Способ получения галоидводородных солей адриамицина

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (50 4 С 07 Н 15/252

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPbITI44 (21) 4020680/23-04 (86) РСТ/HU 84/00037 (14.06.84) (22) 12.02.86 (46) 30.09.88. Бюл. Ф 36 (71) Биогал Дьедьсердьяр (HU) (72) Янош Балинт, Саболч Борбели, Жужанна Эмри, Йожеф Фазекаш и Дьердь Тот (HU) (53) 547.455.07 (088.8) (56) Патент ФРГ Ф 1917874; кл. С 07 Н 15/24, опублик. 1969.

Европейский патент Ф 039060, кл. С 07 Н 15/24, опублик. 1981. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАЛОИЦВОДОРОДНЫХ СОЛЕЙ АДРИАМИЦИНА (57) Изобретение относится к получению галоидводородных солей адриамици„SU „„1428207 на (АМ), которые используются для ле-. чения опухолевых заболеваний. Цель изобретения — увеличение выхода АИ.

Получение его ведут обработкой гидрохлорида дауномицина бромом при 6-10 С в течение 4,5-6 ч в среде безводного органического растворителя в присутствии эфира органической кислотьР В качестве эфира, способствующего образованию кеталя, используют триэтилортоформиат, метилформиат, зтилацетат, триэтилортоацетат. Образующееся

14-бромпроизводное подвергают взаимодействию с HBr в присутствии формиата щелочного металла (формиата натрия) с последующей экстракцией реакционной смеси в 2 стадии хлороформом при рН

7,2-8,0.

1428207

Изобретение относится к способу получения галоидводородных солей адриамицина, используемых для лечения опухолевых заболеваний.

Цель изобретения — увеличение выхода целевого продукта за счет проведения бромирования гидрохлорида дауномицина бромом в присутствии эфира органической кислоты, способст- 10 вующего образованию кеталя, выбранного из группы триэтилортоформиат, метилформиат, этилацетат, триэтилортоацетат, при 6-10 С в течение 4,5-6 ч и осуществления взаимодействия образующегося 14-бромпроизводного с бромистым водородом в присутствии формиата щелочного. металла, например формиата натрия, с последующей экстракцией реакционной смеси в две стадии 2р хлороформом при рН 7,2-8,0.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. 1,4 г. (2,48 ммоль) хлористоводородного дауномицина раст- 25 воряют в смеси 20 мл безводного метилового спирта, 56 мл безводного диоксана и 1,4 мл (8,47 ммоль) безводного триэтилортоформиата. К полученному раствору добавляют 0,5 r (3,16 ммоль) 3р брома, растворенного в 5,4 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают при 8 С в течение 5 ч.

Затем реакционную смесь выливают в смесь 280 мл диэтилового эфира и

120 мл петролейного эфира, выпадающии

- 35 в осадок продукт отфильтровывают и для очистки от примесей трижды промывают диэтиловым эфиром порциями по

30 мл.

Полученное 14-бромпроизводное имеет следующие характеристики: величина

2 =0,30 (на кизельгуре 60 при использовании смеси СН Cl рМеОНйНСООНйН О=

=88: 15:2: 1); в этих условиях 3) ад" риамицина = 0,10; R дауномицина 45

= 0,22; R1 14-бромдауномицина 0,26;

R агликонов = 0,84.

Kz =172,6 (с=0,1; МеОН).

Приготовленный из 14-бромпроизводного 14-бромдауномицин имеет оптическую активность ((=198,2 (с=0,1;

Ne0H) .

Затем полученное 14-бромпроизводное растворяют в смеси 40 мл ацетона и 40 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и выдерживают раствор при 25оС в течение 17 ч, после чего добавляют к нему раствор 2,0 г (29,4 ммоль) формиата натрия в 20 мл деионизированной воды и перемешивают в течение 48 ч при 25 С. рН реакционной смеси устанавливают равным 3,7, добавляя к ней 1 н. раствор соляной кислоты, и пять раз проводят из нее экстракцию хлороформом порциями по 50 мл. Затем рН водной фазы устанавливают равным 7, 6, добавляя к ней 5 .-ный раствор бикарбоната натрия, и экстрагируют из смеси основание адриамицина, Экстракцию проводят до тех пор, пока происходит окрашивание хлороформного экстракта. Хлороформные экстракты промывают 5 деионизированной воды в расчете на объем экстрактов и высушивают над безводным сульфатом натрия. После отфильтровывания осушителя раствор концентрируют до объема 50 мл. Свободное основание переводят в хлористоводородную соль путем обработки расчетным количеством безводного метанольного раствора хлористого водорода. Образующуюся соль осаждают 500 мл диэтилового эфира. Осадок продукта отфильтровывают, промывают четыре раза диэтиловым эфиром порциями по 30 мп и высушивают в вакууме при комнатной температуре. Выход 0,61 г (42,4 ) хлористоводородной соли адриамицина.

Аналитические данные полученного продукта:

Вычислено, %: С 55,9; Н 5,21, >

N2,,42, Сl 6 11

Се7Нз1ЯОллНС1 (мол. в. 580,0)

Найдено,. : С 55,52, Н 5,10;

N 2,04) Cl 6в24

Т.пл. 202-206 С (с разложением); тонкослойная хроматография: адсорбент — силикагель 60 (Merck

5724), пропитанный 1 .-ным раствором щавелевой кислоты; элюент — верхний слой смеси н-бутанола, уксусной кислоты и воды в соотношении 4:1:5; проявление:. 10 см, В =0,33.

Инфракрасный спектр: (прибор фирмы

Perkin-Е1тпег, тип 397, KBr)

-), см " Идентификация

3420 О-Н-линия (водородная связь)

2980-2920 NH - и С-Н-связь (водородная связь)

1725 С=О кетон

1615 и 1580 C=O (внутриводородная связь, хинон) 1428207

1280 С-0-С (эфир)

1115 С-О третичный спирт

1070 С-0 вторичный спирт

1010 С-О первичный спирт

ЯМР: (импульсный прибор VP 200

SYET фирмы Bruker Н-ЯИР, ДМСО-б, комнатная температура, дельта м.д., 250 мГц)

Дельта (м.д.) Идентификация

1,17 ЗН, д, СН -5

1,6/1,9 2Н, м, СН -2

2,15 2Н, м, СН -9

2,9/3,00 2Н, .АВ, СН -7

3,7 1Н, м, Н-4

4,0 ЗН, с, ОСН

4,2 1Н, м, Н5

4,58/4,61 2Н, АВ, СН -14

4,9 1Н, м, H-10

5 3 IH м, Н-1

7,65 1Н, м, Н3

7,9 5Н м, Н-4, Н-4

Н-2 NH

13,25 1Н, бс, ОН-6

14, 05 1Н, с, ОН-11, С-ЯМР (50,3 мГц 0 0, 310 K)

Дельта (м.д.) Углерод

217,1 13

188, 1 (12),. (5)

10 163,0 1

158,2 11

156, б 6

139,2 3

13,4 (1Оа), 04а), (ба)

15 12290 (4) Ф (2)

121.3 (12а)

113,1 (5а), (11а)

101,5 1

78,5 8

20 71,1 10

69,8 (4 )

68,9 (5 )"

67,1 14

59,1 ОСН

25 49,6 3

37,9 9

34,8 7

30,4 2

18,5 5

30 Изменяемые значения, Пример 2. 1,4 г (2,48 ммоль) хлористоводородной соли дауномицина растворяют в смеси 40 мл безводного метилового спирта и 0,55 мл (8,7 ммоль) безводного метилформиата. К полученному раствору добавляют 0,5 г (3,16 ммоль) брома, растворенного в 5,4 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают в течение

4,5 ч при 10 С.

Затем реакционную смесь выливают в смесь 280 мл диэтилового эфира и

120 мл петролейного эфира, выпадающий в осадок продукт отфильтровывают и трижды отмывают от примесей диэтиловым эфиром порциями по 30 мл. Полу10 ченный продукт растворяют в смеси

40 мл ацетона и 40 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и вы» держивают полученный раствор при 25 С в течение 17 ч. Затем к нему добавляют раствор 2 0 г (29,4 ммоль) формиата натрия в 20 мл деионизированной воды и перемешивают в течение 48 ч при 25 С.

Далее полученную реакционную смесь обрабатывают как в примере 1.

Выход: 0,55 r (38,6X). Полученный продукт имеет те же характеристики, что и продукт, полученный по примеру 1.

26 Пример 3. 0,70 г (1 24 ммоль) хлористоводородной соли дауномицина растворяют в смеси 10 мл безводного метилового спирта, 30 мл безводного диоксана и 0,42 мл (4,30 ммоль) этилацетата. К полученному раствору добавляют 0,25 r (1,58 ммоль) брома, растворенного в 2,7 мп безводного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают в течение 6 ч при 6 С, I

Затем реакционную смесь выливают в смесь 140 мл диэтипового эфира и 60 мл петролейного эфира, выпадающий в осадок -продукт отфильтровывают и очищают от примесей, трижды промывая диэтиловым эфиром порциями по

15 мл. Полученный продукт растворяют в смеси 20 мл ацетона и 20 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и выдерживают раствор при 25 С в те45 чение 17 ч. После этого к нему добавляют раствор 1,0 г (14,7 ммоль) . формиата натрия, растворенного в 10 мл деионизированной воды, и перемешивают реакционную смесь в течение 48 ч при 25 С.

5Ь рН реакционной смеси устанавливают равным 3,7, добавляя к ней 1 н. раствор соляной кислоты, и пять раз проводят из нее экстракцию хлорофор55 мом. Затем рН водного слоя устанавливают равным 7,6 путем добавления к нему 5Х-ного раствора бикарбоната натрия и выделяют адриамицин в виде основания путем экстракции. Экстрак

1428207 цию продолжают до тех пор, пока хло: роформный экСтракт не перестанет окрашиваться. Хлороформные экстракты промывают 5% деионизированной воды в расчете на объем экстрактов, высушивают над безводным сульфатом натрия и после отфильтронывания осушителя концентрируют в вакууме до объема ,25 мл. Свободное основание переводят в хлористоводородную соль путем об" работки его расчетным количеством

0,6 н. безводного метанольного раствора хлористого водорода, после чего образующуюся соль осаждают 250 мл диэтилоного фира. Выпадающий в осадок продукт отфильтровывают, четыре раза промывают диэтиловым эфиром порциями по 15 мл и высушивают в вакууме при комнатной температуре. 20

Выход: О, 29 r (40, 3%) . Полученный продукт имеет те же характеристики, что и продукт, полученный по примеру 1.

Пример 4. 0,70 r (1 24 ммоль) 2ч хлористоводородной соли дауномицина растворяют в смеси 10 мл безводного метилового спирта, 30 мл диоксана и

0,8 мл (4,35 ммоль) триэтилортоаце" тата. К полученной смеси добавляют 30

0,25 r (1,58 ммоль) брома, растворенного в 2,7 мл безводного хлороформа, колбу закрывают и выдерживают при

6 С в течение 6 ч, о

Затем реакционную смесь выливают в смесь 140 мл диэтилового эфира и

60 мл петролейного эфира, выпадающий в осадок продукт отфильтровывают и удаляют примеси, трижды промывая его диэтиловым эфиром порциями по 15 мл.

Полученный продукт растворяют в смеси

20 мл ацетона и 20 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и выдерживают раствор при 25 С в течение 17 ч. Затем к нему добавляют раствор 1,0 г (14,7 ммоль) формиата натрия в 10 мл деионизированной воды и перемешивают при 25 G в течение

48 ч.

Дальнейшую обработку полученной 50 реакционной смеси проводят, как в примере 3.

Выход: 0,30 г (41,7%). Полученный продукт имеет такие же характеристики, KRK и продукт, полученный по примеру 1.

Пример 5. Растворяют 1,13 r (2,0 ммоль) солянокислого дауномицина н смеси 16 мл безводного метилового спирта, 45 мл безводного диоксана и 1,1 мл (7,0 ммоль) безводного триэтилортоформиата. К полученному раст" вору прибавляют 0,3516 r (2,2 ммоль) брома, растворенного в 50 мл безврдного хлороформа, колбу закрывают и реакционную смесь перемешивают 4,5 ч при 7-9 С.

Реакционную смесь выливают н смесь

220 мл диэтилового эфира и 100 мл петролейного эфира, отфильтронывают выпавший н осадок продукт, промывают трижды 25 мл диэтилового эфира для удаления примесей. Затем его растворяют в смеси 32 мл ацетона и 32 мл

0 25 н. водного бромистого водорода о и выдерживают при 28 С в течение

16 ч, После этого прибавляют раствор

1,3 г формиата натрия в 13 мл деионизированной воды к раствору и перемешивают 48 ч при 26-28 С.

После разбавления 115 мл воды устанавливают рН реакционной смеси, равным 3,7 с помощью добавления 1 н. раствора .соляной кислоты и экстрагируют несколькими порциями хлороформа.

Затем устанавливают рН водной фазы равным 8,0 путем добавления 5%-ного раствора бикарбоната натрия и проводят экстракцию до тех пор, пока хлороформный экстракт не будет окрашен.

Хлороформные экстракты промывают 5% деионизированной водой, считая на объем экстрактов, и сушат над безводным сульфатом натрия. После фильтрования высушивающего агента раствор концентрируют до объема 20 мл. Свободное основание переводят в его соляно-кислую .соль путем обработки рассчитанным количеством 0,5 н. раствора безводной соляной кислоты в этаноле. Выпавший в осадок продукт отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром и сушат. Выход: 0,48 г (4i, 9X) .

Аналитические данные продукта идентичны приведенным в примере 1, Пример 6. Растворяют 0,7 r (1,24 ммоль) соляно-кислого дауномицина в смеси 10 мл безводного метило" ного спирта, 30 мл безводного диок" сана и 0,7 мл (4,23 ммоль) безводногс триэтилформиата. К полученному раствору прибавляют 0,25 r (1,58 ммоль) брома, растворенного в 2,7 мл безводного хлороформа, колбу закрывают о и выдерживают 6 ч при 7 С,.

Реакционную смесь выливают в смесь

140 мл диэтилового эфира и 60 мл

7 142820 петролейного эфира, выпавший в осадок продукт отфильтровывают, промывают трижды 15 мл диэтилового эфира для удаления примесей, Затем растворяют Ф о р м у л а и з о б, р е т е н и я его в смеси 20 мл ацетона и 20 "мл

0,24 н. водного бромистого водорода и выдерживают 20 ч при 25оС. Составитель Г. Коннова

Редактор А.Лежнина Техред А. Кравчук

Корректор Н,Король

Заказ 4870/59 Тираж 348 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4.

Устанавливают рН реакционной смеси равным 3.7 путем добавления 1 н. раствора соляной кислоты и экстрагируют несколькими порциями хлороформа.

Затем устанавливают рН водной фазы равным 7,2 путем добавления 5Е-ного раствора бикарбоната натрия и осуществляют экстракцию до тех пор, пока хлороформный экстракт не будет окрашен. Хлороформные экстракты промывают водой и сушат над безводным сульфатом

Ф натрия. После фильтрации осушивающего агента раствор концентрируют до объема 20-25 мл. Свободное основание превращают в его соляно-кислую соль путем обработки рассчитанным количеством 0 5 н. раствора безводной соляной кислоты в этаноле. Отфильтровывают выпавший в осадок продукт, промывают диэтиловым эфиром и сушат. Выход

0,28 r (39,5X).

Способ получения галоидводородных солей адриамицина путем обработки гидрохлорида дауномицина бромом в среде безводного органического растворителя в присутствии эфира органической кислоты, способствующего образованию кеталя, гидролиза образующегося 14-бромпроизводного и выделения целевого продукта известными приемами, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода. целевого продукта, обработку бромом проводят при 6-10 С в течение 4,56 ч, в качестве эфира органической кислоты, способствующего образованию кеталя, используют триэтилортоформиат, метилформиат, этилацетат, триэтилортоацетат, образующееся 14-бром2Б производное подвергают взаимодействию с бромистым водородом-в присутствии формиата щелочного металла, например формиата натрия, q последующей экстракцией реакционной смеси в 2 стадии

30 хлороформом при рН 7,2-8,0