Способ определения белка в биологической жидкости

 

Изобретение относится к области медицины , а именно к методам лабораторного исследования. Целью изобретения является повышение точности способа, а также его упрощение. Цель достигается тем, что каплю исследуемой жидкости наносят на стекло , далее ее высушивают при 18-30°С. В сухом образце определяют ширину и диаметр краевой зоны, которая имеет более гомогенный рисунок и четко определяется от центра, заполненного солевыми кристаллами . Содержание белка определяют по формуле. Способ прост, не требует сложных методов, точность его выше, чем известные клинические способы по определению белка . 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з G 01 N 1/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕ ГЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4628955/14 (22) 29.12.88 (46) 30.09.91, Бюл. N 36 (71) Московский областной научно-исследовательский клинический институт им.М.Ф, Владимирского (72) С,Н.Шатохина, И.Л,Теодор, Т.В.Ма курина, M. Ï, Â û áoðoâ, Ю,В.Помазков, С.А,Яковлев, А.В.Могутов и А.Н,Мирош ников (53) 616-088.8(088.8) (56) Меньшикова В.В. Лабораторные методы исследования в клинике, М.: Медицина, 1987, 13. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКА В БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным исследованиям., Целью изобретения является повышение точности способа, а также его упрощения.

Способ осуществляют следующим образом.

Прецизионными пипеточными дозаторами наносят каплю на стекло.

Объем капли биожидкости всегда был один и тот же — 20 мкл. Капля свободно сбрасывается с насадки дозатора, установленного на укаэанный объем, с расстояния

3-4 мм от поверхности стекла. Каплю высушивают и получают овальный рисунок на стекле. Далее измеряют ширину аморфной зоны, так как этому способствует стандарти„, SU „„1681182 А1 (57) Изобретение относится к области меди- цины, а именно к методам лабора орного . исследования. Целью изобретения является повышение точности способа, а также его . упрощение. Цель достигается тем, что каплю исследуемой жидкости наносят на стекло, далее ее высушивают при 18 — 30 C. l3 сухом образце определяют ширину и диаметр краевой зоны, которая имеет более томогенный рисунок и четко определяется от центра, заполненного солевыми кристал лами. Содержание белка определяют по формуле. Способ прост, не требуетсложных методов, точность его выше, чем известные клинические способы по определению бел-. ка. 1 табл. > зация объема капли, ее форма в виде круга, а также обусловленность границ измерения (ширина аморфной зоны измерялась под микроскопом от края капли до начала кристалла соли), В тех случаях, когда капля при сбрасывании на стекло принимала не круглую; а овальную, либо какую-другую форму, раскапывание повторялось. В других случаях, когда объем биожидкости для анализа был очень мал, а. единственная капля при раскапывании приобретала, например, форму овала, то вычисляли среднюю арифметическую ширины аморфной зоны в 4 точках (на 12, 3, 6 и 9 "часах" ), калибровочную прямую получали следующим образом: берут

20 — 25 образцов биологической жидкости, например, ликвор, с различной концентрацией белка (г/л), определяемой унифициро1681182

С =K.—, D

Соотношение—

D мм

1,0

2,5

5,0

10,0

15,0

20,0

0,10

0,11

0,12

0,13

0,14

0,15 ванным способом, раскапывают, замеряют соотношение диаметра капли и ширины аморфной зонь1 и наносят соответствующее значение на график (ось Х вЂ” соотношение диаметра, мм, ось Y — концентрация белка, г/л). Прямую проводят через максимальное совпадение числа точек, То >ке самое повторяют с другими био>кидкостями (сыворотка крови, выпотные жидкости).

Раствор альбумина на физиологическом растворе хлор,лстого натрия показал следующие концентрации белка, г/л: 1,0;

2,5; 5,0; 10,0; 20,0; 30,0; 40,0; 50,0; 60,0; 70,0;

80,0; 90,0; 100,0. Измерив по капле соотношение — (мм) получена калибровочная б

D прямая.

Концентрация белка в растворе альбумина дана в таблице, Приведенная калибровсчная прямая по альбумину является универсальной для биологических жидкостей, Пример 1, Больной П., 20 лет. Диагноз при поступлении: ooóõoëü задней черепной ямки, Взято для исследования 0Ä02 мл -пинномозговой жидкости. При исследовании содержания белка в пробе выявлено:

Ширина краевой зоны (d) равна 0,9 мм.

Диаметр пробы (О) равен 7,0 мм.

Соотношение — равно 0,13, что соото

0 ветствует содержанию белка в пробе в количестве 3,9 г/л (см. таблицу).

Пример 2. Больной С,. 39 лет. Диагноз при поступлении; бронхопневмония, осложненная плевритом. Взято 0,02 мм плевральной жидкости (без разведения). При исследовании содержания белка в пробе выявлено:

Ширина краевоп зоны (d) равна 1,2 мм, Диаметр пробы (D) равен 6,0 м.

1мм

Концентрация белка, г/л

Соотношение — равно 0,2, что соото ветствует содержанию белка в количестве

7.0 г/л.

5 Пример 3, Больной B., 69 лет, Диагноз при поступлении: миеломная болезнь. Взято 0,02 мл сыворотки крови (без разведения), При исследовании содержания белка в пробе выявлено;

10 Ширина краевой зоны (d) равна 1,6 мм.

Диаметр пробы (D) равен 6,0 мм.

Соотношение —. равно 0,27, что соотd ветствует содержанию белка в количестве

15 95 г/л, Способ позволяет точно и, что особенно ценно, просто при использовании капли биологической жидкости получить ответ о содержании белка в данной пробе.

Формула изобретения

Способ определения белка в биологической жидкости путем исследования пробы

25 жидкости, о т л и ч а ю щ и й- с я тем, что, с целью повышения точности способа и его упрощения, пробу наносы на стекло, далее высушивают при температуре 18-30 С, а количество белка определяют по ширине и

30 диаметру краевой зоны, ко орое рассчитывают по формуле

35 где С вЂ” количество белка в исследуемой жидкости, г/л;

d — ширина краевой зоны, мм;

D — диаметр пробы, мм;

40 К вЂ” коэФФициент расчета калибровочной кривой по соотношениюколичестваальбумина на величину отношения ширины краевой зоны на диаметр пробы.

1681182

Продолжение таблицы, \

Составитель Л,Стебаева

Редактор.Т. Пилипенко Техред М.Моргентал Корректор Т. М а л е ц

Заказ 3306 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета ао изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101