Способ получения стероидных суспензий,содержащих поверхностно-активные вещества

 

Изобретение относится к способам получени.ч суспензий стероидов или их смесей для микробиологической трансформации . Цель - повышение качества целевого продукта за счет увеличения содержания в нем субстрата, а также улучшение его доступности для микроорганизмов при биотрансформации. Стероид (ситостерол, кампестерол холестерол) или смесь стероидов (ситостерол-ькампестерол; ситостерол+ +холестерол) растворяют в органическом растворителе, добавляют неионогенное ПАВ, полученный раствор после фильтрации впрыс кивают при 60-140°С в газовую фазу. Порошковый продукт суспендируют, например, в фосфатном буфере серензена. Целевой про дукт содержит субстрата до 60% с (0 (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (58 4 А 61 К 31 56

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К A BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (89) DD/240895/21.06.82 (21) 7773157/28-14 (22) 31.10.83 (46) 15.03.89. Бюл. № 10 (71) Народное предприятие «Ренафарм» (DD) (72) Петер Атрат., Клере Герхольд, Петер Хезель, Герд Мюллер, Ютта Калейс, Клаус Отто и Хелмут Гро (DD) (53) 612.015(088.8) 1

Изобретение относится к способу получения суспензий стероидов или их смесей для микробиологической трансформации и предназначено для получения стероидных фармацевтических средств или промежуточных продуктов, пригодных для частичного синтеза стероидных фармацевтических средств (например, контрацептивов, глюкокортикоидов) .

Получение стабильных, хорошо ферментируемых суспензий стероидов или смесей стероидов для микр биологических превращений, из-за сильк ., гидрофобного характера веществ этого класса связано со значительными практическими трудностями. Основные требования, предъявляемые к такого рода системам, следующие: размеры зерен, максимум которых должен быть меньше

5 мкм, стабильность при хранении и хорошая дисперсность в ферментационной среде. Было сделано немало попыток, ÄÄSUÄÄ 1465051 А 1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТЕРОИДНЫХ СУСПЕНЗИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ПОВЕРХНОСТН0-АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА (57) Изобретение относится к способам получения суспензий стероидов или их смесей для микробиологической трансформации. Цель — повышение качества целевого продукта за счет увеличения содержания в нем субстрата, а также улучшение его доступности для микроорганизмов при биотрансформации. Стероид (ситостерол, кампестерол, холестерол) или смесь стероидов (ситостерол+ кампестерол; ситостерол+

+ холестерол) растворяют в органическом растворителе, добавляют неионогенное ПАВ, полученный раствор после фильтрации впрыс кивают при 60 — 140 С в газовую фазу. Порошковый продукт суспендируют, например, в фосфатном буфере серензена. Целевой про дукт содержит субстрата до 60 /О

2 чтобы путем внесения стероида из растворителей, мокрого помола или микронизации субстрата, а также добавления неионогенных детергентов в ферментационную среду добиться таких высоких концентраций стероидов в этой среде, которые желательно получить по экономическим соображениям.

В химической технологии применяют метод распылительной сушки для получения порошков или продуктов распылительного гранулирования с высокой растворяющей способностью. В этой связи было предложено описание к патенту DD 202 994 опублик. 12.10.83 кл. В 01 J 2/02) использовать в распыляемых средах алкилфенилполигликолевый эфир, полиэтиленгликоли или сложный жирнокислотный полигликолевый эфир в качестве поверхностно-активных веществ. Такое техническое решение было предложено с задачей направленно повлиять на свойства распыляемой среды

1465051

55 в отношении растворяющей способности при распылении, поскольку исходя из того, что условия растворимости оказывают непосредственное влияние на размеры и дисперсность капель при распылении, а следовательно, на размеры зерен в получаемом продукте распылительного гранулирования и на скорость растворения этого продукта гранулирования при дальнейшей переработке.

Техническое решение согласно описанию к патенту DD 202 994 находится вне пределов технической микробиологии.

Целью изобретения является повышение качества целевого продукта за счет увеличения содержания в нем субстрата, а также улучшения его доступности для микроорганизмов при биотрансформации.

Способ осуществляют следующим образом.

В ос»ову изобретения положена задача представить технологически удобный способ, который позволял бы через промежуточный шаг получения смесей стероида и поверхностно-активного вещества получить такие суспензии, которые позволили бы осуществлять эффективную микробиологическую трансформацию стероидов или смесей стероидов.

Согласно изобретению стероид или смесь стероидов, предпочтительно стерол (ситостерол, кампестерол или холестерол) или смесь стеролов (смесь ситостерола и кампестерола или смесь ситостерола и холестерола), сначала в концентрациях 0,133 вЂ,25 кг/г, предпочтительно 0,15 кг/л, растворяют в органическом растворителе. В качестве органического растворителя используют спирт, предпочтительно метанол или этанол, или кетон, предпочтительно ацетон, или углеводород, предпочтительно алифатический углеводород до С8 или галоидированный углеводород, предпочтительно метиленхлорид или хлороформ.

На следующей стадии к раствору прибавляют неионогенное поверхностно-активное вещество в концентрациях 2 — 10Я относительно используемого стероида или смеси стероидов. В качестве поверхностноактивных веществ используют сложный эфир жирной кислоты сорбитана или сложный эфир жирной кислоты полиэтиленгликолевого сорбитана, моноолеат или монопальмитат полиоксиэтиленсорбитана.

Полученный раствор стероида и поверхностно-активного вещества или раствор смеси стероидов и поверхностно-активного вещества при необходимости после его фильтрации впрыскивают или распыляют в распылительных сушилках при 60 — 140 С, предпочтительно при 120 С, в газовую фазу, т.е. в горячем потоке из воздуха или газа, или из пара растворителя и воздуха, или пара растворителя и газа. Распыление стероидных субстратов может осущест5

45 вляться в этом случае технологически удобно и с высокой эффективностью.

Полученный порошковый продукт суспендируют в водных средах, например в минеральных питательных средах, в комплексных питательных средах или в водных буферных системах (фосфатный буфер серензена).

По предлагаемому способу могут быть получены стабильные водные стероидные суспензии с содержанием субстрата до 60Я, а ферментационные культуры для целей микробиологических трансформаций стероидов, содержащие такие стероидные суспензии, обладают более высокой биодоступностью стероида.

Полученные согласно предлагаемому способу стероидные суспензии в значительной степени свободны от остатков органического растворителя, так что опасности для ферментационной культуры не возникает, а также обладают хорошей стабильностью при хранении и хорошей стерилизуемостью.

Пример 1. 600 г сырого ситостерола, полученного из очистки соснового масла, при добавлении 60 г моноолеата полиоксиэтиленсорбитана растворяют в 4 л хлороформа. Отф .льтрованный раствор распыляют в горячем потоке воздуха при 120 С, например, в лабораторной распылительной сушилке. Полученный тонко диспергированный продукт суспендируют в 1 л водной питательной среды и его можно использовать после стерилизации для ферментации.

Пример 2. 2 кг смеси ситостерола и кампестерола растворяют в 8 л метиленхлорида. К раствору прибавляют 50 г моноолеата полиоксиэтиленсорбитана. Раствор распыляют в горячем потоке азота в распылительной сушилке. Полученный порошковый продукт суспендируют в буферном растворе и его можно использовать после стерилизации для ферментации.

Пример 8. 4 кг ситостерола растворяют в 30 л мителенхлорида. К раствору прибавляют 400 г монопальмитата полиоксиэтиленсообитана и распыляют раствор в горячем потоке из метиленхлорида и воздуха, который в замкнутом цикле направляется через конденсатор метиленхлорида.

Полученный продукт суспендируют в питательной среде и его можно использовать после стерилизации для ферментации.

Формула изобретения

1. Способ получения стероидных суспензий, содержащих поверхностно-активные вещества, путем распылительной сушки растворов стероидов в органических растворителях с последующим внесением полученного порошкового продукта в водную среду, отличающийся тем, что, с целью повышения качества целевого продукта за счет увеличения содержания в нем субстрата, а также

1465051

Составитель

Редактор А. Лежнина Техред И. Верес Корректор В. Романенко

Заказ 838/8 Тираж 644 Подп исное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

1!3035, Москва, Ж,— 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат «Патент>, г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 улучшения доступности его для микроорганизмов при биотрансформации, применяют раствор стероида в концентрации

0,133 — 0,25 кг/л растворителя, к нему добавляют неионогенное поверхностно-активное вещество в концентрации 2 — 10Я относительно количества стероида, а сушку полученной смеси проводят при 120 С, при этом в качестве стероидов используют ситостерни или смесь его с кампестерином и стигмастерином.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют метиленхлорид или хлороформ.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве поверхностно-активного вещества используют моноолеат или- монопальмитат полиоксиметиленсорбитана.