Способ регенерации растений земляники
Изобретение относится к. биотехнологии и может быть использовано в селекционных работах для размножения ценных генотипов, а также для генетического и физиолого-биохимического излучения процессов морфогенеза земляники Целью изобретения является повышение выхода побегов и их укореняемости а также повышение жизнеспособности растений-регенерантов Поставленная цель достигается тем, что на этапе культивирования эксплантатов для получения каллусной ткани в питательную среду Мурасиге - Скуга вводят дополнительно 0,5-2,0 мг/л кинетина 2 0-4,0 мг/л 2 4Д 1 0-3 0 мг/л шбберсллорои кислоты О 5-2 0 мг/л б-бензиламинопуриьа 1 0-3 0 мг/л индолилмаслянои кислоты 3 0-5,0 мг/л индолилуксусной кислоты и 2 0-4 0 мг/л к -нафтилуксусной кислоты При культивировании каллусной ткани до получения побегов в питательную среду Мурасиге - Скуга вводят 03-1 0 мг/л кинетина, 0 5-2 0 мг/n гибберелловой кислоты 6 0-12,0 мг/л 6-бензиламинопурина 0 3-1 0 мг/л имцолилугсусной кислоты и 0 3-1 0 мг/л а -пафтилуксусиой кислоты Затем побеги пересаживают для укоренения на питательную средуМурасиге- Скуга с добавлением 03-1 0 мг л гибберелловой кислоты 1030 мг/л индолил масля ной кислоты и 03-1 0 а -нафтилуксусной кислоты После этого растения-регенеранты культивируют дополнительно в течение 3 4 недель на питательной среде Мурасиге Счуга с введением в нее 10-3 0 мг/л гиббереллоооп кислоты и О 3- 1 0 милиндогилмасляной киспоты Способ позволяет повысить выход побегов более чем на 40%, укореняемость в 2 раза и повысить жизнеспособность рзстений-регенев 4-6 раз обеспечивает возможность ускорения селекционного процесса в 2-3 раза 4 та5л чткявз «юд ю
(:(1".)3 (".(:()((" (1Х с о (I 1 л 1 и Г т и IГ .: :к и х ,"(г(:((у(. (Ик
1 ъ (iEi) 2 ((I), с() А 01 1,, 1 Г (()СУ((И>CTBFН((Ь(И КГ>(ЛИтГ1 п(1 изогр(-т (),(я>л и г." квь(тиъ) (;(ВИ f >;t((CC(-I
G 1ИСАНИЕ УЗОГ- 1->Е "(" =.: "-.1::.
1(АВТОРСКОУУ СВИДЕТЕЛЬСГВУ (2 1) 44 601 72 /1 3 (22) 16.05,88 (46) 23.11.91, E>0/-., К. -13 (71) Центральная генетическая лаборатори ) им. И. B. Мичурина (72) Н, M. Х. Нафталиев и Р. M. Чюленев (53) 581,143.6(088.8) (56) Оздоровление и размножение плодовых и ягогных растений методом культурь) мер(;— стематических верхуц)ек. Методи еские указания. М., 1979. (54) СПОСОЬ РЕГЕНЕРАЦИИ РАСТ1:Н(1(1
ЗЕМЛЯНИКИ (57) Изобретение от (осится к биотех)30логии и может быть использогано в сс. екц:— онных работах для размножения ценнь;х генотипов, а также для генетического и ф.зиолого-биохимического излучения и роцессов морфо ген еза земляники. Цел (.:о изобретения является повышение выхода побегов и их укореняемости, а также пов!„шение жизнеспособности растений-реге> срантов. Поставленная цельдостигается-.см что на этапе культивирования эксплантатов для получения каллус()ой ткани в питательную среду Мурасиге — Скуга вводят дополнительно 0.5 — 2,0 мг/л кинатина 2.0 — 4,0 мг/л
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использова-ID селекционных работах для размножения ценных генотипов, а также для генетического и физиолого-биохимического излучения процессов морфогенеза земляники, Целью изобретения является повышение выхода побегов и их укореняемости, а также повышение жизнеспособности растсний- регенерантов.
ill:!,,;c< н(). I сл0 I I .., .Π— «,(0 ()Г-/.;, (. -наф)::. Iy>:cyc! I0й к! 1 ло ) I. !P!1 )ГУл ь ) )1в>(1100)BI)!1)1 .ал-усной TêBII!I,-0 I;eeyore) I)я побегОв в пи-;, г(-). ь) (ук)-,р „ „ j(l;;.;B -c,; е (, к „Га вводят
> 3- 1 0 мг/ 1 кинаii B. 0.5 2 0 мг/л гиббе1."ъ. ЛOB0(.1 к(;(, 10 ():! 6 0 1 ) 0 I",.-/ 1 6 — бetlBI)Ла мин(>пур(",),л, ) .;- 1 0 (г/л и;,;, ..)лилу:;сугной K0PelIeI! I÷,:(3 i) 2, Г 1ь" )О Г Г(, у )Л), „2(1) е
Оку(а с добавлз>.иэ; 0,3 i.0 х;(л гиббс) 1 I-i Д 0л(ль)Bc )я (с!I >, c;10T - I) 3 I 0 с( (афт((., к(0).î « .-: . .:, -), По (с "-10.(о оасТЕЛЬ (О Вт ;. . i, .. С 30.: I,". I.ги )(ЕЛ(-Но;1
С Г. О аС .", ;, 0 а С I С,, C !3 H e e l I ) 0 M В «) Р а
1 0 ".0 Г/л .:(0 л"., .; к;cr-О) ь . 3,31.0 ми "индо,-. .;л .а;. )ячeli кllc о ь . Способ позволяет I)îв с . ь ()üход Оое(ов 0 леа
Г ,e,"м t 2 1,„;, укоре>; смс; —. в d р:;B"..и -ue=lсить ж))з; сспec06I!Îc!: р-": —,сни.-.-рс "e)le
PBtI1 ОВ 1--5 "..Bз Об> -.(.e÷исает 3ЭЗМ0>",Но . ь gekepe(3))я . )СКI !0>I!(0I О!
; р и; е, (;; и р-,;, t t )1;; (,;(-, pB(1eHa первом э-.а.—.е г;Ол)ч(3:tej,(аллус «у(0 т,ань из экс(.л,. нi; тсв веге.а>(, .) ых органов "-,e )1(.)II),и. Б к="честве эксп. а -т,1т;;>, бсру т или вe рху ше 3 -I! 1 е veep(1(. 1 ем ь) I".л ( лис гья. или пс»();и у:,GB. Зксп1B)lтBTLI пиме(дают в куль гуpBBI.,! Iые сосуды. 00. (eð 3(BI.(I)å питатель )у)0 Граду, в к0) орую до;1олHIIT II—
))С (30ДЯТ КЗОГС:Ii)иа Pe) )ËЯТООЫ
169240
Таблица 1
Экзогенные, «
Добавки. мг/л регуляторы ротста
Я
; Макси.«аль-1 Миiiinмаль- 1 Средние Максималь, МинимальСредние ные ные „: ные ные
1,0
Кин
0,5.", 0
Повторность
Повторность
Повторность
30 40
) ГК
6 БАП
ИМК
2,0
2,0 3.0
1,0 2,0
2,0 3.0
1,0
1,0
60, 11
5,0
4,0
ИУК (НУК
3,0
2,0
4,0
3,0
66i
В каждой повторности по 100 культуральных сосудов с каллусными тканями
Минимальная ко щентрация. мг/л; ГК
1,0, VIViК 0,3.
Средняя концентрация, мг/л: ГК 2,0, ИМ К 0,5.
Максимальная концентрация, мг/л; ГК
3,0; ИМ К 1,0.
В резyiiüTÎте е> е - 3 fÐ8 " ели растения регенерангы завершаю- свой цикл развит и я: п р и M è í in i " я л ь н ы х д о б а а е а х регуляторов роста в среднем получают 1Э, 20 и 1: растений жи".íåñïîñîáíûõ регенерантов; при средних — 21, 22 и 19; при максимальных — 18, 19 и 17 соответственно (табл. 4).
Предлагаемый способ позволяет создавать новые формы растений для селекции землянлки, полу:Tb ценные генотипы при повышенной жизнеспособности и укореняемости растений-регенергнтов.
Формула изобретения
Способ регенерации растений земляники, включающий в гчленение эксплантатов. высадку их на питате ьную среду Мур,сите-Скуга для получения каллусной ткани, последу ощее культивирование при освещении (1 — 1,5) лк и температуре 25-27 С до получения пабе;ов. гересадку побегов на среду для укоренения и получения растениin-регенерантов, о т л v. ч а ю шийся тем, то, с целью повыи ..ния выхода побеiо:. и
L1x укореняемосT11, а также повышения >кизнеспосоГности растений-регенерантов. высадку экспланTатов осуществляюT на
5 питательную среду Мурасиге - Скуга, в которую вводят дополнительно 0.5 — 2,0 мг/л кинетина. 2,0-4,0 мг/л =,-..„1„1,0 — 3,0 мг/л тибберс",ë,îâiié v, ñëî b; 0,5--2.0 мг/л 6бе;зиламинопур:. .на, 1,0 — 3,0 мг/л индо10 лилмасляной кислоты, 3,0 — 5,0 мг/л индолилуксусной кислоты и 2,0-4,0 мг/л и -нафтилуксуснои кислоть, культивирование каллуснол ткани до образования побеf05 осуществляют на питательной среде
15 «Лукас«ге — Скуга " введением в нее 0,3-1,0 мг/л кинетина, 0.5- 2,0 мг/л глбберелловой кислоты, 6,0-12.0 мг л 6-бензиламинопурина, 0,3 — 1,0 мг/л индолилуксусной кисло- ы, 0,3 — 1,0 мг/л гт -нафтилуксусной кислоты, 20 пересадку побегов осущес-вляют на питательную среду Мурасигс — Скуга с добавлением О," — 1,0 мг n iú.66epåëïîâoé кислоты, 1,0-3,0 мгi л индолилмасляной кислотьь
0,3-1,0 мг/л а -наф-,и, уксусной кислоты, 25 полученные растения-регенеранты культивируют дополнительно в течение 3-- 1 недель на питатель- ой среде Мурасиге — Скуга с введением в нее 1,0-3.0 мг/л гибберелловой кислоты in 0,3-1,0 мг/л индолилмасля, V HOA КИСЛО bi., Число культуральных сосудов, образовавших каллус из эксплантатов
1 вегетативных органов земляники в зависи«.ости от интервалов конце«п- раций регулято ов оста
7 !
Табл ица2
<5разован17е листовых t<ооегов из исходной I :àëã.óñíîé ткани .О <<.речлага(<мому сп(спбу — — тС!бразо-!
:вание,л<7С ! ! товы.< !
;,, n fl! ° };1 (! из исход,<ых
МЕОИС7 Емати" ес к»х верхушек по ! известно- му спс-.о-j, E5y }!! ,< (Г< !. ) Я В К 7, Г. Г,! (j!
ЭКЗОГЕ<<- !!, I Ма.(си1;,аксиV ñ !,× 1 I Ы Е <.,Р<<,П,Н.ИО мяльнt> е 1 мал ь}<не j!! ! ! 0,3 К и< I е т < 71< 0.1 ! 2,0 22 7",0 б БАП! 6,0
25 !!I 22 (<1УК >!У К 0.3 0,3 Табл .!jя 3 КО<< j,Ñ I j за!! Лл ре у 1" Г!!
Л мг, !" ,"Knpptjet<ë8 л, .<. г(3( 1 1 ! 3кзогенНЫЗ DQгул поры 1зос (а < ! Мяксиl7«, НИЕ маль}!ые: !! l }7НИj.t,! i7}! 0,3 ., О! ! !! ! < ! ! I! ! (! 3 0 <<1 !<,
1В j 73 I-!УК! У аj М< 1! <.!! З 1,0, 20!! 1 (! 1 1 И Н И Ср<<здt< t j(< мальные Пов<орti Ci<:i Ü г б., П(1е гор}-;Ость 2Г Ловторt<0Ñ7 Ü 2б — б ! Повгорн<н:ть ! ! ПовторН ОСТЬ ! 10 !=IT Î Рность 21! ! 7! 7 19 ! Укоренение л«стовых побвгов 1 О- лученн ых из мери- 1 ! стема7и-! чески.< верху< ек I по известному, спосо(!у 1692409 Tа б» " u,а тПалучееее яеанесчаеобаых еас-l 1 тений-регенерантов при введе-, нии дополнительного этапа в t предлагаемый способ Т 1 Максимальные МиниСредние MBëüíûå аксильные ких верхушек по известному способу Повторность 3,0 I I I 17 ность 17, 5 Составитель С. Куваева Техред M.Mîðãåíòàë Корректор О.Кундрик Редактор А.Гратилло Заказ 4020 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва. Ж-35, Раушская наб„4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 1,0 1 1 ! Повторность Повтор(Получе( ние жиз- неспособных растенийрегенерантов из ме ристем атич
