Способ прогнозирования послеоперационных гнойно- воспалительных осложнений у больных туберкулезом органов дыхания

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования развития гнойно-воспалительных послеоперационных осложнений у больных с хирургическими формами туберкулеза органов дыхания при отсутствии клинических предпосылок возникновения осложнений. Целью предложения является повышение точности и упрощение способа за счет определения до операции в крови больного уровня Т-лимфоцитов и реакции бласттрансформации лимфоцитов с фитогемагглютинином. Определение Т-лимфоцитов: центрифугируют 1 мл гепаринизированной плазмы с лейкоцитами, плазму удаляют, к осадку добавляют 2 мл среды 199-, вновь центрифугируют . Осадок взвепшвают в I мл среды 199, подсчитывают лейкоциты и разводят средой до концентрации 240 в 1 мл 0,2 мл лейкоцитарной взвеси, смешивают с равным объемом 0,4%-ной взвесиэритроцитов барана на среде 199. Инкубируют при 37 С, центрифугируют и помещают в холодильник при 4°С. Затем в пробирку добавляют 0,1 мл 3%-ного раствора глютарового альдегида, добавляют дистиллированную воду, центрифугируют. Из осадка готовят мазок, окрашивают по Май- Грюнвальду. Подсчитывают 200 лимфоцитов , определяют процент розеткообразующих клеток (РОК). Определение реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА): гепаринизированную плазму с лейкоцитами разводят средой 199 до концентрации 210 клеток в 1 мл, 5 мл взвеси помещают в два граненых флакона. В один из них добавляют 0,05 мл фитогемагглютинина. Термостатируют, центрифугируют, готовят мазки, окрашивают по Романовскому- Гимза. Подсчитывают 1000 клеток и определяют процентное содержание бластов. При показателях Е-РОК ниже 35% и РБТЛ с ФГА ниже 40% прогнозируют развитие осложнений. (Л С tv: 00 00

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (" ) ехтлпк

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21)3920891/28-14 (22) 24.06,85 (46) 30.01,87, Бюл. М - 4 (71) Киргизский научно-исследовательский институт туберкулеза и Киргизский государственный медицинский институт (72) К.А. Узакбаев и В.А.Морозов (53) 616.07(088,8) (56) Чернушенко Е.Ф., Когосова Л.С, Иммунологическое исследование в клинике. Киев: Здоровье, 1978, с. 95-100, (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПОСЛЕОПЕРАЦИННЫХ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ

ОСЛОЖНЕНИЙ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ

ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования развития гнойно-воспалительных послеоперационных осложнений у больных с хирургическими формами туберкулеза органов дыхания при отсутствии клинических предпосылок возникновения осложнений. Целью предложения является повышение точности и упрощение способа за счет определения до операции в крови больного уровня Т-лимфоцитов и реакции бласттрансформации лимфоцитов с фитогемагглютинином, Определение Т-лимфоцитов: центрифугируют 1 мл гепаринизированной плазмы с лейкоцитами, „.SU,» 1287008 А1 плазму удаляют, к осадку добавляют

2 мл среды 199-, вновь центрифугируют, Осадок взвешивают в 1 мл среды

199, подсчитывают лейкоциты и разводят средой до концентрации 2 10 в б

1 мл 0,2 мл лейкоцитарной взвеси, смешивают с равным объемом 0,47-ной взвеси зритроцитов барана на среде

199, Инкубируют при 37 С, центрифугируют и помещают в холодильник при

4 С. Затем в пробирку добавляют

0,1 мл ЗЕ-ного раствора глютарового альдегида, добавляют дистиллированную воду, центрифугируют. Из осадка готовят мазок, окрашивают по МайГрюнвальду. Подсчитывают 200 лимфо- ж цитов, определяют процент розеткообреетпощих клеток (РОК). Определение (/) реакции бласттрансформации лимфоци- С тов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА): гепаринизированную плазму с лейкоцитами разводят средой 199 до концентрации 2 10 клеток в 1 мл, 6

5 мл взвеси помещают в два граненых Ю флакона. В один из них добавляют 90

0,05 мл фитогемагглютинина. Термостатируют, центрифугируют, готовят 1 ) мазки, окрашивают по РомановскомуГимза. Подсчитывают 1000 клеток и on- { ф ределяют процентное содержание бластов. При показателях E-РОК ниже

35Х и РБТЛ с ФГА ниже 40Х прогнозируют развитие осложнений.

1287008 2

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования развития гнойно-воспалительных послеоперационных осложнений у больных с хирургическими 5 формами туберкулеза органов дыхания при отсутствии клинических предпосылок возникновения осложнений.

Целью изобретения является повышение точности и упрощение способа 10 за счет определения до операции в крови больного уровня Т-лимфоцитов и реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА) . 15

Способ осуществляется следующим образом.

У больного берут из вены натощак

10-15 мл крови стерильно в пробирку с гепарином иэ расчета 25 ед. на 20 мл, добавляют 10% желатина (0,1 мл на 1 мл крови) ° Хорошо перемешивают о и помещают в термостат при 3! С (на

40 мин для оседания эритроцитов) .

Определение E-РОК (Т-лимфоцитов): мл гепаринизированной плазмы с лейкоцитами помещают в центрифужную пробирку, центрифугируют 10 мин при

1000 об/мин, плазму удаляют, к осадку добавляют 2 мл среды 199, взбал- 30 тывают и вновь центрифугируют при тех же условиях. Недостаточную жид— кость отсасывают. Осадок взвешивают в 1 мл среды 199, подсчитывают лейкоциты и разводят средой до кон- 35

6 центрации 2 10 в 1 мп 0,2 мл лейкоцитарной взвеси, смешивают с равным объемом 0,4%-ной взвеси эритроцитов барана на среде 199. Инкубируют о

5 мин при 37 С, центрифугируют 5 мин 40 при 800 †10 об/мин и помещают на а час в холодильник при 4 С. Затем в пробирку добавляют 0,1 мл 3%-ного раствора глютарового альдегида и ос тавляют при комнатной температуре 45 на 20 мин. Добавляют в пробирку дистиллированную воду (примерно 1 /3 пробирки), взбалтывают и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. Из осадка обычным путем готовят мазок, который окрашивают по Уай-Грюнвальду. Подсчитывают под иммерсией 200 лимфоцитов, определяя процент розеткообразующих клеток (РОК). За РОК принимают лимфоцит, к поверхности которого фиксировалось не менде 3 эритроцитов.

Определение РБТЛ с ФГА проводят следующим образом: гепаринизированную плазму с лейкоцитами разводят е средой 199 до концентрации 2 10 клеток в 1 MJI и концентрации плазмы

20%. 5 мл взвеси помещают в два граненных флакона емкостью 40 мл. В один из них добавляют ФГА (ИХсо) в количестве 0,05 мл (опыт). Оба флакона помещают в термостат при

37 С на 72 ч. после чего содержимое флаконов центрифугируют, готовят мазки, окрашивают их по Романовскому-Гимза, Подсчитывают тысячу клеток и определяют процентное содержание бластов, Из числа бластов в опытной пробе вычитают число бластов в контроле °

Примеры осуществления способа.

Пример 1. Больной В., 45 лет, поступил в клинику с диагнозом: конгломератная туберкулома верхней доли левого легкого в фазе уплотнения.

БК-. В период подготовки к операции проведено иммунологическое обследо— ванне: определено содержание Т-лимфоцитов, уровень РБТЛ с ФГА. У больного выявлено снижение количества

Т-лимфоцитов (20%) и низкий уровень

РБТЛ с ФГА (22,3%). Больному произведена операция. экономная резекция

1 — го и 2 † сегментов левого легкого под эндотрахеальным наркозом. После операции больному проводили лечение по принятой в клинике схеме.

Несмотря на проводимую терапию, на

5 сут после операции произошло ухудшение общего состояния: появился кашель с мокротой, повышение температуры тела до 38,6 С, потливость, о слабость, На обзорной рентгенограмме легких на 6-й день после операции выявлена левосторонняя послеоперационная пневмония.

Возникновению послеоперационного осложнения предшествовало снижение показателей Т-системы иммунитета, имевшее место до операции.

По сравнению с прототипом предлагаемый способ прост в выполнении, так как основан на изучении лишь двух наиболее информационных показателей — числа Т-лимфоцитов и уровня

РБТЛ с ФГА, кроме того, в отличие от прототипа более точен, так как в нем предлагаются четкие границы величин показателей, использование которых позволяет с высокой степенью точности прогнозировать развитие гнойно- воспалительных послеоперационных осложнений. При показателях

1287008

Формула изобре тения

Составитель Л. Артюшина

Редактор Н.Слободяник Техред Л.Олейник Корректор М.Демчик

Заказ 7708/45 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул, Проектная, 4

E-РОК ниже 35 и РБТЛ с ФГА ниже 40 вероятность возникновения осложнений равна 75 . При более высоких показателях осложнения возникают в

7,5 . случаев. Точность способа-прототипа составляет лишь 17-30 .

Способ прогнозирования послеоперационных гнойно-воспалительных ос- fp ложнений у больных туберкулезом органов дыхания путем исследования иммунитета, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, в крови до операции определяют уровень Т-лимфоцитов и число лимфоцитов, вступающих в реакцию бласттрансформации с фитогемаглютинином и при значении первого показателя ниже 35Х и второго менее 40Х прогнозируют развитие осложнений.