Способ выявления микроциркуляторного русла и лимфоидной ткани кишечника

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к морфологии, и может быть использовано для диагностики патологии желудочно-кишечного тракта у лабораторных животных в эксперименте и в ветеринарии. Цельповышение информативности и наглядности за счет синтомической оценки и экономия сырьевой базы за счет совместной реализации способов. Через брюшную аорту проводят промывку сосудов кишечника раствором глюкозы с гепарином с предварительной перевязкой воротной вены и перерезкой ее дистальнее лигатуры. Пережимают брюшную аорту и под визуальным контролем заполняют сосуды кишечника 0,15-ным раствором азотнокислотного серебра. Наливку производят при одновременном воздействии на кишечник ультразвука с частотой колебаний 830 кГц и помещении органа в физиологический раствор при 37°С в течение всей наливки . Инъекцию прекращают после появления раствора азотнокислого серебра в приносящих лимфатических сосудах брыжеечных лимфоузлов. Вводят цветную массу соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования . Кишечник отсекают. После извлечения кишечника из брюшной полости серебро восстанавливают на свету или с помощью кварцевой лампы. Кишечник обрабатывают 1,5%-ным раствором хлористого натрия, промывают, просветляют 1%-ным раствором соляной кислоты в течение 1- 2 сут окрашивают гематоксилином Гарриса, затем повторно обрабатывают 0,1%-ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 ч для дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков). Анализ результатов проводят с помощью микроскопа. (Л С о 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

""-".6Ю8ИЦ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4461629/14 (22) 15.07,88 (46) 30.09.91. Бюл. ЬЬ 36 (71) Пермский государственный медицинский институт (72) Е.Н, Оленева, В.А. Четвертных, А.С. Костицын, С.В. Пономарева и Ю.B. Мякишева (53) 615.475(088.8) (56) Ромейс Б, Микроскопическая техника, M. Изд-во иностранной литературы, 1954. (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ МИКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА И ЛИМФОИДНОЙ

ТКАНИ КИШЕЧНИКА (57) Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к морфологии, и может быть использовано для диагностики патологии желудочно-кишечного тракта у лабораторных животных в эксперименте и в ветеринарии. Цель- повышение информативности и наглядности за счет синтомической оценки и экономия сырьевой базы за .,счет совместной реализации способов. Через брюшную аорту проводят промывку сосудов кишечника раствором глюкозы с гепарином с предварительной перевязкой воротной вены и перерезкой ее дистальнее

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к морфологии, и может быть использовано для диагностики патологии желудочно-кишечного тракта у лабораторных животных в эксперименте и в ветеринарии.

В советской и зарубежной литературе нет описания аналогичных методик, позволяющих на одном биологическом объекте (препарате) последовательно выявлять мик Ж 1680088 А1 лигатуры. Пережимают брюшную аорту и под визуальным контролем заполняют сосу° ды кишечника 0,15-ным раствором аэотнокислотного серебра. Наливку производят при одновременном воздействии на кишечник ультразвука с частотой колебаний

830 кГц и помещении органа в физиологический раствор при 37 С в течение всей наливки. Инъекцию прекращают после появления раствора азотнокислого серебра в приносящих лимфатических сосудах брыжеечных лимфоуэлов, Вводят цветную массу соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования. Кишечник отсекают. После извлечения кишечника иэ брюшной полости серебро восстанавливают на свету или с помощью кварцевой лампы. Кишечник обрабатывают 1,5 -ным раствором хлористого натрия, проМывают, просветляют 17,-ным раствором соляной кислоты в течение 12 сут окрашивают гематоксилином Гарриса, затем повторно обрабатывают 0,1ф,-ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 ч для дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков). Анализ результатов проводят с помощью микроскопа. роциркуляторное русло, ассоциированную с кишечником лимфоидную ткань и их взаимоотношение.

Цель изобретения — повышение информативности и наглядности путем синтетической оценки и экономии сырьевой базы за счет совместной реализации способов, что достигается введением в сосуды кишечника азотнокислого серебра наркотизированному животному через брюшную аорту при

1680088 дят при одновременном воздействии на ки- 25

40

55 одновременном воздействии на кишечник ультразвука в теплом физрастворе и последующей обработке препаратов по модифицированому методу Гельмана: кишечник отсекают, промывают, а затем просветляют

1 -ным раствором соляной кислоты в течение 1 — 2 суток, окрашивают гематоксилином

Гарриса не более 12 ч, затем дифференцируют в 0,1 -õoì растворе соляной кислоты в течение 1-2 ч.

Способ осуществляют следующим образом, После срединной лапартомии у животного через брюшную аорту проводят промывку сосудов кишечника раствором глюкозы с гепарином с предварительной перевязкой воротной вены и перевязкой ее дистальнее лигатуры. Затем пережимают брюшную аорту и под визуальным контролем заполняют сосуды кишечника 0,15 ным раствором азотнокислого серебра. Для снятия спазма сосудов, предохранения их разрыва, ускорения заполнения интерстиция и лимфатических сосудов наливку произвошечник ультразвука с частотой колебаний 830 кГц и помещении органа в теплый физраствор (37 С). Ультразвуком воздействуют в течение всей наливки. Инъекцию прекращают после появления раствора азотнокислого серебра в приносящих лимфатических сосудах брыжеечных лимфоузлов, С целью констрастирования того или иного звена кровеносного микроциркуляторного русла вводится цветная масса соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования. Кишечник отсекают.

После извлечения кишечника из брюшной полости серебро -восстанавливают на свету или с помощью кварцевой лампы. Кишечник обрабатывают 1,5-ным раствором хлористого натрия, промывают, просветляют 1 ным раствором соляной кислоты в течение

1 — 2 суток, окрашивают гематоксилином

Гарриса, затем повторно обрабатывают

0,1 -ным раствором соляной кислоты в течение 1 — 2 ч для дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков), Анализ результатов проводят с помощью микроскопа, Пример . Под эфирным наркозом у крысы проводят срединную лапаротомию, препарируют брюшную аорту, В область бифуркации аорты вводят иглу с пластиковым катетером и фиксируют ее с помощью лигатуры. Выделяют структуры ворот печени, накладывают зажим на воротную вену, ниже зажима пересекают ее. Промывают сосуды 5 -ным раствором глюкозы (37 С) с гепарином (5000 ЕД на 0,5 мл глюкозы) че5

20 рез катетер в брюшной аорте. Пережимают брошную аорту ниже диафрагмы. Крысу помещают в чашку с теплым физиологическим раствором (37 С) и воздействуют на кишечник ультразвуком с помощью аппарата

УТП вЂ” 1 в непрерывном режиме с частотой колебаний 830 гКц. Через тот же катетер заполняют сосудистое русло 0,15 -ным раствором азотнокислого серебра. Затем с целью контрастирования того или иного звена кровеносного микроциркуляторного русла вводят цветную массу соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования. Извлекают органы желудочно-кишечного тракта из брюшной полости, промывают их проточной водой. С помощью солнечного луча или кварцевой лампы восстанавливают серебро в сосудах в течение 5 мин. Заполняют кишечник водой и исследуют сосудистое русло серозной и мышечной оболочек под бинокулярной лупой. Кишечник разрезают по линии п эикрепления брыжейки, отделяют брыжеечные лимфоузлы, помещают кишечник на 1 ч в 1,5 -ный раствор хлористого натрия, кратковременно промывают, а затем на 24 ч в 1 -ный раствор соляной кислоты, Промывают препараты в проточной воде 3 ч, затем обрабатывают гематоксилином Гарриса, После сильного прокрашивания помещают препараты с целью дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков) на 1 ч в 0,1 -ную соляную кислоту, Вновь исследуют препараты, но уже со стороны слизистой оболочки кишечника под бинокулярной лупой с целью изучения одиночных и групповых фолликулов и их взаимоотношений с сосудистым руслом.

Расслаивают стенку кишечника, послойно изучают те же структуры, а также микроциркуляторное русло лимфоидных фолликулов.

Одновременно забирают часть кусочков кишечника на гистологическое исследование.

Для консервации используют раствор Кайзерлинга.

Результаты окраски: все звенья микроциркуляторного русла и лимфоидная ткань кишечника выявляются одновременно.

Звенья сосудистого русла хорошо диференцируются, лимфоидные узелки четко контурируют на фоне неокрашенной окружающей ткани, всегда видны взаимоотношения микроциркуляторного русла с лимфоидной тканью кишечника.

Положительный эффект состоит в повышении информативности способа, когда все звенья микроциркуляторногo русла и лимфоидная ткань кишечника выявляются одновременно. Повышается достоверность результатов эа счет суправитально инъек1б80088

Составитель Ю,Есилевский

Редактор Н.Швыдкая Техред М.Моргентал Корректор М.Максимишинец

Заказ 3252 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород,-ул.Гагарина, 101 ции сосудов, дифференцирования звеньев сосудистого русла и четкого контурирования лимфоидных узелков на фоне неокрашенной окружающей ткани, Увеличивается наглядность, когда возникает воэможность рассмотреть структуру микроциркуляторного русла и его взаимосвязи с лимфоидной тканью кишечника. Одновременно сокращается вдвое число лабораторных животных и время исследований за счет использования одного и того же препарата (а не двух различных) для одновременного выявления микроциркуляторного русла и лимфоидной ткани; кишечника, Формула изобретения

Способ выявления микроциркуляторного русла и .лимфоидной ткани кишечника путем инъекции его сосудов раствором. азотнокислого серебра и выявлением лимфоидной ткани по методу Гельмана, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения информативности и наглядности путем син5 тетической оценки и экономии сырьевой базы за счет совместной реализации способов, наливку сосудов кишечника азотнокислым серебром производят через брюшную аорту In vitro, одновременно воз10 действуют на кишечник, помещенный в теплый физиологический раствор, ультразвуком, затем кишечник отсекают, промывают, просветляют 1 -ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 суток, окрашивают

15 гематоксилином Гарриса не более 12 ч, затем дифференцируют лимфоидную ткань путем повторной обработки 0,1 -ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 ч..