Способ количественного определения активации лимфоидных клеток
Изобретение позволяет повысить чувствительность определения активации лимфоцитов. Для этого предварительно полученную биопробу помещают в кювету из нелюминесцирукяцего стекла с дном из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемуго при 38 С. Определяют величину свечения , кюветы и кюветы с биопробой. Пробу лимфоцитов помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность свечения. Добавляют раствор тимостимулина или другой индуктор , через 5-10 мин после введения иммуностимулятора определяют хемолюминесценцию и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу-времени. I табл. С 9 ю 00 г ;о
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
„„SU„„123797
15д 4 С О1 Н 33 53 ю,т:.,- "/", pre. ,.1;
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н А BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3274009/28-14 (22) 11, 02. 81 (46) 15.06 ° 86. Бюл. ¹ 22 (71) Киевский научно-исследовательский рентгенорадиологический и онкологический институт (72) Ю.А.Гриневич, В.А.Барабой, И.С.Никольский и Л.А.Титоренко (53) Л616-07(088.8) (56) Общие вопросы патологии. М.:
ВИНИТИ, т, 4, 1976, с. 124-151. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВАЦИИ ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК (57) Изобретение позволяет повысить чувствительность определения активации лимфоцитов. Для этого предварительно полученную биопробу помещают в кювету из нелюминесцирующего стекла с дном из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемую при 38 С. Определяют величину свео чения, кюветы и кюветы с биопробой.
Пробу лимфоцитов помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность свечения. Добавляют раствор тимостимулина или другой индуктор, через 5-10 мин после введения иммуностимулятора определяют хемолюминесценцию и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу -времени. 1 табл.
L Число наблюдений
Иммуностимулят онечная минесценция онцентраия
Лимфоциты человека, Левамизол 0,1 мкг/мл 10
251
Фито гемагглютинин
0,15 мг/мл 9
1,0 мг/мл 10
123 27 27
Тимостимулин (,-клетки, Левамизол
204
0,1 мкг/мл 6
145
1,0 мг/мл б
Тимостимулин
274
Лимфоциты крыTHMOCTH мулин
1,0 мг/мл б
127
BHHHHH Заказ 3283/45 Тираж 778 Подписное
Произв-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул„ Проектная, 4
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и касается способов выявления и объективной регистрации состояния активации лимфоцитов, может быть использовано при диагностике заболеваний, сопровождающихся изменениями иммунологической реактивности организма.
Цель изобретения - повышение чувствительности способа.
Способ осуществляют следующим образом.
1 ..
1 мп. гепарийизйрованной крови
1 е наносят иа f Ьл смеси фиколла и верогрЬфина; (P-1,077) . Пробирки цент, ф1 фуййруют -при 1000 об/мин 30 мин.
Эритроциты оседают на дно пробирки, лим1роциты остаются в интерфаэе, Лимфоциты собирают, дважды отмывают и подсчитывают (из 1 мл крови с нормальным-содержанием лимфоцитов обычно удается получить около 10 клеФормула изобретения
Способ количественного определе ния активации лимфоидных клеток путем добавления к суспензии лимфоцитов иммуностимулятора с последующим учетом полученных результатов, о т37979 2 ток, которые ресуспендируют н 1 мл раствора Хэнкса). Полученную таким образом биопробу помещают в кювету иэ нелюминесцирующего стекла с дном иэ оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом
ФЭУ, термостатируемую при 38 С. о
После эталонных измерений определяют величину свечения кюветы (фон) и кюветы с биопробой, Пробу лимфоцитов в объеме 0,7-1,0 мл (10 мм фоцитов) помещают в кювету и через
2-3 мин регистрируют интенсивность свечения по описанному выше способу.
Затем добавляют 0,7 мл раствора тимостимулина или другого индуктора и через 5-10 мин вновь регистрируют свечение стимулированных лимфоцито в °
Хемилюминесценция иммунокомпетентных клеток через 5 мин после воздействия стимулятора представлена в таблице. личающийс я тем, что, с целью повышения чувствительности спо50 соба, определяют хемолюминесценцию в течение 5-10 мин после введения иммуностимулятора и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов .в единицу времени,
