Способ проведения реакции титрования

 

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в лабораторной практике. Целью изобретения является упрощение способа. Способ осуществляется тем, что один из компонентов реакции отделяют от другого с помощью полупроницаемой мембраны, а оценку результатов проводят по расчету границы смещения окраски прореагировавших веществ.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л G 01 М 31/16

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

6 (21) 4444762/13 (22) 20.06.88 (46) 15.11.91. Бюл. ¹ 42 (71) Украинский научно-исследовательский институт защиты растений (72) В.П.Кубайчук(30), Чень Цзянь Синь(СИ) и Е,M,Ðåçíèöêèé (SU) (53) 661. (088.8) (56) Воскресенский П.И. Техника лабораторных работ. M. Химия, 1973.

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в лабораторной практике.

Целью изобретения является упрощение способа.

Способ характеризуется тем, что один из компонентов реакции отделяют от другого с помощью полупроницаемой мембраны, а оценку результатов проводят по смещению границы окраски прореагировавших веществ, Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Одну часть сосуда емкостью

1 мл, отделенную от другой полупроницаемой мембраной, заполняют разбавленным в

10 раз раствором для фиксирования кинофотоматериалов для определения в нем тиосульфата натрия, а другую часть сосуда с внутренним сечением 0,5 см, вносят 0,1 н.

2 водный раствор йода с крахмалом (индикатор).

В результате реакции граница обесцвечивания синей окраски йода продвигается на 3,2 см, т,е. объем обесцвеченного (прореагировавшего) раствора составляет 3,2 х 0,5 =

=1,6 см, или 1,6 мл, 1 мл 0,1 н, раствора йода

3. Ж 1691734А1 (54) СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ РЕЛКЦИИ

ТИТРОВЛН ИЯ (57) Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в лабораторной практике. Целью изобретения является упрощение способа. Способ осуществляется тем, что один из компонентов реакции отделяют от другого с помощью полупроницаемой мембраны, а оценку результатов проводят по расчету границы смещения окраски прореагировавших веществ. содержит 12,7 мг йода. Следовательно в описанной выше реакции прореагировало

20,32 мг йода.

Йод реагирует с тиосульфатом натрия по следующей схеме:

l2+ Ка2520з = 2Na!+ Na2S40e.

Отсюда следует, что для связывания 20,32 мг йода требуется 25,32 мг тиосульфата натрия, т.е. в 1 л анализируемого раствора содержится 25,32 г этого вещества, Пример 2. В одну иэ частей удлиненного сосуда, разделенного (полу-) проницаемой мембраной, наливают водный раствор перекиси водорода, и в другую подкисленный серной кислотой раствор перманганата калия. Молекулы перекиси водорода, проникая сквозь мембрану, вступают в реакцию с прилежащими слоями раствора перманганата калия по уравнению

2КМп05 +5Н202 + ЗН2504 = K2S04 + +2MnS04+ ЗН20 + 502, в результате чего эти слои обесцвечиваются из-эа превращения окрашенного в темнопурпурный цвет перманганата калия в светлороэовый сульфат марганца. По мере истощения прилежащих слоев раствора перманганата калия, в реакцию вовлекают1891734

Составитель T.Çàáîéêèíà

Техред М,Моргентал Корректор И.Муска

Редактор Ю.Середа

Заказ 3923 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 ся все более удаленные слои, в результате чего граница окраски, обусловленной перманганатом калия, все дальше отодвигается от мембраны. Этот процесс продолжается вплоть до полного исчезновения перекиси водорода, содержание которой будет точно определяться объемом обесцвеченного раствора перманганата калия. Количество оттитрованной перекиси -водорода определяют по формуле

Р-1701 S 1 Т, где Р— количество перекиси водорода, мг;

S — внутреннее сечение реакционного сосуда (та его часть, в которую налит раствор перманганата калия), см;

L — расстояние, на которое отодвинулась граница (фронт) обесцвечивания раствора перманганата калия от мембраны, см;

Т вЂ” титр раствора перманганата калия, выраженный в нормальности (N).

При 5 = 0 5 см, L = 2,5 сМ и Т = 0 1N г количество оттитрованной перекиси водорода составляет

P = 17,01 0,5 2,5 0,1 = 2,13 мг.

Пример 3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в грудных мышцах насекомых. Отпрепарированные грудные мышцы пчелы заключают в цилиндрическую капсулу, изготовленную из полупроницаемой мембраны (например, очень тонкого целлофана). Размещают такую капсулу точно в центре лунки предметного стекла и эали ают раствором метиленового синего (МС) с сукцинатом натрия, приготовленном на фосфатном буфере (рН 7,5) так, чтобы капля того раствора выступала над поверхнос. ю предметного стекла, а затем обеспечивают анаэробные условия, Для этого выступающую часть капли срезают так, чтобы в заключенной между стеклами емкости с расположенным в ней исследуемым образцом в растворе MC не оказалось пузырьков воздуха. Подготовленную таким образом опытную пробу термостатируют на водяной бане, следя по секундомеру за скоростью расширения границы обесцвеченной (лейкоформа МС) эоны на общем светлосинем (голубом) фоне и достижением ею условленной конечной границы.

Определение активности сукцинагдегидрогеназы осуществляют по формуле

5 60 V.Q

А= — р — — —, где А — активность сукцинатдегидрогеназы, выраженная в мг МС, восстановленного 1 r ткани эа 1 ч; Ч вЂ” объем восстановленного

10 раствора МС, мм; 0 — содержание МС в 1 з. мм раствора, мкг; P — масса навески ткани э (мышц), мг: t — время, необходимое для достижения обесцвеченной зоны МС условной конечной границы, мин.

15 ПриЧ=100мм;0=1,0мкг; P=10мги

= 7,5 мин активность сукцинатдегидрогеназы в мышцах медоносных пчел составляет;

А — — 80 8 мг МС на 1 г

60 100 1,0

1 ткани в 1 ч.

Таким образом, способ титрования прост в осуществлении, надежен в работе, дает воспроизводимые, корректные резуль25 таты, не требует сложной и дорогостоящей аппаратуры. По точности он практически не отличается от традиционных методов титрования, à по затратам времени на проведение серии анализов в 2,0 — 2,75 раэ

30 экономичнее, При атом, по мере увеличения количества опытных проб в серии относительные затраты времени еще больше снижаются, Формула изобретения

Способ проведения реакции титрования, включающий подготовку титрующего раствора и исследуемого образца, смешивание титрующего раствора и образца, оценку результатов по изменению окраски раство40 ра, отличающийся тем, что, с целью .упрощения способа, для титрования используют емкость, разделенную полупроницаемой мембраной, через которую происходит смешивание титрующего рас45 твора с образцом, а оценку результатов проводят по смещениюграницы окраски.