски и институт вакцин и сывороток (53) 615.373(088.8) (56) Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования.

Под ред. М. О. Биргера, 1982, с. 129-132.

„,SU„„1147353 А (54) (57) СПОСОБ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ МИКРОАГГЛЮТИНАЦИИ путем соединения на стекле в каплях различных разведений иммунной сыворотки и антигена, отличающийся тем, что, с целью определения титра антител в сыворотке к растворимому антигену и повышения чувствительности реакции, предварительно к каждому разведению исследуемой сыворотки добавляют в соотношении 1:10 (по объему) 1,-ную стабилизированную суспензию стафилококканосителя протеина А, и затем взвесь концентрируют.

1147353

Составитель В. Дроздов

Техред И. Верес Корректор В. Гирняк

Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и от крытий

113035, Москва, )К вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП <Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор И. Касарда

Заказ 1433/5

Изобретение относится к медицине, а именно к прикладной иммунологии и может быть использовано в экспериментальной иммунологии и микробиологии для количественного определения антител в сыворотках.

Цель изобретения — определение титра антител в сыворотке к растворимому антигену и повышение чувствительности реакции.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу постановки реакции микроагглютинации, предварительно к каждому разведению исследуемой сыворотки добавляют в соотношении 1:10 (по объему) 1 -ную стабилизированную суспензию стафилококканосителя протеина А, и затем взвесь концентрируют.

Изобретение осуществляется следующим образом.

В центрифужных пробирках готовят разведения (1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600 и т,д.) исследуемой кроличьей противодифтерийной сыворотки на физиологическом растворе хлористого натрия, каждое в объеме

5 мл. В каждую пробирку вносят по 0,5 мл

17, -ной стабилизированной суспензии стафилококка-носителя белка А (штамм Кован 1), инкубируют при 20 в течение 1 ч при периодическом встряхивании.

Для концентрирования иммобилизованных антител содержимое пробирок центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин, декантат отбрасывают, осадок ресуснендируют забуференным физиологическим раствором рН 7,2 с 0,1% бычьего сывороточного альбумина в 1/10 первоначального объема разведения сыворотки, т.е. в 0,5 мл.

Реакцию мнкроагглютинации проводят на стекле при 20 . Для этого на стекло помещают к апл и растворимого а нти ген ав коммерческого препарата дифтерийного анатоксина (каждая в объеме 0,02 мл), добавляют по капле 0,02 мл суспензии стафилококка с иммобилизованными на нем антителами (из каждого разведения сыворотки) .

Контроли 1 и II для исключения спонтанной агглютинации: к капле стабилизиро15 ванной 17.-ной суспензии стафилококка добавляют каплю забуференного физиологического раствора; к капле 17,-ной суспензии стафилоккока с иммобилизованными антителами (из разведения сыворотки 1:100) добавляют каплю забуференного физиологического раствора.

Контроль III для исключения неспецифической реакции: к капле 1/-ной суспензии стафилококка с иммобилизованными антителами из разведения сыворотки 1:100 добавляют каплю коммерческого препарата столбнячного анатоксина.

Результаты учитывают визуально или с помощью лупы по появлению агглютината при отрицательной реакции в контроле в течение 3-5 мин.