Способ диагностики бактериурии и лейкоцитурии у больных пиелонефритом

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики пиелонефрита. Цель - ускорение способа. Берут пробу мочи, бактерии мочи больного отделяют от лейкоцитов за счет направленного движения в электрическом поле через фильтр с размерами пор 4-7 мкм и определяют оптическую плотность пробы мочи, содержащей микроорганизмы и оптическую плотность пробы, лишенной микроорганизмов и форменных элементов после ее центрифугирования. По разнице оптических плотностей судят о степени бактериурии, после чего разницу оптических плотностей пробы мочи, содержащей лейкоциты, и пробы, лишенной лейкоцитов, по которой судят о степени лейкоцитурии. Время анализа сокращается с 24-72 ч до 30-90 мин. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!) 5 С 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4277203/28-14 (22) 06.07,87 (46) 15.10.90, Бюл. K - 38 (71) Университет дружбы народов им. Патриса Лумумбы (72) В.".;.Родоман, Л,А.Лаберко, A,Ë.Коротаев и А,А.Зарма (53) 615.475 (088 ° 8) (56) Справочник по урологии. / Под ред. Н,А,Лопаткина,. — М., !978, с. 7-8, 15-16. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИУРИИ

И ЛЕЙКОЦИТУРИИ У БОЛЫЫХ ПИЕЛОНЕфРИТОМ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики пиелонефрита, Цель

Изобретение относится к медицине и может быть применено для диагностики пиелонефрита.

Цель изобретения — ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Через отверстие первую камеру полностью заполняют мочой больного, вторую — изотоническим раствором хлорида натрия Камеры устройства разделены фильтром и представляют собой систему сообщающихся сосудов.

Вследствие этого моча начинает диффундировать через фильтр из первой камеры во вторую. Размер пор фильтра должен быть меньше диаметра лейкоци„„Я0„„ 1599772 А 1

2 ускорение способа, Берут пробу мочи, бактерии мочи больного отделяют от лейкоцитов за счет направленного движения в электрическом поле через фильтр с размерами пор 4-7 мкм и определяют оптическую плотность пробы мочи, содержащей микроорганизмы и оптическую плотность пробы, лишенной микроорганизмов и форменных элементов после ее центрифугирования. По разнице оптических плотностей судят о степени бактериурии, после чего определяют разницу оптических плотностей пробы мочи, содержащей лейкоциты, и пробы, лишенной лейкоцитов, по которой судят о. степени лейкоци-. турии. Время анализа сокращается с

24-72 ч до 30-90 с. 3 табл. та и больше величины бактерии, т.е. в пределах 3-7 мкм.

При диффузии из первой камеры во, вторую под действием электрического поля, создаваемого генератором, переходят микроорганизмы. На электроды подается постоянный электрический ток (50 В, 5-10 мА). Через 30 мин все микроорганизмы собираются во

BToDoH камеDp»

Степень бактериурии и лейкоцитурии определяют следующим образом.

Часть мочи иэ каждой камеры после полного разделения лейкоцитов и бактерий центрифугируют при скорости

5000 об/мин в течение 20 мин и измеряют оптические плотности верхней

1599772 части центрифугатов и жидкости из каждой камеры, лишенной бактерий и лЕйкоцитов. Полученные таким образом надосадочные жидкости иэ обеих камер устройства при дальнейшем исследовании являются растворами сравнения при определении содержания бактерий и лейкоцитов соответственно. Измеряют оптическую плотность содержимого второй камеры. Разность между оптической плотностью этой пробы Н оптической плотностью соответствующ пго раствора сравнения обусловлена иСключительно наличием бактерий в п )обе. Таким образом, можно определйть

DI О, - Dgg)) где Ор — оптическая плотность, обусловленная светорассеянием микроорганизмов.

Оптическая плотность бактериальной взвеси прямо пропорциональна концентрации бактериальных тел в растворе

О6

E,L

f5

25 где С - концентрация микробных тел;

Я.- коэффициент, величина постоянная для конкретного прибора, определяется экспери- 30 ментально при измерении оптической плотности раствора, содержашего известную кон" центрацию микробных тел;

L — толщина измерительной кюветы. 35

Далее измеряют оптическую плотНость содержимого камеры. Разница между оптической плотностью содержимого первой камеры и оптической плотНостью соответствующего раствора срав-4р

Нения обусловлена исключительно светорассеянием лейкоцитов в пробе:

О2- Оол, Dq. 2 ) °

Пример 1. Мочу больного М. по- 45 местилн в первую камеру устройства, а вторую камеру зднопннпн стерильным

КЯОтбйичФФхпи РЙФтВФЯОМ хлюрйдй ий трия. В полости обеих камер ввели электроды и посредством генератора 50 создали в устройстве электрическое поле (50 В, 5-10 мА). Через 30 мин произвели посев содержимого обеих камер и подсчет лейкоцитов по методи. ке Стенсфильда - Вебба (табл.1)

Пример 2. Между камерами поместили бумажный фильтр с размером пор 6 мкм. Мочу больного П. залили в первую камеру устройства через отверстие, вторую камеру заполнили изотоническим раствором хлорида натрия ° Через отверстие в первую камеру поместили один электрод, а через отверстие во вторую камеру — другой электрод. Через 30 мин из второй камеры отобрали 3 мп жидкости и измерили ее оптическую плотность при длине волны 450 нм и толщине измерительной кюветы 1 см (О, = 0,527).

Оставшуюся жидкость отцентрифугировали при скорости 5000 об/мин в течение 20 мин и измерили оптическую плотность надосадка при длине волны

450 нм и толщине кюветы 1 см. Оптическая плотность D))þ 0,237. .Разность оптической плотности данной пробы и измеренной ранее составили

D g = 0)527-0,237 = 0,290, Тогда по формуле

С = -- — — 3,628 10

О6 3

Е 1 )

Далее через отверстие первой камеры отобрали 3 мп ее содержимого и измерили оптическую плотность (О - 0,717).

Оставшуюся жидкость отцентрифугировали и измерили оптическую плотность надосадка, которая составила

DÎë

Оптическая плотность, обусловленная светорассеянием лейкоцитов

D = Dy- D„„=0,19, тогда С„=

1,2911. 10.

Полученные результаты сравнили с данными микроскопического исследования осадка мочи и посева мочи на твер" дую питательную среду (табл.2).

В табл.3 показано соотношение концентрации микроорганизмов и лейкоцитов в моче и их оптической плотности, Следующие данные подтверждают преимущество предлагаемого способа по сравнению с прототипом.

Время анализа степени бактериурии по прототипу с сопоставимой точностью (посею мочи ) составляет от 24 ч до

3 сут; время анализа по предлагаемому способу — от 30 до 90 мин.

Способ не требует специального бактериологического оборудования и квалификации исследователя.

Содержимое Камера I Камера II камер

Микроорганизмы О

Лейкоциты 7 «) O

5 «)0

Таблица2

Концентрация

Содержимое камер

Данные, полученные Микроскопия Посев в эксперименте

Микроорганизмы 3,6279 «10 °

Лей коци ты . 1,2911 «10

4 «10! 3,5 «10

l «)0

Таблица3

Концентрация микроорганизмов в l ìë

3,9«)0 с 9«4c) 0

1 «)Оз 2,5 ° 10 6,25«.IO

1,56 «10

Оптическая плотность взвеси микроорганизмов

Концентрация лейкоцитов в 1 мл

Оптическая

0.,875 0,505 0,281 0,172 0,091 0,052

3 «10 9,4«)0 3 ° 3«)О 4,2 «)0 плотность взвеси лейко0,883 0,642 0,270 0,093 цитов

Составитель А.Лычкова ! . Редактор Л,Пчолинская Техред М.дидык Корректор Т,Малец

Тираж 511

Подписное

Заказ 3139

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям н открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óàãoðîä, ул. Гагарина,101

5 1599772 6 «

B связи с сок с сокрашением времени ана- ния способа, пробу мочи центрифугилиза повышается э ается эффективность лече- руют, отделяют бактерии от лейкоциния, тов, определяют оптическую плотност мочи до и после центрифугнрования и

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я по увеличению оптической плотности диагностируют бактериурию, после чеСпособ диагностики бактериурии:и го определяют разницу оптических лейкоцитурии у больных пиелонефритом плотностей пробы мочи, содержащей путем определения количества бактерий 10 лейкоциты, и пробы, лишенной лейкои лейкоцитов в моче, о т л и ч а ю — цитов, по увеличению которой диагношийся тем, что, с целью ускоре- стируют лейкоцитурню.

Таблица l