Способ определения атретических изменений в ооцитах из полостных фолликулов яичников крупного рогатого скота

 

Изобретение относится к области биологии размножения и может использоваться при изучении процесса созревания женских половых клеток, а также при разработке методов культивирования и оплодотворения вне организма ооцитов из полостных фолликулов яичников с целью получения эмбрионов ранних стадий. Целью изобретения является ускорение и упрощение способа при сохранении ооцитов жизнеспособными . После вьщеления ооцита из фолликула отделяют часть окружающего его яйценосного бугорка, обрабатывают ее 0,8%-ным гипотоническим раствором цитрата натрия, затем помещают на предметное стекло, диспергируют, наносят на клетки каплю 1%-ного ацетоорсеина, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Наличие липидных гранул в цитоплазме клеток яйценосного бугорка свидетельствует об атретических изменениях в фолликуле и ооците. с ю ел

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (51) 4 А 6! Р 7/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР п0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1З

К ABTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4116687/30 — 15 (22) 10.09.86 (46) 07.04.88. Бюл. 1Ф 13 (71) Украинский научно-исследовательский институт разведения и искусствен" ного осеменения крупного рогатого скота (72) В.С. Качура и А.В. Стефанович (53) 591.465.12; 616.07(088.8) (56) Gondos Bernard. Ultrastructure, of follicular atresia in the rat.—

Gamete Research, 1982, 5,р. 199-206.

Marion G. В., Gier Н. Т., Choudary S. В. Micromorphology of the bovine ovarian folliculer system.

Journal of Animal Science, 1968, v. 27, р. 451 471. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АТРЕТИЧЕСКИХ

ИЗМЕНЕНИЙ В ООЦИТАХ ИЗ ПОЛОСТНЫХ ФОЛЛИКУЛОВ ЯИЧНИКОВ КРУПНОГО РОГАТОГО

СКОТА (57) Изобретение относится к области

ÄÄSUÄÄ 1386189 А1 биологии размножения и может использоваться при изучении процесса созревания женских половых клеток, а также при разработке методов культивирования и оплодотворения вне организма

OOIJHTOH ИЗ ПОЛОСТНЫХ фОЛЛИКУЛОВ ЯИЧ» ников с целью получения эмбрионов ранних стадий. Целью изобретения явля" ется ускорение и упрощение способа при сохранении ооцитов жизнеспособными. После выделения ооцита из фолликула отделяют часть окружающего его яйценосного бугорка, обрабатывают ее

0,87-ным гипотоническим раствором цитрата натрия, затем помещают на предметное стекло, диспергируют, наносят на клетки каплю 1Х-ного ацетоорсеина, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Наличие липидных гранул в цитоплазме клеток яйценосного бугорка свидетельствует

Об атретических изменениях в фолликуле и ооците.

1386189 дит к набуханию клеток и ослаблению межклеточных контактов, что позволяет диспергировать клетки на предметном стекле. В клетках наблюдают наличие или отсутствие в их цикоплазме липидных гранул, которые являются существенным признаком атретических изменений в фолликулах.

Предлагаемый способ позволяет оценивать наличие или отсутствие атретических изменений по этому признаку и, таким образом, судить о функциональном состоянии ооцита, а также проводить отбор по этому признаку ооцитов для культивирования и оплодотворения вне организма.

Формула изобретения

Составитель А. филиппова

Техред Л.Сердюкова Корректор А. Зимокосов

Редактор Г. Гербер

Заказ 1442/7

Тираж 655

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприя кие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к биологии размножения и может использоваться при изучении оогенеза, а также при разработке методов культивирования и оплодотворения in vitro ооцитов иэ полостных фолликулов яичника с

1 целью получения эмбрионов ранних стадий.

Целью изобретения является уско- 1О рение и упрощение способа при сохранении ооцитов жизнеспособными.

Пример: Проводились опыты по определению атретических изменений в ооцитах из полостных фолликулов яичников коров чернопестрой породы.

Ооциты, окруженные клетками яйцекосного бугорка, выделяют из полостных фолликулов яичника путем разрезания их стенок. Затем под микро скопом от каждого ооцита при помощи двух заточенных препаровальных игл отделяют фрагмент яйценосного бугорка, помещают его на 3 мин в 0,87.-ный

25 гипотонический раствор цитрата натрия, затем переносят с минимальным количеством этого раствора на предметное стекло и диспергируют препаровальной иглой. Затем на клетки наносят каплю 1Х ацетоорсеина, накрывают покровным стеклом и через 1 мин исследуют под микроскопом при увеличении 20х10 и 40х10. Кратковременная обработка фрагмента яйценосного бу- 35 горка гипотоническим раствором привоСпособ определения атретических изменений в ооцитах из полостных фолликулов яичникав крупного рогатого скота, включающий приготовление микропрепарата и его анализ, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа при сохранении ооцитов жизнеспособными, приготовление микропрепарата осуществляют путем отделения части окружающего ооцит яйценосного бугорка, обработки этой части гипотоническим раствором цитрата натрия и окраски ацетоорсеином, а анализ осуществляют по наличию или отсутствию липидных гранул в цитоплазме клеток.