Способ получения n-нитрозо-n-(бета-хлорэтил) карбамоилпептидов или их солей

 

Изобретение относится к дипептидам, в частности к получению производных N-нитрозо-N-(бэта-хлорэтил) карбамоилпептидов ф-лы I [CLCH 2CH 2N (NO)CONH] NR где N = 1,2, R--PRO-VALNH 2, -LYS-PRO-VALNH 2, -GLY-LYS-PRO-VALNH 2, - TRP - GLY - LYS - PRO- VALNH 2, - TRP-LEU-ASP - PHENH 2, или их солей, которые обладают противоопухолевой активностью. Цель - разработка способа получения более активных соединений указанного класса. Получение ведут реакцией пептидов ф-лы XHN - R, где X - H или BOC

R имеет указанные значения с активированным сложным эфиром ф-лы CL - CH 2 - CH 2 - N(NO)-CO - Q, где Q - N-нитрофенил, галогенфенил, оксисукцинимид или фталимидооксигруппа, причем при получении соединений ф-лы I, где N = 1, используют эквимолярные количества исходных, если N = 2, исходные продукты берут в молярном соотношении 1:2 с последующим снятием в случае необходимости защитных групп и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли. 8 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУ6ЛИН

„.SU„„1586520

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗО6РЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, К ПАТЕНТУ

1 (21) 3697502/23-04 (62) 3506053/23-04 (22) 31. 01. 84 (23) 22.10.82 (31) 3073/81 (32) 22.10.81 (33) HU (46) 15. 08. 90. Бюл. Р 30 (71) Хиноин Дьедьсер еш Термекек

Дьяра. 1 Т (HU) (72) Хелга Шюли, Кальман Медзихрадски, Хедвиг Медзирадски,. Карой Лапиш, Ласло Коппер и Андраш Йеней (HU) (53) 547.964.4.07(088.8) (56) Шредер Э., Любке К. Пептиды.

Ч.I, M,: Мир, 1967, с.116. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-НИТРОЗО-N†(БЭТА-ХЛОРЭТИЛ)-КАРБАМОИЛПЕПТИЛРВ

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ (57) Изобретение относится к дипептидамт в частности к получению произИзобретение относится к способу .получения N-нитрозо-N.†(áýòà — хлорэтил)карбамоилпептидов или их солей — но1 вых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — способ получения новых производных N-нитрозо-N-(бэта-хлорэтил)карбамоилпептидов, обладающих более высокой противоопухолевой активностью. (gI)g С 07 К 5/06, 5/08, С 07 К 5/10 // А 6) К 37/02

2 водных N-нитрозо-N- (бэта-хлорэтил) . карбамоилпептидов ф-лы I

pClCHgCH N(N0)C0NIQI,R, где и = 1,2;

R «-Pro-ValNH<, -Lys-Pro-ValNH<, -Gly-Lys-Pro-ValIlHz, -Trp-Gly-Lys-Pro-ValNH, -Trp-Leu-Asp-РЬеИН,или их солей, которые обладают противоопухолевой активностью.. Цель — разработка способа получения более активных соединений указанного класса. Получение ведут реакцией пептидов ф-лы:

XHN-R, где Х - Н или ВОС, R — имеет укаэанные значения с активированным сложным эфиром ф-лы Cl-СН -СН -N(NO)г

-СО-Q, где Q-n-нитрофенил,галогенфенил, оксисукцинимид или фталимидооксигруппа, причем при получении соединений ф-лы I,где п = 1, используют эквимолярные количества исходных, если п = 2, исходные продукты берут в молярном соотношении I:2 с последующим снятием в случае необходимости защитных групп и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли. 9 табл.

Хроматографию проводят в тонком слое кизельгеля С (фирмы Мерк) в сле дующих системах растворителей: А— хлороформ:метанол 9:I; Б — н-бутанол:ледяная уксусная кислота:вода

4:):1;  †хлорофо: метанол 8:2, à — этилацетат:пиридин:ледяная уксусная кислота:вода 60:20:6:11, Д вЂ” этилацетат:пиридин:муравьиная кислота:вода 60:20:6-5,5; E — метанол:этилацетат ):3; Ж вЂ” этилацетат:

1586520

::пиридин:ледяная уксусная кислота:

: вода 240:20:6:11.

П Р и м е Р 1. N-Нитрозо-N-(Pхлорэтил)-карбамоил-пролилвалинамид (I).

1,37 г (5 ммоль),пролил-валинамидацетата суспендируют в 15 мл безводного диметилформамида и добавляют йри перемешивании и охлаждении сне"ом 1,4 мл (10 ммоль) триэтиламина

1,25 г (5 ммоль) сложного N-нитроо-М-(P -хлорэтил)-карбаминовая кисота†N -окси-сукцинимидного эфира. еакционную смесь перемешивают 15 мин при О С, затем разбавляют, ледяной воой, выпавший в осадок продукт от-;: ильтровывают, промывают холодной одой на фильтре. Продукт сушат в экикаторе над Р О . Выход 0,91 г (53%), т.пл. 130 С (разложение),Rf.

0,8 (В), Я = 88 (И-нитрозогруппа, 400 нм).

Вычислено, : С 44,85; Н 6,33;

Сl 10 19; N 20 13, С„ 1 И O+Cl (347,8).

Найдено, .: С 4,83; Н 6,35;

С1 9s86; N 19,76., Пример 2. a) Альфа-N-нитроо-N-(бэта-хлорэтил)-карбамоил-эпсион-трет.бутилоксикарбонил-лизил-проил-валинами

614 мг (1 ммоль) эпсилон-трет.бутоксикарбонил-лизил-пролилвалин-амид( -тозилата растворят в 10 мл безвод ного диметилформамида, после чего в, приготовленный раствор добавляют 0,14 мл (1 ммоль) триэтиламина, 274 мг (1 ммоль) N-нитрозо-бэта-хлор-этилкарбамоил-и-нитрофенола и 136 мл (1 ммоль) 1-оксибензотриазола. Через 2 ч диметилформамид отгоняют в вакууме, остаток растворяют в 30 мл этилацетата и промывают водой. Этилацетатный слой отделяют, высушивают, упаривают. Остаток обрабатывают безводным диэтиловым эфиром, эфирный слой отделяют декантацией, масло высушивают.

Полученную при этом твердую пеиучистят в колонке, заполненной силикагелем. Фракции собирают, g. створитель отгоняют в вакууме. Остаток растирают в порошок в присутствии безводного петролейного эфира, фильтру— ют.

Получают 250 мл (43 ) соединения, 1И 0,90 (А), Rf 0,80 (Б) Я =- 90 (N-нитрозогруппа, 397 нм).

Вычислено, : Сl 6,15; N 17,02.

С 4Н4 И.гОтС1 (576, 10) .

Найдено,7: Cl 6,00; N 16,61.

5 б) Альфа- 11-нитрозо-И-(бэта-хлорэтил)-карбамоил -лизил-пролил-валинамидгидрохлорид (II).

200 мг альфа- 1 И -нитрозо-N-(бэта-хлбрэтип)-харбамаип1-элеилаи-трет. бутоксикарбонил-лизил-пролил-валинамида смешивают с 6 мл 0,17 н. Раствора муравьиной кислоты в соляной кислоте и раствору дают постоять в течение 5 мин с последующим его выпариванием. Остаток раствоРяют в воде и экстрагируют этилацетатом. Водный слой отделяют и лиофилизируют. Получают 140 мг соединения, Rf 0,10 (Б).

Вычислено, : С 44,49; Н 6,83;

20 .Сl 13,84; М 19,13.

С 19 H85 NÐã C lz (512, 44) .

Найдено,7.: С 44,51; Н 6,80;

Сl 13,72; N 18,81 °

Пример 3. Альфа-эпсилон †бис-tN-нитрозо-N-(бэта-хлорэтил)карбамоил)-лиэил-пролил-валинамид (III).

460 мг (1 ммоль) лизил-пролил-валинамиддиацетата растворяют в

6 мл,диметилформамида, затем в полученный раствор добавляют 0,28 мл (2 ммоль) триэтиламина и 548 мл (2 ммоль)N-нитрозо-бета-хлорэтилкарбамоил-п-нитрофенола, а затем 270 мг (2 ммоль) 1-оксибензотриазола, через

2 ч диметилформамид отгоняют в вакууме, остаток Растворяют в 30 мл этилацетата, промывают водой. Этилацетатный слой отделяют, сушат, упаривают, Остаток обрабатывают безводным диэти40 ловым эфиром, эфир отделяют декантацией, масло сушат. Полученную твердую пену чистят в колонке, заполненной силикагелем. Фракции собирают, растворитель отгоняют в вакууме. Ос45 таток растирают в порошок в присутствии безводного петролейного эфира, фильтруют. Получают 312 мг (51 ) продукта, Rf О 80 (Я), Rf 0 88, 185 (N-нитрозогруппа, 397 нм) .

Вычислено, : С 43,17; Н 6,05;

50 Cl 11,59 ; N 20,61.

Сд Нз МуОуС1д (611 «51) .

Найдено, : С 43,21; Н 6,02;

Сl 11,18; N 20 07 э

Пример 4. а) р — (N-Нитро55 зо-N-(/3-хлорэтил) -карбамоил-Я вЂ” третичный бутилоксикарбонил-триптофил-глицил — лизил-пролилвалинамид.! 5

К смешанному раствсру из 1,2 г (1,74 ммоль) третичн.бутилокспкарбонил-триптофенилглицил-лизил-пролилвалинамида и 10 мл безводного диметилформамида добавляют при 0 С 0,24 мл (1,74 моль } триэтиламина и 400 мг (1,6 ммоль) И-нитрозо-N-(P-хлорэтил)-карбамоил-N-оксисукцинимида. Через

0,5 ч реакционную смесь упаривают, остаток растворяют в этилацетате, раствор промывают водой. Органический слой отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия, упаривают. Выход !,2 г (857), Rf = 0 25 (А).

Вычислено, : N 17,09; Cl 4,33.

С Н НюО С1 (819,37).

Найдейо,X: N 16,72; Cl 4,01. б) б -(М-.Нитрозо-й-(p -хлорэтил)-карбамоил)-триптофил-глицил-лизил -пролил-валил-амидоацетат (IV).

819 мг (1 ммоль) ф,-tN-нитрозо-N-(P-хлорэтил)-карбамоил-третичн. бутилоксикарбонил-триптофил-глицил-лизил-пропил-валинамнда растворяют в 10 мл 0,12 н. муравьиной кислоTbI c хлористоводородной отстаивают раствор 5 мин затем растР вор упаривают в вакууме, Остаток растворяют в воде, экстрагируют этилацетатом. Водную фазу отделяют, лиофилизуют, лиофилизат чис! ят хроматографией на колонке, заполненной силикагелем, элюируют смесь этилацетата, пиридина, ледяной уксусной кислоты и воды 60:20:6:11. Элюат упаривают. Остаток растворяют в воде, лиофилизируют, получают 480 мг (63X) соли заглавия. Rf = 0,25 (I)

90 (50 нм) . Вычислено,X: С 52,40; Н 6,59;

О 18,47; N 17,97, Cl 4 55.

С э4 Н 5 N () О !С 1 (7 7 9 2 7 ) °

Найдено,X: С 52,00; Н 6,29;

О 18,01; N 17,00; Cl 4„46.

Пример 5. а) Альфа-N-нитрозо-N-(бета-хлорэтил)-карбамоил-эпсилон-трет.бутилоксикарбонил-глицил--лизил-пролил-валинамид.

1,30 r (2>6 ммоль) эпсилон-трет. бутилоксикарбонил-глицил-лизил-пролил-валинамида растворяют в 13 мл абсолютированного диметилформамида, Гв раствор добавляют 650 мг (2,6 ммоль)

N-нитрозо-бэта-хлорэтилкарбамоил-N""

-оксисукцинимида и 0,36 мл (2,6 ммоль) триэтиламина. После перемешивания в течение )5 мин реакционную смесь вы86520 паривают в вакууме. Остаток растворя— ют в этилацетате и промывают водой.

Этилацетатный слой отделяют, сушат и выпаривают. Получают 1,29 r (807)

5 продукта. Rf 0,82 (В), Я = 91 (N-нитрозная группа, 397 нм) °

Вычислено,X: Cl 5,60; N 17,69, С,6 gg B Об С1

Найдено,X: Cl 5,48; N 17,31. б) Альфа-N-нитрозо-N-(бэта-хлорэтил)-карбамоил-глицил-лизил-пролил-валинамидгидрохлорид (V), 633 мг (1 ммоль) альфа-N-нитрозо-И-(бэта-хлорэтил)-карбамоил-эпсилон-трет.бутилоксикарбонил-глицил-лизил-пролил-валинамида выдерживают в спокойном состоянии в течение 5 мин в 10 мл 0,14 н. раствора муравьиной

20 кислоты в соляной кислоте, а затем раствор выпаривают °

Остаток растворяют в воде и экстрагируют этилацетатом. Водную фазу лиофилизуют. Получают 540 мг (957)

25 продукта, Rf = 0,65 (D), Я = 84 (N-нитрозная группа, 396 нм).

Вычислено,X: С 42,24,; Н 6,67;

Cl 12,45; N 19,67.

С2< F. бН80601 (569,59) .

30 Найдено,7: С 42,22; Н 6,69;

Cl 12;01; N 18,76.

Пример 6. N-Нитрозо-К-(бэта--хлорэтил)-карбамоил-триптофил-норлейцил-альфа-аспарагил-фенилаланиламид

В условиях, описанных в примере 3 проводят взаимодействие 921 мг (1,5 ммоль) триптофил-норлейцил-альфа-аспарагил-фенилаланиламид-

40 гидрохлорида, 0,21 мл (I 5 ммоль) триэтиламина, 420 мг (1,5 ммоль)

N-нитрозо-бета-(хлорэтилкарбамоил -и-нитрофенола и 200 мг (1,5 ммоль)

1-оксибензтриазола. Получают 800 мг

45 соединения, выход 75X, Rf = 0,8 (Б).

Вычислено,X: С 55,52; Н 5,75;

Сl 4,97; N 15,71; NO 4,20.

С Н4!N О Cl (713,20).

Найдено,X: С 55,50; Н 5,77, 5P Cl 4,58; N 15,32; NO 3,92.

Испытание А. Фармакологическая активность предлагаемых соединений демонстрируется результатами испытаний с использованием в качестве ис55 пытуемых соединений Я-бис- LN-нитЭ, розо-N- ($-хлорэтил) -карбамокл -лизил-пролил-валинамида (на который далее в тексте ссылаются, как на соединение II) и g — (М-нитрозо-N (P-õëoð1586520

"- тил) -карбамоил) — лизил-пролил-валинамид гидрохлорида (на которое далее в тексте ссылаются, как на соединение

III).

В табл,1 показано влияние соедине5 ний II u III на внутрибрюшинно имплантированную мьппам Ь-12 .0 лейкемию .

Соединения II u III оказались более активными, чем 1,3-бис-(f3-хлорэтил)-«1-нитрозомочевина (далее обозначен« ую как ВС11У) и 2-13-(2-х««орэтил)-3« итроуреицо)-2-деокси-0-глюкопираноза (далее обозначенную как хлорозоти«1ин), используемые в качестве сравни- 15 ельнь«х веществ (см.табл.1).

Опухолевый прививочный материал ь

0" асцитных клеток, внутрибрюшинно; животное-хозяин — самки мышей вида

DF; лечение — 3 дня; токсичность "

«1а пятый день 4/6 остаются в живых; оценка — MST-средний период. выживания;

MST обработанной группы

MST контрольной группы х 100; критерий — Т/С « . 125, значитель25 ная противоопухлевая активность.

В табл.2 приведены фармакологические свойства соединения III.

Фармакологические свойства соединения III.Òîêñè÷åñêàÿ доза 133 00 мг/кг внутрибрюшинно. Вещество

«1рименяли на мьппах, зараженных L-1210 (см.табл.2-7) °

В табл.3 приведень« результаты исСледования связи между эффектом и 35 имической структурой соединений, налогичнь«х соединению формулы (II), «а мышах, зараженных лейкемией L-1210.

Результаты влияния соединений форЙуль« (II) на выживание мьппей, зара- 40

«пенных лейкемией L-1210 приведены в

r табл.4.

В табл.5 приведены результаты влияния соединений формулы (II) в комбинации с фармацевтическими агентами 45 на мышей, зараженных лейкомией L-1210.

Приведенные вьппе данные показывают, что новые пептидные производные формух« II u III значительно более активны и менее токсичны, чем BCNY.u 50 хлорозотицин, используеж«е в качест- ве контрольных агентов.

Испытание В. Исследовано влияние соединения II на твердую опухоль.

А) $180 опухоль (подкожно).

Дозировка 100 или 5х20 мг/кг внутрибрюшинно (лечение начиналось на следующий день после трансплантации) оказалось неэффективной.

В) Легочная меланома Льюиса и ме— ланома В1 — опухоли, дающие на мышах метастазы (i.m.)

Результаты приведены в табл.6.

Испытание С.

Фармакология.

Влияние пептидо-нитрозомочевиновых производных на рост экспериментальных твердых опухолей и опухолевых ксенографтов человека.

Объекты: а) экспериментальная твердая опу-, холь мыши S 180, легочная опухоль

Льюиса и меланома мыши В1, в) человеческие опухолевые ксенотрансплантаты; беспигментная меланола НТ 18, колоректальная аденокарцинома НТ 17, колоректальная аденокарцинома НТ 22 (муциноз кожи), карцинома поджелудочной железы НТ 27.

Опыты на экспериментальных твердь«х o««7xo<««>: $ «щ °

Опухоль разрезают на маленькие кусочки и кусочки пересаживают подкожно под кожу, спины мышей CLFP, Лечение начинают на следующий день после трансплантации. Размер опухолей измеряют при помощи кронциркуля и их объем рассчитывают от их диаметра.

Соединение SV370 вводят внутрибрюшинно при дозах 100 или 5х20 мг/кг (одна доза на пять дней). Влияния на рост опухоли не обнаружено.

Опухоль легкого по Льюису (ОЛЛ).

Эту опухоль пересаживают в виде суспензии клеток в бедренную мьппцу инбредной мыши C57BI с количеством клеток 10 . Растущая опухоль дает ре6 гулярные метастазы легкого. Лечение начинают на следующий день после трансплантации. Наблюдают выживаемость обработанных и контрольных животных.

Меланома В 6.

Опухоль пересаживают под кожу спины инбредной мыши C57BI в виде кусочков опухоли. Растущая опухоль дает метастазы в легком. Лечение и оценку проводят аналогичным способом, как описано в случае опухоли легкого по

Льюису.

В соответствии с результатами соединение SV370 умеренно удлиняет продолжительность жизни животных включая

« случаи ОЛЛ и В«6меланомы. Порядок эффективности замедления роста опухоли в основном равен эффекту BCNY,ïðuменяемому как контрольное соединение (см.табл.7).

1586520

Результаты экспериментов показывают, что производные пептиднитрозо. мочевины значительно замедляют рост беспигментной мелаьомы в то время, как их эффект на рост опухолей толстой кишки и поджелудочной железы

Проверка ксенотрансплантатов человеческих опухолей.

Кусочки серийно пересаживаемых опухолей (зрелая тимектомия, полная

5 облучение 8 5 61 восстановление кост6 ного мозга 3а счет 5 ° 10 синтетических клеток ко стного моз га) пере саживают под кожу спины мыши СВА/СА с искусственно подавленным иммунитетом.

Лечение внутрибрюшинным методом начиниже.

Эффект, оказываемый N-нитрозовЂ(P-хлорэтил)-карбамоилпептидными фрагментами, на замедление роста опухоли мышей L-1210, имеющих лейкемию, приведены в табл.9.

N0

С1-CÍ,-C! t-N-CP g, где Q -и — нитрофенил, галогенфенил, оксисукцинимид или фталимидооксигруппа причем при получении соединений где n = 1, используют эквимолярные количества исходных, если n = 2, исходные EI H III берут в молярном соотношении 1:2, с последующим снятием в случае необходимости защитных групп и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде соли.

Формул а изобретения

Способ получения 11-нитрозо-N- (бэ- 40 та-хлорэтил) карбамоилпептидов или их солей формулы I

N0

С!(-! С! !Ч С<1МН !1 4 где и = 1,2;

R = -Pro-Val_#_Ig, -Lys-Pro-ValNH

Gly-Lys-Pro-Va1NH, -Trp-Gly-Lys-Pro-Vali <, -Trp-Leu-Asp-PheNH< кают, когда опухоли достигают диаметра 0,7-1, 3 см и можно наблюдать их рост в прогрессии. Диаметры опухолей измеряют при. помощи кронциркуля, и их объем рассчитывают на основании их Измерение эффекта замедления росдиаметра (V = и /6 хЭ, и-средний диа- та опухоли у L 1210 осуществляют л- 9 метр) ° Порядок эффективности замедле — следующим образом. 1О L-1210 лейкения роста опухоли определяют на ос- миновых клеток пересаживают внутриновании разницы объемов опухолей, брюшинно РВА мышам. Лечение начинают измеренных на 21 день после пере- на следующий день после пересадки. Иссадки в контрольной и обработанной пытуемые соединения добавляют в фигруппах (каждая экспериментальная эиологический раствор хлорида натрия группа включала по крайней мере 6 или в 27-ный буффер Твина 80,. содеропухолей), см.табл. 8. 25 жащий.57 диметилсульфоксида.

l время выживания мышей, прошедших лечение

X = âðåìÿ. выживания контрольных мышей

Л.з р lо время выживания контрольных мышей

Критерий: ILS,X = значительный эффект или их солей, о т л и ч а ю щ и й. — замедления роста опухоли.

30 с я тем, что вводят во взаимодейстПолученные результаты .показывают, вие пептиды общей формулы II что соединения, полученные в условиях XHN-К, предлагаемоro способа, являются эф- где Х вЂ” водород или Вос; фективными цитостатическими агентами, R — имеет указанные значения, при ем олее активными, чем хлорозо- 35 с активированным сложным эфиром обтицин и BCNY. щей формулы III

1586520

Таблицa!

MST эффективность, Е, Т/С

MST, дни

Число жи— ых мышей к 5-му дню

Средняя потеря в весе на

5 день, г (47) ВС11У

48

32

16

Физиологический раствор NaC1

;:Q(NO)LysProVa1Nli НС1

III

;Бисi (!!0)LysProValNll HCI

:, Хлорозотицин !

Контроль

Обе мыши больны.

Таблица 2

ILS, Е

Число выживших животных через 40 дней, Е

Дозировка, мг/кг

Вн.брюш. 8Q

Вн.брюш. 15Q

Вн.брюш.

Токсично

Зх10

3х50

ix!33

lх200

П р и м е ч а н и е: Токсическая доза 133-200 мг/кг внутрибрюшинно, Вещество применяли на мышах, зараженных.L 1210, Таблица 3

Доза, Выживание мг/кг животных, Ж

Соединение

IV q(NO)TrpG1yLysPrc Va1NH.<

17 О

28 10

46 50

100 Токсично !(ЯО)01у1узРгоЧа1% НС1

15 20

45 10

100 35

150 230

Испытуемое соединение Доза IP, мг/кг

>47,0

)47,0

10,5

)47,0

29,5 !

3,0

8,5

12,0

)47,0 !

4,0

8,5

47,0

20,5

9,0

)783

) 783

>783

492

21?

142

783

233

142

783

342

150 — 1,4

-0,8

-l,1

-0,7

-0,5

-0,7 — 1,5

-0,6

-0,8

-0,3

-,,3

-1,2

-о,а

+1,2

+2,5

6/6 /5/

6/6 /5/

6/6 /l/

6/6 /3/

6/6 /2/

6/6

6/6

6/6 /2/

6/6 /3/

6/6

6/6

5/6 /3/

6/6

6/6

10/10

1586520

Таблица 4 ф-Ф еды,%

Дни

Выжива ++ ние, Е

Лечение, доза мг/кг

87

44

33

100

1 х12,5

lх50

lх33

lx25

1х25

Iх100

Зх!0

Зх50

4xlO

1

2

3

1,5,9

1,5,9

1,2,5,6

4Внутрибрюшинно,применение в отмеченный день после трансплантации; выживание обработанных мышей—

Ф» тоже обработанных

ILS — „- х время выживания необработанных мышей х 100;

Выживание на 60-й день после трансплантации.

Таблица 5

ILS, щ» Соединение и/п

Доз а, мг/кг

Выживание, Х дни Е

12 5 1 50

50 0 1 87

5 1 25

20 1 110

1 II

3 BCNY

4 BCNY

5 Лечение соответствует 2+3

6 Лечение соответствует 1+4

7 II

8 Циклофосфамид

9 Дибромдульцит

l0 BCNY

I1 Лечение соответствует 7+8

12 Лечение соответствует 7+9

13 Лечение соответствует 7+10

14 II

15 BCNY

16 Лечение. соответствует 14+15

325

4,4

44

77

lx25 2

Iх50 2

lх50 2

Ix10 2

44

Ix50

Ix20

3 33

3 70

1586520

Т а блица 6

Лечение опухоли

П8 7

Средняя длительДозы при внутрибрюшинном введении, мг/кг ность выживания, дни

Льюиса

21,0

22 0

21,0

Контроль

5 х20

BCNY

5 х4

29

28,5

25,0

В меланома

26,0

31,5

35,0

36

Контроль

5 х20

BCNY

5 х4

21,5

Контроль

5 х20

0,0

0,0

П р и м е ч а н и е, Время лечения: при достижении объема опухоли примерно 8 мм .Метод лечения: внутрибрюшинно;

ТД = удвоение объема опухоли;

ТД,— ТД „, СД = задержка роста = — — — --—

ТД„, Ке — обработанные; Ко — контроль, 42,0 61

34,0 31

Опухолевые ксенографты человека

НТ 18 (амеланотическая меланома)

Контроль — среднее значение ТД 22,5

100 50,0 . СД =,Ы,О

5 х20 56,25 1,5

НТ 22 (слизистая карцинома толстой кишки)

Контроль !7

100 24,0 0,29

5 х20 21,5 0,26

НТ 17 (аденоматозная карцинома толстой кишки)

16,5

14, 75

5,0

1586520

Таблица 7

Лечение опухоли

Дозы, мг/кг

ILS, Средняя, (% величиILS, Е

Средняя величина вына выживания, дни живания, дни

2l П вЂ” 26,0

Контроль

Соединение III

I 00

5,20

BCNY

5,4

21

22,0 4 31,5

27,0 29 35,0

28,5 36 42,0

25,0 19 34,0

61

Таблица 3

Эффект замедления роста опухоли, Ж, при введении вещества в количестве, мг/кг+

Соединение 50 . 100 5 20

I NV.

II 40

IV 65

V 57

84

77

87

62

13

19

IU

38

Ф

Эффективность

100 объем обработ опЕхоли на 21 день - об обр 0 дн та опухоли объем контрольной опухоли на 21 день объем кон ° 0 дней. (1007. означает полное замедление роста опухоли).

Соединение

Соединение

Соединение

Соединение

НТ 17

Соединение

НТ 22

Соединение

НТ 27

С о един е ние

НТ 18

Рс

ILS — продолжительность времени выживания

1586520

Таблица 9

?Ь$, %

Доза в.б.

Испытуемые соединения мг/Kг ммМ/кг

Ц(110)-Pro-Val-11Н

Соединение I

Q (NO) -Ly s-Pro-Va l-N1 > х х НС1 (х)

Соединение II

Q(N0)-7rp-Gly-Lys-ProVal-NHZ

Соединение IV

Токсично

169

200 0,390

50 0,061

100 0 122

200 0,244

300 0,366

Q(N0)-Gly — Lys — Prî-Va1—

ЫН, Нсi

25 . 0,043

Соединение V

48

Токсично

50 0,087

100 0,175

200 0,351

Q(NO)-Trp-NLeu-AspPre-ИН

Соединение VI

50 0,07

100 0,14

150 0,21

5 0,028

10 0 052

20 0,112

38 0,212

BCNY

MQ(NO) — Cl-СН -СН -N(NO) ÑOСоставитель В.Волкова

Техред Л.0лийнык Корректор М.Самборская

Редактор H,ÊHøòóëèíåö

Заказ 3904 Тираж 32 1 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Иосква, 4(-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент", r.yæãopoä, ул. Гагарина,101

12,5

130

0,072

0,115

0,230

0,280

0,576

0,024

0,048

0,097

0,195

0,254

136

80 на 60 день

Токсично

263

60 на

60 день

78

Токсично