Способ определения тяжелых металлов в биологических жидкостях

 

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использовано для определения тяжелых металлов в биологических жидкостях. Цель изобретения - повышение точности способа и увеличение числа определяемых металлов. Пробу биологической жидкости минерализуют последовательно концентрированными серной и соляной кислотами, проводят полярографическое определение металлов в растворе 48 мМ солянокислого гидразина, содержащем хлористый натрий и соляную кислоту, а в качестве стандарта используют чистые тяжелые металлы. Способ позволяет определять в одной пробе свинец, медь и цинк с высокой точностью. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 6 01 N 33/84

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

QO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

t 1 (1 » (21) 4442618/14 (22) 17.06.88 (46) 30.12.91. Бюл. № 48 (71) Научно-исследовательский институт краевой патологии (72) Л.Н, Окшина и Ю,Е. Пономарева (53) 612.015(088.8) (56) Павловская Н,А. и др. Лабораторное дело, 1982, ¹ 1, с.26 — 29. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЯЖЕЛЫХ

МЕТАЛЛОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использоИзобретение относится к медицине, а именно к биохимии, в частности к клинической и экспериментальной биохимии, и может быть применено для определения концентрации тяжелых металлов в крови, моче и других биологических жидкостях.

Цель изобретения — повышение точности способа и увеличение числа определяемых металлов.

Способ осуществляется следующим образом.

Получают пробу биологической жидкости (например, от больного берут 5,0 мл крови из локтевой вены в гепаринизированную пробирку), пробу переносят в фарфоровый тигель, добавляют концентрированную азотную кислоту в количестве 0,35 мл и такое же количество концентрированной сер- . ной кислоты, тщательно перемешивают, ставят на огонь и выпаривают досуха. Мочу и дуоденальное содержимое берут по 20 мл.,, Ы2,„1702322 А1 вано для определения тяжелых металлов в биологических жидкостях. Цель изобретения — повышение точности способа и увеличение числа определяемых металлов. Пробу биологической жидкости минерализуют последовательно концентрированными серной и соляной кислотами, проводят полярографическое определение металлов в растворе 48 мМ солянокислого гидразина, содержащем хлористый натрий и соляную кислоту, а в качестве стандарта используют чистые тяжелые металлы. Способ позволяет определять в одной пробе свинец, медь и цинк с высокой точностью, 2 табл, Тигель помещают в муфельную печь на 2 ч, после минерализации тигель охлаждают, полученный осадок заливают 10,0 мл фонового раствора А, Фоновый раствор готовят путем растворения иэ 150,0 г хлорисгого натрия, 5,0 г соляно-кислого гидразина в O

10,0 мл, 18 3 r концентрированной соляной ) кислоты, после чего доводят объем раствора (ь) до 1000 мл дистиллированной водой. Пере- ) ) мешивают до полного растворения, отфильтровывают и с фильтратом проводят полярографические исследования. Основные стандартные растворы готовят путем взвешивания по 0,5 r меди и кадмия и по 1,0 г свинца и цинка с точностью до 0,001 мг, Навески металла подвергают действию азотной кислоты (1:1) до полного разложения. Полученный раствор выпаривают, приливают концентрированную серную кислоту, выпаривают, осадок растворяют в

300 — 400 мл фонового раствора В, приготов1702322 ленного разведением 150,0 r хлористого нагрия в 10,0 мл концентрированной соляной кислоты, доведенной дистиллированной водой до объема 1000 мл. Так готовят основные стандартные растворы для металлов, которые затем исследуют в опытных пробах. В 1 мл основного стандартного раствора содержится по 0,5 мг меди и кадмия и по

1 мг свинца и цинка.

Рабочие стандартные растворы готовят следующим образом.

Берут 1,0; 2,0; 3,0; 5,0; 10,0; 20,0; 50,0;

100,0; 200,0 мл основного раствора, наливают в разные сосуды емкостью 1 л и доливают до объема 1000 мл фоновым раствором А, Получены концентрации стандартных растворов: медь и кадмий — 0,5; 1,0, 1,5; 2,5; 5,0;

10; 12,5; 25; 50; 100 мг/л; цинк и свинец—

1,0; 2,0; 3,0; 5,0; 10,0; 20,0, 25,0; 50,0; 100,0;

200,0 мг/л.

Проводят полярографию пробы и стандартов. Полярография проб проводится при потенциалах: для свинца 0,47 — 0,5; для меди

0,6; для цинка 1,02 — 1,08, Стандарт для полярографии подбирается в зависимости от концентрации элементов в биосредах, Да,лее рассчитывают содержание свинца в изучаемой пробе по следующей формуле:, Х Ч Н У 1000 К К

:,где Х вЂ” содержание определяемого элемен,, та в пробе, мг;

V — объем пробы,мл(разведение);

Н вЂ” высота полуволны пробы, мм;

Z — концентрация элемента в стандартном растворе, мг/мл;

Y — высота полуволны стандартного раствора, мм;

К вЂ” коэффициент пересчета для крови из мкг/ jp в MKM/л равен 0,4826х20;

К вЂ” коэффициент пересчета для мочи из мкг/fl в мкм/л равен 0,04826х2, Расчет содержания других тяжелых металлов в биосредах (цинка, меди, кадмия) проводят аналогично по системе СИ для этих металлов.

Способ поясняется следующими примерами.

Пример i. Рабочий машиностроительного завода, 27 лет. Диагноз: практически здоров, К 5,0 мл крови последовательно добавляют по 0,35 мл азотной и серной кислот, перемешивают, затем проводят минерализацию пробы в муфельной печи, в последующем растворяют пробу в фоновом растворе А с добавлением аскорбиновой кислоты, полярографируют пробу и стандарты чистых металлов (свинца, цинка, меди), вычисляют по формуле количество тяжелых металлов, 50

Результаты анализа представлены в табл.1, Пример 2, Рабочий Р„возраст 49 лет, стаж работы 22 года, агломератчик. Диагноз: отдельные симптомы воздействия свинца, Диагноз поставлен при профилактическом клиническом осмотре в Усть-Каменогорском отделе гигиены и профпатологии

НИИ краевой патологии МЗ КаэССР. К 5,0 мл крови больного добавляют 0,35 мл азотной кислоты, перемешивают, добавляют

0,35 мл серной кислоты, проводят озоление пробы в муфельной печи растворением в фоновом растворе А, состоящем из хлористого натрия, соляно-кислого гидразина в соотношении 30:1, который затем растворяют в 10,0 мл концентрированного раствора азотной кислоты с последующим доведением объема раствора до 1000 мл. Полярографируют пробу и стандарты. В качестве стандартов используют чистые металлы: свинец, цинк, медь. Вычисляют количество свинца, меди, цинка в пробе по формуле.

Результаты анализа представлены в табл.2, Проведены исследования проб крови по предлагаемому способу и по способу-прототипу, Исследованы пробы крови 15 чел на содержание свинца (другие элементы не были исследованы, так как отсутствует полярографическая методика для определения содержания в биосредах цинка и меди, кадмия и др. по методу прототипа). Предлагаемый способ позволяет повысить точность и предел определения веществ (на примере свинца) — 0,002 мкмоль в пробе (по прототипу 0,004 мкмоль в пробе). Систематическая ошибка по методу прототипа 1,4, по предлагаемому способу при расчете критерия

Стьюдента 2.086; случайная ошибка по прототипу +4,6, а по предлагаемому способу

1,8-3,2, Способ позволяет наряду со свинцом определять в одной пробе цинк и медь.

Формула изобретения

Способ определения тяжелых металлов в биологических жидкостях, включающий минерализацию проб, полярографический анализ и расчет с использованием стандарта, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и увеличения числа определяемых металлов, минералиэацию проводят последовательно концентрированной серной и соляной кислотами, определение ведут в растворе 48 мМ солянокислого гидразина, содержащем хлористый натрий и соляную кислоту. а в качестве стандартов используют чистые тяжелые металлы.

1702322

Таблица 1

Таблица 2

Составитель Н.Гуляева

Редактор А.Маковская Техред М.Моргентал Корректор Q,Kóíäðèê

Заказ 4541 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101