Способ получения производных дипептидов

 

Изобретение касается производных пептидов, в частности соедин ен ий общей формулы CgHj - (СНр)2 - CH(COOR,) - NH-chr,- С(О) N - СН(СООН)-(СЙ2)2-СН, где Н Н; Ra CHj; -(GHz)-, -NH , которые способны ингибировать ангиотензинконвертирующий эффект и могут быть использованы в экспериментальной биологии и медицине. Для выявления лучшей активности у соединений указанного класса были синтезированы новые 1 . Их получают из - (CHj)2-C(0)-COORi и (CH2),ij , где RZ СН(СООН)-N-C(0)-chrjNH, СН,; CHj(CH2)-NH-C(0)0-C-(CH,) 3 в присутствии натрийцианбаргидрида: как восстановителя споследующим удалением, при необходимости, защитных групп обработкой соответствующей кислотой. Получены: 1а) К-(1-карбокси-3-фенилпропил)-с.-аланил-5 -пролин S, S, З конфигурации, т.пл. 148 - 15rC,dlp -67°; 1 б) N- - - (S) -этоксикарОонил-З-фенилпропионил)-с(-аланил- А-пролин, т.пл. 144 - 145°C,d.3f -43, 1 в) N-t1-(8)-карбокси-3-фенилпропил-

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН р/

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТУ стью.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ.(21) 2851802/23-04 (22) 10.12.79 (31) 968249 (32) 11.12.78 (33) US (46) 30.01.87. Бюл. ¹ 4 (7 1) Мерк энд Ко., Инк. (US) (72) Артур А.Пэтчетт, Элберт И.Тристрэм, Мэтью Дж, Виврэтт и Эдвард

В.Тристрэм (US) (53) 547.964.4.07(088.8) (56) Ondetti М.А., Rudin В., Cushman D.M., Design of specific inhibitors of angiotensin-converting

enzyme: new class of orally active

antihypertensive agents, Science, v. 196, р.441 (1977). (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

ДИПЕПТИДОВ (57) Изобретение касается производных пептидов, в частности соединений общей формулы СВН вЂ” (СН )

CH(C00R NH-CHR — С(О) Й

СН(СООН)-(С 2) -СН2, где R1 = Н;

С2Н ; К2 = СН, -(СН2) -ИН2, кото— рые способны ингибировать ангиотен„„SU„„1287756 А 3 (5Н 4 С.07 К 5/06, А 61 К.37/02 зинконвертирующий эффект и могут быть использованы в экспериментальной биологии и медицине. Для выявления лучшей активности у соединений указанного класса были синтезированы новые 1. Их получают из С Н (СН2) С(0) СОЮЗ, и СН (СН )„

СН(СООН) †N†- C(0) — CHR NH2,- где Rs — CH» СН (СН 2)з -ИН-С (О) О-С- (CHs)s в присутствии натрийцианборгидрида как восстановйтеля с последующим удалением, при необходимости, защитных групп обработкой соответствующей кйслотой. Получены: 1a) N-(1-карбокси-3-фенилпропил)- -аланил-М-пролин S, S, S конфигурации, т.пл.

148 — 151 С,I. с ) = -67 ; 1 б) N-(1-(Б)-этоксикарбонил-3-фенилпропионил)) -й-аланил-й-пролин, т.пл.

144 — 145 С, (Ц = -43,5 ; 1 в)

N 4 1 (S)-карбокси — 3-фенилпропил ..-лизил-й- пролин, т.пп . = 150ОC (разл); (М) = -23 . 1 а-в показывают лучшую активность в отношении ангиотензинконвертирующего фермента в сочетании с низкой токсично1287756

Пример 2. Получение И-(1†(S)-этоксикарбонил-3-фенилпропионил)-L-аланил-1. — пролина.

1,03 г этилового эфира 2-оксо-4—

-фенилмасляной кислоты и 0,19 г . L-аланил-L-пролина растворяют в 507ном водном этаноле. К полученному раствору по каплям добавляют 0,19 г натрийцианборгидрида в водном этаноле в течение 2 ч. По окончании реакции раствор пропускают через колонку с сильнокислотной ионообменной смолой, элюируя целевой продукт 27ным раствором пиридина в воде. Фракции, содержащие продукт, лиофилизуют. В итоге получают 0,25 r сырого продукта, из которого целевой изомер выделяют с помощью колоночной хроматографии аналогично примеру 1. В итоге получают N-(1 †.(S) †этоксикарбонил-З-фенилпропионил)-L-аланил-L-пролин, с т.пл. 144 — 145ОС; (с1 ), — -43,5 (С 1; АсОН).

Пример 3. Получение N-(1—

-(S)-карбокси-3-фенилпропил)-L-лизил-L-пролина.

2-оксо-4-фенилмасляную кислоту конденсируют с N -трет-бутилоксикарбонил-L-лизил-L†- пролином в присутствии натрийцианборгидрида в условиях примера 1. Продукт конденсации адсорбируют на сильнокислотной ионообменной смоле, а затем элюируют

27.-ным раствором пиридина в воде.

Фракции, содержащие продукт, упаривают, остаток обрабатывают 4 н. раствором НС1 в этилацетате, раствор упа— ривают. Полученный продукт адсорбируют на сильнокислотной ионообменной смоле, а затем элюируют 27-ным раствором пиридина в воде. Фракции, содержащие целевой продукт, лиофилизуют. В итоге получают N-(1-(S)-этоксикарбонил-3-фенилпропионил)-L-аланил-L-пролин в виде белого порошка с т.пл. 150 С (разл.) с содержанием основного вещества по данным HPL С

98,5Х; (< j = -23 (С 1; АсОН) .

Полученные в примерах 1 — 3 соединения в опытах in vivo u in vitro показали высокую ингибиторную активность в отношении ангиотензинконвертирующего фермента в сочетании с низкой токсичностью, Смесь 1,49 r 4-фенил-2-оксомасляной кислоты и О, 31 г L-аланил-L-пролина в воде при рН 7,5 обрабатывают Зр

0,32 r натрийцианборгидрида в течение ночи. Затем реакционную смесь пропускают через колонку с сильнокислотной ионообменной смолой. Целевой продукт элюируют с помощью 2Хного раствора пиридина.в воде. В итоге получают 0,36 г сырого продукта, который дополнительно очищают с помощью колоночной хроматографии на полистирольной смоле ХАД-2 (меш. 4р

200-400), используя в качестве элюента 0,1 М раствор гидроокиси аммония в смеси вода — метанол, 95:5 (объем). Первый изомер выходит из колонки после пропускания 375-400 мл 45 элюента, а второй — с 440-480 мл элюента вместе с промежуточными фракциями, содержащими смесь изомеров.

Фракцию, содержащую первый изомер

1 сушат лиофильно. В итоге получают 50

0,13 r белого твердого вещества,которое!.перекристаллизовывают из

1 мл воды, подкисленной до рН 3,0.

В итоге получают 0,094 r N-(1-кйр-:" бокси-3-фенилпропил)-L-аланил"L55

-пролина, имеющего по данным рентгеноструктурного анализа S S S-конфигурацию, с т. пл. 148 — 151 C

ГА), = -67,0 (С 0,1; НС1).

Изобретение относится к способу получения новых биологически активных соединений, а именно производных дипептидов общей формулы

B100C — CH — NH — СН вЂ” C0N

СН2 Я2 СООН сн,,-, где R< — водород, С Н <, Я обладающих способностью ингибировать ангиотензинконвертирующий фермент, который может найти применение в экспериментальной биологии и медицине, Цель изобретения — способ получения новых производных дипептидов, 20 обладающих более высокой способно-. стью ингибировать ангиотензинконвертирующий фермент. Пример 1. Получение N (1—

-карбокси-3-фенилпропил)-L — àëàíèë- 25

-Ь-пролина.

Формула изобретения

Способ получения производных дипептидов общей формулы

1287756 где R имеет укаэанные значения, конденсируют с дипептидом. общей формулы

H N-CH — C0N 2

R(00C- С вЂ” СН СН -

Составитель О.Галкин

Редактор А.Лежнина Техред И.Попович Корректор С.Шекмар

Заказ 7732/61 Тираж 347 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4

8100C — СН вЂ” NH — CH— - C0N

1 1

СН2 В2 соон

1 сн... где R, — водород, СzH

R — СН, -СН СН СН СН -NH о т л и ч а ю щ и и с.я тем, что соединение общей формулы где R> — СН„ -СН,(СН,),-NH-СООС(СН,) в присутствии натрийцианборгидрида в качестве восстанавливающего агента с последующим удалением в случае необходимости защитных групп при взаимодействии с соответствующим кислотным реагентом.