Способ определения активности инсектицидов

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в микробиологической промышленности для тестирования энтомопатогенных препаратов. Цель изобретения состоит в повышении точности и сокращении сроков определения за счет использования нового тест-объекта - совки-гаммы. Способ заключается в том, что готовят питательную среду (корм), содержащую различную концентрацию исследуемого инсектицида, обеспечивающую гибель тест-насекомых от 0-15 до 85-100%, затем раскладывают гусениц совки-гаммы, выдерживают их при температуре 28±1°С в течение 72 ч, затем подсчитывают количество погибших и живых гусениц и расчетным путем определяют активность исследуемого инсектицида. Способ позволяет повысить точность определения, сократить сроки с 6 до 3 сут. Использование гусениц совки-гаммы вместо непарного шелкопряда позволяет проводить определение активности в течение года независимо от времени года. 3 табл.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ф

СОЮЗ СОВЕТЯ(ИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

/ -..— РЕСПУБЛИН „.>

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4475163/30-13 (22) 11.08.88 (46) 30.08.90. Бюл. № 32 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии (72) E. Г. Хорхордин, Е. М., Шагов, В. П. Дедищева и Е. М. Асланян (53) 576.8 (088.8) (56) Сельскохозяйственная биология, 1987, № 4, с. 37 — 44. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ИНСЕКТИЦИДОВ (57) Изобретение относится к сел ьс кому хозяйству и может быть использовано в микробиологической промышленности для тестирования энтомопатогенных препаратов.

Цель изобретения состоит в повышении точности и сокращении сроков определения

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в микробиологической промышленности для определения активности энтомопатогенных препаратов.

Целью изобретения является повышение точности и сокращение сроков определения.

Способ осуществляют следующим образом.

Культуру совки-гаммы поддерживают в термостатированном боксе при следующих режимах: температура 26 — 29 С, фотопериод

18 ч, освещенность 500 — 700 люкс, относительная влажность воздуха 60 — 70%. Бабочек содержат в стеклянных десятилитровых сосудах (по 30 — 40 шт. и соотношении полов 1:1). Сверху сосуд накрывают бязевой салфеткой, для дополнительного питания бабочек используют 10%-ный сахарный сироп. На бязевые салфетки самки откла„„SU „„1588349 (51) 5 А Oi N 63/00, С 12 Q 1/00 за счет использования нового тест-объекта— совки-гаммы. Способ заключается в том, что готовят питательную среду (корм), содержащую различную концентрацию исследуемого инсектицида, обеспечиваю1цую гибель тест-насекомых от 0 — 15 до 85 — 100%, затем раскладывают гусениц совки-гаммы, выдерживают их при температуре 28+-1 С в течение 72 ч, затем подсчитывают количество погибших и живых гусениц и расчетным путем определяют активность исследуемого инсектицида. Способ позволяет повысить точность определения, сократить сроки с

6 до 3 сут. Использование гусениц совкигаммы вместо непарного шелкопряда позволяет проводить определение активности в течение года независимо от времени года.

3 табл. дывают яйца. Отродившихся гусениц маточной культуры и тест-культуры помещают в чашки Петри на ИПС (150 — 200 шт. на чашку). На 3 — 4-е сут после посадки гусениц на корм однодневных гусениц II возраста тест-культуры передают для оценки.

Гусениц маточной культуры с 3-го возраста помещают в кристаллизационные чашки, где содержат при плотности 40 — 100 шт. на чашку. Сформировавшихся куколок собирают из чашек, разделяют по полу и содержат отдельно самцов и самок в эксикаторах до вылета бабочек.

Тест-гусениц получают от яиц маточной культуры последовательных генераций отдельными партиями.

Приготавливают параллельно водную суспензию опытного и стандартного препаратов в четырех концентрациях (1,0; 0,25;

0,0625; 0,016%), обеспечивающих гибель

1588349

Формула изобретения

Т а 6:I и ц а 1

СРЕ! I,IIßЯ ошибка 1исло ис— пытаний промышленных бактериальных пре— паратов, 0»ос об Д1»ггс 1ь—

IIOC Гh Р 1—

ПЕРИО;1

11адежнос ти биоиспытаний в году, сут,ЧПИ ГЕ..1ЬEIOC Ть биоис11ытаний, сут биоис

»ытаний в тече1 вития тес т — гусе—

I;HLI OТ яйип, сут

1ИЕ ГО—

\Я> ro

"/ шт.

7 — 9

15+ 2

I!oo l u1

1!рс - Illо

i1;O l 1 Ill>II.

7+ 0,3

22 тест-обьекта от 0 — 15 до 85 — 100%. Каждую концентрацию испытывают в трех параллельных определениях. Суспензию препарата каждой концентрации тщательно перемешивают с приготовленным кормом (в соотношении 1 мл суспензии на 3 r корма) в фарфоровой ступке до получения однородной массы. Смесь корма с суспензией препарата раскладывают в чашки Петри по ! г в каждую. Корм намазывают на донышко

: чашки в форме блина толщиной 1 — 2 мм и, наносят шпателем на корм сеть поперечных борозд, в которые раскладывают гусениц (по 15 шт. в каждую чашку 1!етри). Одновременно ставят контрольный опыт в трех параллельных определениях, для чего тестгусениц помещают на корм без добавления препарата (на 3 г корма добавляют 1 мл воды). Затем чашки Петри с гусеницами, помещают п фототермокамеру, где выдержи, ва ют 11р и 28+-1 С и фотопериоде 18 ч. . Количество погибших и живых гусениц подс1итывают через 72 ч.

1 ибель гусениц с поправкой на гибель

H KoI(Tpoëå вычисляют отдельно для каждой концентрации препарата. Затем определяют

: полулстальные концентрации испытываемого и стандартного препаратов (по системе пробитов или по формуле Кербера) и вычисляют

: активность испытываемого препарата в условиях 11А сопоставлением величин его ЛК;,ii и, !Д;,, стандарта.

В течение года было получено 14 инераций маточной культуры совки-гаммы, признаков вырождения отмечено не было (выживаемос1n от личинок до имаго составлял; с)0+-2% ) .

Преимущества предлагаемого способа в сравнении с известным представлены в табл. 1. В табл. 2 приведены величины

ЛК5О стандартных партий всей промышленных бактериальных препаратов на совкегамме, в табл. 2 — активность одной из партий лепидоцида, установленная в течение года (партия 4911) двумя способами.

Как следует из приведенных данных, предлагаемый способ является универсальным для бактериальных препаратов, обесГ1ечивает непрерывность биоиспытаний, сокращение вдвое сроков подготовки тестгусениц и проведения биоиспытаний и повышение точности испытаний, что необходимо для оперативной оценки качества инсектицидов при их непрерывном промышленном производстве.

Предлагаемый способ также принципиал ьно пригоден для тестирования других микробиологических препаратов и их продуцентов: грибных (например, боверина), микроспоридиальных, вирусных.

Способ определения активности инсектицидов, предусматривающий помещение тест-об.ьектов на питательные среды, содержа1цие различную концентрацию исследуемого инсектицида, выдерживание их с последующей оценкой результатов по гибели тест-объекта, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения сроков определения, в качестве тест-объекта используют совку-гамму.

1588349

Т а б л и ц а 2 лк

Исследуемые препараты

Битоксибациллин (титр — спор — 45 млрд/г) 0,170"0,030

Дендробациллин (титр — спор — 100 млрд/г) 0,0374-0,010

Лепидоцид (титр — спор

100 млрд/г) 0,02544-0,003

Гомелин (титр — спор

90 млрд/г) 0,101+0,025

Энтобактерин (титр — спор

30 млрд/г) 0,11чг+6,020

Т а б л и ц а 3

Г, Способ оценки, Январь-феьраль Май- нонь Пояо ь

3550ьо80

3100+520 31004505

2820+805

32001470

Прототип

П1>с-Лла Г а емьвй

П р и м е ч а н и е; Оценка по прототипу в ноябре была невозможна

Составитель Т. Полянская

Редактор H. Швыдкая Техред A. Кравчук Корректор С. Шевкун

Заказ 2495 Тираж 449 Г1одписнос

ВНИИПИ Государственного коиитета (lo изобретениям и откр ITIIH нри ГКНТ ССг Р

1 (3035, Москва, Ж вЂ” 35, Раугискан Ilë6., д. 4 5

Г1роизводственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгооод. угь Гагарина, I П!