Способ определения наличия спермы в судебно-медицинском исследовании пятна

 

Изобретение относится к области медицины , а именно к способам обнаружения спермы в составе пятен при судебно-медицинском исследовании и других областях медицины. Цель изобретения - повышение чувствительности и сокращение времени анализа, упрощение способа. Материал с пятном спермы измельчают, экстрагируют при 45-50°С в течение 30-40 мин, затем к экстракту добавляют формальдегид до конечной концентрации 1-1,5% и проводят встречный иммуноэлектрофорез с моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину и при появлении линии преципитации выявляют в пятне сперму. В сравнении с прототипом сокращается время анализа в 15 раз, чувствительность анализа - в 10 раз. При этом происходит упрощение способа за счет исключения этапа центрифугирования.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)ю G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4720852/14 (22) 18.07.89 (46) 07.10.91. Бюл. N 37 (71) Астраханский государственный медицинский институт им. А.В.Луначарского (72) А.А.Николаев и Л.И.Ломовицкая (53) 615.374(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 946549, кл. А 61 В 10/00, 1980. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИЧИЯ

СПЕРМЫ В СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОМ

ИССЛЕДОВАНИИ ПЯТНА (57) Изобретение относится к области медицины, а именно к способам обнаружения спермы в составе пятен при судебно-медицинском исследовании и других областях

Изобретение относится к области меди-, цины, а именно к биохимии и может быть использовано в частности для обнаружения спермы в составе пятен при судебно-медицинском исследовании, в акушерско-гинекологических исследованиях, в андрологии.

Целью изобретения является сокращение времени, повышение чувствительности анализа и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Экстракцию пятен проводят 3040 мин при 40 — 45 С., далее алфквоту экстракта смешивают с равнымобьемом

2-3 -ного раствора формальдегида на веронал-мединаловом буфере и исследуют во встречном иммуноэлектрофорезе с моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину (ПБГ) и при

„„Я „„1682931 А1 медицины. Цель изобретения — повышение чувствительности и сокращение времени анализа, упрощение способа. Материал с . пятном спермы измельчают, экстрагируют при 45 — 50 С в течение 30-40 мин, затем к экстракту добавляют формальдегид до конечной концентрации 1-1,5$ и проводят встречный иммуноэлектрофорез с моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину и при появлении линии преципитации выявляют в пятне сперму. В сравнении с прототипом сокращается время анализа в 15 раз, чувствительность анализа — в 10 раз. При этом происходит упрощение способа за счет исключения этапа центрифугирования, положительной реакции судят о наличии спермы.

Пример . Кусочек марли с пятном белесого цвета размером не более 0,5 см измельчают ножницами и помещают в пробирку, содержащую 0,9 раствора хлористого натрия. Экстракцию проводят на водяной бане при 450С в течение 40. мин.

Затем отбирают из этой пробирки 10 мкг экстракта и в титровальной доске смешивают с

10 мкг 2 -ного раствора формальдегида на веронал-мединаловом буфере. Далее на стеклянной пластине размером 5,0 х 20,0 см, залитой 1 -ным агаром на веронал-мединаловом буфере пробивают два ряда лунок диаметром 2,0 мм на расстоянии одного ряда от другого в 4,0 мм. Анодный ряд запол няют моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину, а катод.

1682931

Составитель В.Литовченко

Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор В.Гйрняк

Редактор Н.Бобкова

Заказ 3409 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, )К-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ный ряд — последовательными разведениями исследуемых образцов, Каждый образец берут в четырех разведени ях (1 /2; 1/16; 1/64„

1/256), в каждую лунку вносят по 5 мкл. Как минимум в двух разведениях ставят в каждом опыте стандартный препарат ПБГ.

Оценку результатов проводят через 3040 мин после завершения электрофореза.

Исследуемый образец дает линию преципитации с антисывороткой в разведении 1/64 и 1/128. Делается заключение о наличии спермы в составе пятна.

Предлагаемый способ дает возможность установить наличие спермы в самых разных смесях и пятнах, При этом время исследования сокращается от 30-40 до 2;;

3 ч, так как иммунодиффузионное определение простатического бета-глобулина заменяется встречным иммуноэлектрофорезом, а экстракция проводится при повышенной температуре. Эти изменения стали возможны после изучения физико-химических свойств ПБГ. Наряду с сокращением сроков исследования способ уменьшает набор необходимого оборудования, так как не проводится центрифугирование. Используется встречный .иммуноэлектрофорез, что повышает чувствительность способа в 10 раз (по известному способу удается об5 наружить сперму по концентрации ПБГ равной 5мкг/мл,,а по предлагаемому способу — 0,5 мкг/мл).

Формула изобретения

Способ определения наличия спермы в судебно-медицинском исследовании пятна путем измельчения материала с пятном, экстракции, иммуноанализа и при наличии по15 лос преципитации с разведениями сыворотки к простатическому бета-глобулину определяют наличие спермы в пятне, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения сроков

2р анализа, упрощения способа, экстракцию пятен проводят при 45-50 С в течение 3040 мин, затем к экстракту добавляют формальдегид до конечной концентрации

1-1,5ф„а иммуноанализ осуществляют с по25 мощью встречного иммуноэлектрофореэа.