Способ получения диагностического средства для определения дегидрогеназы

 

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностическим средствам. Цель - обеспечение длительного сохранения диагностикума. Получают диагностикум для определения дегидрогеназы путем пропитки гидрофильного тампона смесью окислительно-восстановительного красителя, субстрата для дегидрогеназы и соляной кислоты. Согласно изобретению тампон перед нанесением смеси помещают в металлический аппликатор с заправочной гильзой таким образом, что перед тампоном образуется свободное пространство, вводят смесь в это пространство, сушат при давлении 1,33 Па, затем при давлении 0,13 Па до содержания влаги в тампоне менее 1%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОПИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 G 01 N ЗЗ/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (21) 3628600/14 (22) 05.08.83 (31) P 3231287.3 (32) 23.08.82 (33) DE (46) 07.08.91. Бюл. М 29 (71) Меди-Фарма Фертрибсгеэельшафт мбХ (DE) (72) Ашок Кумар Poy (IN) и Роланд Вильфрид

Штайнбах (О Е) (53) 615,475 (088.8) (56) Заявка ФРГ N. 2443741, кл. G 01 N

33/48, 1980, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ДЕГИДРОГЕНАЗЫ

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии.

Цель изобретения — обеспечение длительного сохранения диагностикума.

Согласно предлагаемому способу применяют носитель, который связывает один окислительно-восстановительный краситель, смесь веществ из субстрата, соответствующего подлежащей обнаружению дегидрогеназе, соединение, передающее водород по меньшей мере одного окислительно-восстановительного красителя, и при известных условиях буферную систему, причем носитель имеет полярные группы и смесь веществ имеет рН менее 5,0. При этом получают диагностическое средство для обнаружения патологически повышенной концентрации дегидрогенаэы, которое наряду со способностью к длительному хранению, длительное время, например более двухлет, имеет высокую диагностическую точность.

„„5U„„1669408 А3 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к диагностическим средствам. Цель — обеспечение длительного сохранения диагностикума, Получают диагностикум для определения дигидрогеназы путем пропитки гидрофильного тампона смесью окислител ьно-восстановительного красителя, субстрата для дегидрогеназы и соляной кислоты. Согласно изобретению тампон перед нанесением смеси помещают в металлический аппликатор с заправочной гильзой, таким образом, что перед тампоном образуется свободное пространство, вводят смесь в это пространство. сушат при давлении 1,33 Па, затем при давлении 0,13 Па до содержания влаги в тампоне менее 1 .

В качестве носителя применяют тампон, содержащий волокна целлюлозы. Изготовленное диагностическое средство пригодно для внутренних исследований тела, например для диагноза рака в половой области у женщин. Диагностическое средство может храниться многие годы, обладает высокой диагностической точностью, несмотря на короткое время нахождения в пациентке, максимум 10 мин, и гарантирует прочную связь, при случае, образованного при диагнозе красителя с волокнами целлюлозы тампона, так что переход красителя на слизистую влагалища исследуемой пациентки не происходит.

Для этого могут быть применены обычные гигиенические тампоны. Последние не должны быть намотанными, а иметь продольный шов. Тампоны из волокон целлюлозы обладают тем преимуществом, что прочно связывают краситель, обраэован1ГГЧПВ ный при применении диагностического средства, Тампон может состоять также и из других волокон, например из гидрофильных искусственных волокон, которые для увеличения их поверхности и способности абсорбировать могут быть выполнены полыми. Кроме того, могут быть применены тампоны из смеси волокон различного рода, например натуральных и синтетических волокон, если волокна гидрофильны и обладают полярными группами.

Диагностическое средство, содержащее тамон, пригодно не только для диагнозов внутри тела, но и для диагнозов снаружи

1ела. В последнем случае жидкость тела, подлежащая исследованию. приводится в соприкосновение с областью тампона, который содержит упомянутую смесь веществ.

Комбинация из носителя и смеси веществ перед сушкой помещается в упаковочную оболочку. Таким образом, после сушки упаковочная оболочка должна быть только заделана и закрыта. Поскольку заделка продолжается короткое время, то устраняется опасность того. что снова влага попадет на носитель и смесь веществ и ухудши Г стойкость диагноситического средства к хранению, Согласно специальной форме выполнения упаковочная оболочка, которая содержит носитель и смесь веществ, закрывается еще в сушильном устройстве. Этим обеспечивается низкое влагосодержание, достигнутое путем сушки, сохраняется также и после закрытия упаковочной оболочки в ее внутреннем пространстве.

Для применения диагнос;ического средства в форме тампона удобно, когда тампон помещен в аппликатор, при том тампон может быть введен в полость тела, например во влагалище, без непосредственного прикосновения к нему .пальцами и без опасности инфицирования.

При изготовлении предлагаемого диагностического средства тампон помещают во вводимую гильзу аппликатора. При этом предпочтительно тампон поместить в аппликаторе до наложения смеси вещества, поскольку тогда аппликатор служит держателем для тампона, когда на последний наложена смесь веществ.

Выгодно, когда аппликатор имеет вводимую гильзу с непроницаемой для жидкости внутренней стенкой и тампон так установлен во вводимой гильзе, что внутри вводимой гильзы, перед вводимым концом тампона, образовано свободное пространство. Это пространство может временно принять смесь веществ подлежащую нане5

55 сению на тампон, и, таким образом, содействует ускоренному протеканию процесса.

Внутренняя стенка, непроницаемая для жидкости вводимой гильзы аппликатора, делает возможной быструю подачу смеси веществ на тампон в жидком виде беэ впитывания стенкой вводимой гильзы или проникновения сквозь нее.

Раствор смеси веществ может впрыскрваться в упомянутое свободное пространство, например, посредством дозирующего устройства. Это впрыскивание может быть произведено очень быстро, вследствие чего может быть повышена скорость изготовления.

В качестве упаковочной оболочки применяется, предпочтительно, трубочка, открытая с одной стороны, иэ металла высокой теплопроводности с уп ругой запорной пробкой. Такая трубочка, например, из алюминия, проста в изготовлении и после постановки запорной пробки, которая может состоять из резиноподобного материала, обеспечивает долговременную защиту диагностического средства от воздуха, влаги, света и механических повреждений, Кроме того, трубочка может служить держателем диагноситического средства во время нанесения смеси веществ на носительь.

Помимо этого, высокая теплопроводность материала трубочек способствует быстрой транспортировке тепла между отдельными трубочками. Это оказывается благоприятным, когда трубочки после наполнения диагностическим средством при взаимном соприкосновении со своим содержимым подвергаются сушке.

Трубочка наполняется комбинацией из аппликатора и тампона, затем наносится смесь веществ на тампон, вслед за этим трубочка с частично закрытой пробкой и со своим содержимым подвергается сушке.

Частичное закрытие трубочки позволяет произвести желаемую сушку и более полное закрытие трубочки, что может быть сделано внутри сушильной установки.

Для достижения длительной устойчивости упакованного диагностического средства носитель и смесь веществ подвергаются сушке в сублимационной сушильной установке и там же упаковочная оболочка закрывается при уменьшенном давлении, которое установлено для процесса сушки в сублимационной сушильной установке.

Сублимационная сушка рекомендуется для предлагаемого способа, поскольку предмет сушки относительно быстро и полно освобождается от растворяющего средства смеси вещества, Быстрой сушке благоприятствуе 1он. кое распределение смеси вещества на носителе. Это значит, что смесь веществ после сушки связана с носителем, главным образом, в аморфной форме, а не в форме больших кристаллов. Связь между отдельными частями смеси веществ, в частности между компонентами красителя и носителем, благодаря этому повышается.

Кроме того, при сублимационной cyu,ке иэ носителя, например волокон целлюлозы тампона, удаляются летучие составные части, например вода, вследствие чего yn,чшаются пространственные условия для компонентов красителя, чтобы войти в возможно более тесный контакт с молекулами носителя. Результатом этого является большое число ковалентных связей между красителем и носителем, Этим сильно снижается опасность освобождения молекул красителя иэ носителя под действием жидкостей тела, Кроме того, благодаря прочной связи между носителем и красителем реакция окрашивания, происходящая при применении диагностического средства, при значении рН ниже 5,0 протекает специфически и потому точность диагноза значительно повышается, Сильная связь, достигнутая между смесью веществ и носителем путем сублимационной сушки, является также причиной длительной стойкости изготовленного диагностического средства.

Диагностическое средство тогда сушится оптимально, когда сушка производится в первой ступени при меньшем, небольшом вакууме и во второй ступени при большем вакууме. Это оказывает благоприятное действие на отделение, например, молекул воды, которые незав,симо от нанесенной смеси веществ содержатся в носителе.

Меньший вакуум для предварительной сушки составляет 1,33 Па(10 тор) ледующая затем ступень последующей сушки устанав.ливается на больший вакуум — около 0,13 Па (10 тор).

Длительная стойкость диагностич ского средства получается тогда, когда оно высушивается до влагосодержания внутри упаковочной оболочки менее 1, 8 этом случае диагностическое средство может храниться до его применения более 3,5 года беэ значительного ухудшения его функциональных способностей.

Пример. Отдельные компоненты смеси веществ взвешиваются при исключении света, обладающего большой энергией.

Например, берется смесь веществ следующего состава, мг:

DZ л,пи а1 «a i рия 57.б

Нико инамидаденин динуклео пд 3,0

Метил1иазолилбрпмид 272,5

Триэганоламин 39,8

PMS 10,0

Вода бидис иллированная,r 2,С

Компоненты смеси раст воряются в воде при красном све1е.

Обычный гигиенический ампон из гигроскопической ваты пс.-ещаюг во вводимую ильзу аппликатора тампона, в которую телескопически в=тавляют аыгалкивающую гильзу несколько меньшего диаметра. Обе гильзы изготовлены из картона. Внутренние поверхности гильз покрыты алюминиевой пленк й. С помощью перфорации ой области, где гильзы перекрывают одна другуо, предотвращают выскальзьгэание выталкивающей гильзы.

Тампон вводят через конец вводимой гильзы так далеко в аппликатор, что он прилегает к переднему концу выталкивающей гильзы, при этом перед вводимым концом тампона оставляют свободное пространство обьемом 3см . Нить для возврата тампоз на проходит от заднего конца тампона внутри выталкивающей гильзы и наружу через ее конец, Систему иэ аппликагар.-..: ; л в:;: мещают в упаковочнук: трубочку - э aлюмL:ния так, что вводимыи конец аполидов.. р .1 отверсти трубочки направлено вверх.

Посредством Q<. зирующе о устройсiû сверху в открытое ipocTpaHGTB0 внутри вво димой гильзы, перед вводимым концом тампона, впрыскивают 2 мл заранее приготовленной вышеупомянутой смеси веществ. При этом происходит разбухание тампона внутри гильзы, и он заполняет свободное прос грансгво.

Затем в отверстие упаковочной трубочки вставляется пробка иэ упругого материала до первого выступа на окружности трубсчки. В этом положении пробки остается открытым, благодаря наличию выемки в пробке, канал между внутренним и внешним пространством трубочки. Трубочка помещается в сублимационную сушилку, Содержимое трубочек эамораживают, затем во время первой ступени сушки, сушат при вакууме 1,33 Па.

Через 12 ч содержимое трубочек сушат при вакууме 0,13 Па. Весь процесс сушки занимает 24 ч. В конце процесса сушки остаточная влажность внутри упаковочной оболочки составляет менее 1,ь. В этом случае диагностическое средство можст иметь срок хранения до 3,5 года беэ ухудшения функциональных свойств, Эта сохранность не зависит оттого, состоит ли тампон только

1669408

Составитель В. Кассин

Редактор Н. Тупица Техред M.Ìoðlåíòàë Корректор С. Черни

Заказ 2661 Тираж ЗВВ Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/S

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 из волокон целлюлозы или из хлопчатобумажных волокон. Носитель может состоять из куска пенополиуретана или любого другого гидрофильного материала.

Формула изобретения

Способ получения диагностического средства для определения дегидрогеназы путем смачивания гидрофильного тампона смесью окислительно-восстановительного красителя, субстрата для гидрогеназы и соляной кислоты, от лича ю щи и с я тем, что, с целью длительного сохранения дивгностикумэ, тампон перед нанесением красителя помещают в металлический

5 аппликатор с заправочной гильзой так, что перед тампоном образуется свободное пространство, краситель вводят в зто пространство, сушат и ри давлении 1,33 Пв, затем при давлении 0,13 Па до содержания влаги в

10 тампоне менее 1 .