Способ получения вещества, обладающего гепатопротекторной активностью

 

Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности и касается способов получения биологически активных веществ из животного сырья. Цель изобретения - повышение специфической активности. Цель достигается за счет проведения экстракции в уксусной кислоте при pH 3,0 - 4,0 в течение 12 - 24 ч при 1 - 5°С с добавлением 1,0 - 1,5 г/л хлористого цинка, осаждения целевого продукта ацетоном в соотношении 6 : 1 - 10 : 1 при 10 - 15°С и проведения очистки уксусной кислотой при pH 3,5 - 4,0. Изобретение позволяет получить вещество, обладающее высокой гепатопротекторной активностью.

Изобретение относится к медицинской промышленности и медицине и касается выделения биологически активных веществ из печени убойных животных. Цель изобретения - повышение специфической активности целевого продукта. Цель достигается за счет проведения экстракции в уксусной кислоте при рН 3,0-4,0 в течение 12-24 ч при 1-5^оС с добавлением 1,0-1,5 г/л хлористого цинка, осаждения целевого продукта ацетоном в соотношении 6:1 - 10:1 при 10-15^оС и проведения очистки уксусной кислоты при рН 3,5-4,0. Способ осуществляют следующим образом. Полипептиды экстрагируют из гомогената печени убойных животных уксусной кислотой при рН 3,5 в течение 12, -24 ч при 1-5^оС с добавлением 1 г/л хлористого цинка. Осаждение полипептидов проводят ацетоном в количестве 6 объемом на 1 объем экстракта при минус 10 - минус 15^оС в течение 18-20 ч, осадок отделяют фильтрованием, сушат, после чего вновь растворяют в растворе уксусной кислоты при рН 4,0, фильтруют, фильтрат лиофилизируют. П р и м е р 1. Берут 5 кг замороженной печени крупного рогатого скота, измельчают на волчке. Сырье заливают уксусной кислотой до рН 3,0, добавляют хлористый цинк из расчета 1 г на 1 л экстракта и включают реактор. Проводят экстракцию при постоянном помешивании при 1^оС в течение 12 ч. По окончании экстракции субстрат сливают и центрифугируют 20 мин со скоростью 3000 об/мин. Недостаточную жидкость сливают, к ней добавляют 6 ч. ацетона на 1 ч. субстрата, перемешивают и формируют осадок в течение 18 ч при -15^оС, после чего перемешивают и фильтруют. Полученный осадок высушивают, измельчают и растворяют в уксусной кислоте при рН 3,5 из расчета 100 г осадка на 5 л кислоты. Удаляют балластные белки фильтрованием, фильтрат лиофилизируют. Выход активного вещества составляет 28 г на 1 кг исходного сырья. П р и м е р 2. 5 кг замороженной печени крупного рогатого скота измельчают на волчке. Сырье заливают уксусной кислотой до рН 4,0 и добавляют хлористый цинк из расчета 1,5 г на 1 л экстракта, включают реактор. Проводят экстракцию при постоянном помешивании при 5^оС в течение 24 ч. По окончании экстракции субстрат сливают и центрифугируют 20 мин со скоростью 3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, к ней добавляют 10 ч. ацетона на 1 ч. субстрата, перемешивают и формируют осадок в течение 24 ч при -10^оС, после чего перемешивают и фильтруют. Полученный осадок высушивают, измельчают и растворяют в уксусной кислоте при рН 4,0 из расчета 100 г осадка на 5 л кислоты. Удаляют балластные белки фильтрованием, фильтрат лиофилизируют. Выход активного вещества составляет 28 г на 1 кг исходного сырья. Высокая гепатопротекторная активность вещества, полученного предлагаемым способом, приведена в таблицах. Влияние веществ, выделенных из печени, на содержание билирубина сыворотке крови крыс ( ± m) приведено в табл.1. Влияние веществ, выделенных из печени, на показатели коагулограммы крыс ( ± m) приведено в табл.2. Влияние веществ, выделенных из печени, на активность ферментов сыворотки крови крыс (Х ± m) приведено в табл.3. Влияние веществ, выделенных из печени, на количество соединительной ткани в печени при хроническом гепатите у крыс, ± m приведено в табл.4.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, путем измельчения животного сырья, экстракции, отделения центрифугированием, фильтрования, очистки и лиофилизации, отличающийся тем, что, с целью повышения специфической активности целевого продукта, экстракцию проводят в уксусной кислоте при рН 3,0 - 4,0 в течение 12 - 24 ч при 1 - 5^oС с добавлением 1,0 - 1,5 г/л хлористого цинка, после центрифугирования осаждают целевой продукт ацетоном в соотношении 6 : 1 - 10 : 1 при 10 - 15^oС, а очистку проводят уксусной кислотой при рН 3,5 - 4,0.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2