Штамм streptomyces erythraens - продуцент эритромицина
Изобретение относится к медицинской промышленности, а именно к производству антибиотика эритромицина. Целью изобретения является создание штамма с повышенной способностью к антибиотикообразованию. Для получения штамма Streptomyces erythraens ВНИИА - 2041 использовали исходный штамм 8-77. Отбор проводили в несколько ступеней на среде без пропилового спирта. В процессе отбора использовали обработку мутагенами, в качестве которых служили нитрозодиметилбиурет, ультрафиолетовые лучи и этиленамин.
Изобретение относится к медицинской промышленности, а именно к производству антибиотика эритромицина. Целью изобретения является создание штамма с повышенной способностью к антибиотикообразованию. Для получения штамма 2-34 S.ery-thraens в качестве исходного материала был использован штамм 8-77. Отбор проводили в несколько ступеней на среде без пропилового спирта. В процессе отбора использовали обработку мутагенами, в качестве которых служили НДМБ (нитрозодиметилбиурет), ультрафиолетовые лучи и этиленамин. Штамм депонирован в коллекции ВНИИА под номером 2041. Полученный штамм 2-34 S.erythraens имеет следующие отличительные признаки. Спороносы спиральные с большим количеством спор, спорангии отсутствуют, подвижные споры отсутствуют. Споры образуются на воздушном мицелии. Фрагментации не наблюдается. Культуральные признаки. Кукурузная среда. Колонии выпуклые, звездчатые, диаметром 5-6 мм, воздушный мицелий светло-коричневый, субстратный - коричневый. Пигмент в среду не выделяет. Среда Гауза 1 с глюкозой. Колонии почти плоские, диаметром 2,5-3 мм, в центре - пуговка; воздушный мицелий - светло-желтый, субстратный - светло-желтый, пигмент в среду не выделяет. Среда Гауза 1 с крахмалом. Колонии слегка выпуклые, диаметром 2-3 мм, с ровным краем, круглые; воздушный мицелий в центре колонии - белый, к краю - светло-бежевый, субстратный мицелий - светло-бежевый. Пигмент в среду не выделяет. Среда Гауза 2. Колонии выпуклые, морщинистые, диаметром 5-7 мм; воздушный мицелий - от бежевого по краю колонии до коричневого к центру. Субстратный мицелий - коричневый; пигмент в среду выделяет слабо. Среда Ваксмана. Колонии слегка выпуклые; диаметром 1,5-2 мм; воздушный мицелий - белый, по краям колонии слабо развит; субстратный мицелий - белый, пигмент в среду не выделяет. Среда Чапека. Колонии почти плоские, диаметром 2,5-3 мм; в центре - пуговка; воздушный и субстратный мицелий - белый; пигмент в среду не выделяет. Соевая среда. Колонии выпуклые, морщинистые, диаметром 10-10,5 мм; воздушный мицелий - светло-бежевый, субст- ратный мицелий - коричневый. Пигмент в среду не выделяет. Гороховая среда. Колонии выпуклые, диаметром 6-8 мм, края неровные; воздушный и субстратный мицелий светло-желтый. Пигмент в среду не выделяет. Физиолого-биохимические признаки. Утилизирует арабинозу, глюкозу, инозит, сахарозу,. сорбит, ксилозу, мальтозу, фруктозу, рамнозу, слабо утилизирует лактозу, маннит. Реакция на инверсию сахара положительная. Гидролиз крахмала - в течение времени наблюдения (5 сут) обесценивания не происходит. Полное разжижение желатины происходит на 5-е сутки. Нитраты не восстанавливает. Пептонизация молока - начало пептонизации молока на 11-е сутки, полная пептонизация - на 14-е сутки. Накапливает до 7500 мкг/мл эритромицина. Накапливает в 1,5 раза меньше биомассы. Известный штамм. Проведение ферментации с использованием штамма 2-34 S.erythraеns иллюстрируется следующими примерами. П р и м е р 1. Культурой штамма 2-34 засевают посевную среду следующего состава, % : кукурузная мука 6; зеленая патока 6; кукурузный экстракт-0,8; аммоний сернокислый - 0,6; мел 1,0; остальное - водопроводная вода. Выращивание производят при 32,5
0,5оС на круговой качалке в течение 48 ч. Полученным посевным мицелием в количестве 10% засевают ферментационную среду следующего состава, %: кукурузная мука 7; лактоза 2; зеленая патока 6; кукурузный экстракт 0,8; аммоний сернокислый 0,6; мел 1; остальное - водопроводная вода. Ферментацию проводят на круговой качалке при 32,5 5оС в течение 7 сут. В конце процесса определяют содержание эритромицина биологическим или химическим методом. Содержание эритромицина составляет 7500 мкг/мл. П р и м е р 2. Культурой штамма 2/34 засевают посевную среду состава по способу, указанному в примере 1. Выращивают на качалке, как указано в примере 1, и засевают этим мицелием среду в посевном аппарате вместимостью 500 л. Состав среды, %: кукурузная мука 6; зеленая патока 6; кукурузный экстракт 0,8; аммоний сернокислый 0,6; мел 1,0; пропинол Б/400 0,04; остальное - водопроводная вода. Мицелий, полученный в посевном аппарате, передают в ферментатор вместимостью 3 м3 со средой следующего состава, %: кукурузная мука 9,2; лактоза 1; зеленая патока 6; кукурузный экстракт 0,8; аммоний сернокислый 0,65; мел 1; жир 0,25; остальное - водопроводная вода. Ферментацию проводят в течение 8,5 сут при непрерывной работе мешалки и подаче сжатого стерильного воздуха в аппарат при 33,5 0,5оС. Содержание эритромицина, определенное химическим или биологическим методом, в конце процесса составляет 7000 мкг/мл; сухая масса мицелия составляет 2,1%. Таким образом, штамм 2-34 S.erythra-еns выгодно отличается от известного повышенной способностью к образованию эритромицина, так как образует до 7500 мкг/мл эритромицина против 6500 мкг/мл, образуемых штаммом 85-1 в лабораторных условиях. Предлагаемый штамм позволит получить в производственных условиях на тех же производственных мощностях на 15% больше антибиотика за счет повышенной активности. За счет снижения количества накапливаемой биомассы, а следовательно и потребности в сжатом воздухе штамм позволит снизить расход электроэнергии на проведение процесса в 1,5 раза.
Формула изобретения
ШТАММ STREPTOMYCES ERYTHRAENS - ПРОДУЦЕНТ ЭРИТРОМИЦИНА. Штамм Streptomyces erythraens ВНИИА-2041-продуцент эритромицина.
