Среда для разбавления и криоконсервации семени сельскохозяйственных животных

 

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных , преимущественно баранов. Цель изобретения - повышение биологической полноценности сперматозоидов. Среда содержит сахар 9,9-10,1 г. комплексную соль ЭДТА 0,69-0.71 г, желток куриного яйца 5,0- 7,0 мл, хлорофилл 0,0003-0.0005 г, воду до 100 мл. Среда повышает выживаемость при 37°Сдо 10,0-0,72 ч, сохранность акросом до 70,0-3% и абсолютный показатель живучести до 3,1-0,20. 8 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 А 61 О 19/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4467011/15 (22) 22,06,88 (46) 23.01,92. Бюл. М 3 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт животноводства и Институт биохимии им. А,Н. Баха (72) В,К. Милованов, А.Ф. Лизунков, Л.И, Парамонова и А.А. Дмитровский (53) 636.081.453.5(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 852324, кл, А 61 О 7/02, 1981.

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, Известна среда для замораживания и хранения спермы баранов, содержащая дистиллированную воду 100 мл, сахарозу 10 г, желток куриного яйца 20 мл, глицерин 4 мл, двунатриевую соль этилендиаминтетрауксуснои кислоты (хелатон-3, трилон Б) 0,08 г, фосфорнокислый однозамещенный калий

0,10 г, альфа-токоферол-ацетат, 10 (,-ный масляный раствор витамина Е 2 мл, левомицетин 25 — 50 тыс.ЕД., полимиксин 25 — 50 тыс. ЕД.

Известна сложная многокомпонентная среда для разбавления и замораживания спермы животных, содержащая дистиллированную воду 100 мл, лактоэу 14,5 г, гуммиарабик (порошок) 6 г, трис(оксиметил)аминометан 0,6 r, лимонную кислоту по ГОСТу 0,27 г, желток диетического куриного

SU, 1706608 А1 (54) СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И КРИОКОНСЕРВАЦИИ СЕМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ (57) Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, преимущественно баранов. Цель изобретения — повышение биологической полноценности сперматозоидов. Среда содержит сахар 9,9-10,1 г, комплексную соль

ЭДТА 0,69-0,71 г, желток куриного яйца 5,07,0 мл, хлорофилл 0,0003-0,0005 г, воду до

100 мл. Среда повышает выживаемость при

37 С до 10,0-0,72 ч, сохранность акросом до

70,0-3 и абсолютный показатель живучести до 3,1-0,20. 8 табл. яйца 20 мл, глицерин 17 мл, спермосан-ППК

25-100 тыс. ЕД.

Однако указанные среды недостаточно эффективны, содержат в своем составе большое количество желтка куриного яйца, что приводит к накоплению вредных перекисей в семени, затрудняет микроскопическую оценку состояния акросом сперматозоидов, не улучшая их сохранности, и связано с потреблением большого количества ценного продукта питания людей — куриных яиц. Кроме того, они содержат избыточное количество трехатомного спирта-глицерина, оказывающего токсическое действие на сперматозоиды в период выдержки перед замораживанием и период оттаивания семени.

Наиболее близкой по технической сущности и достигаемому результату является среда, содержащая сахарозу в количестве

9,0 — 10.0 г, 2,4-ди-трет-бутил-1.4-крезол

0,015-0,050 г, кальциевый комплекс динат1706608 риевой соли ЭДТА 0,8-0,9 r, глицерин 4,06,0 мл, желток куриного яйца 3,0-5,0 мл, дистиллированную воду до 100 мл.

Однако зта среда не способна защитить сперматозоиды в процессе подготовки к замораживанию и во время оттаивания от перекисного окисления их мембран, что снижает биологическую полноценность сперматозоидов.

Целью изобретения является повышение биологической полноценности сперматозоидов.

Среда для разбавления и криоконсервации спермы сельскохозяйственных животных, включающая сахар, комплексную соль зтилендиаминтетрауксусной кислоты, желток куриного яйца, глицерин и воду, дополнительно содержит ксантофилл и хлорофилл при следующем соотношении ингредиентов;

Сахар, г 9,9-10,1

Комплексная соль этилендиамин тетрауксусной кислоты, r 0,69 — 0,71

Желток куриного яйца, мл

Глицерин,мл

Ксантофилл, r

Хлорофилл,г

Дистиллированная вода, мл До 100

Выделение и очистку ксантофилла и хлорофилла проводят по методике ТМ.

Godwln (Chemistry and biochemistry of plant

pigments. — London N.Y.: Academic press, 1965).

Пример 1, Оттаянное семя разбавляли в три раза средой, содержащей ингредиент и дистиллированную воду, доведенную до 100 мл.

Результаты подбора оптимального соотношения ингредиентов среды представлены в табл.1-6.

5,0-7,0 .

1,9 — 2,1

0,0001-0,0005

0,0003-0,0005

Оптимальное содержание желтка куриного яйца в среде составляет 5 0-7,0 мл.

Оптимальное содержание глицерина в среде составляет 1,9-2,1 мл.

Оптимальное содержание ЭДТА в среде составляет 0,69 — 0,71 г.

Оптимальное содержание ксантофила в среде составляет 0,0001 — 0.0005 г.

Оптимальное содержание хлорофилла в среде составляет 0,0003 — 0,0005 г.

Оптимальное содержание сахара в среде составляет 9,9-10,1 r.

Пример 2. Сравнивают качество

5 оттаянного семени, разбавленного предлагаемой и известной средами.

Результаты представлены в табл.2.

Формула изобретения

Среда для разбавления и криоконсервации семени сельскохозяйственных животных, включающая сахар, комплексную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, жел40 ток куриного яйца, глицерин и воду, о т л ич а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения биологической полноценности сперматозоидов, среда дополнительно содержит ксантофилл и хлорофилл при следующем со45 отношении ингредиентов:

Сахар, г 9,9-10,1

Комплексная соль этилендиамин тетрауксусной

50 кислоты, г 0,69-0,71

Желток куриного яйца, мл

Глицерин, мл

Ксантофилл, г

55 Хлорофилл, г

Дистиллированная вода, мл

5-7

1,9-2,1

0,0001-0,0005

0.0003-0,0005

Предлагаемая среда улучшает биологи10 ческую полноценность оттаянного семени.

Пример 3. В совхозе на двух группах овец кавказской породы в возрасте двух лет средней упитанности изучали влияние предлагаемой среды по сравнению с иэве15 стной на выходягнят в расчете на 100овцематок. Осеменение овец проведено в период 1-15 августа 1987 г. Овец осеменяли утром в 7 ч и вечером в 17 ч в групповом станке. Испольэовали оттаиватель конст20 рукции И.И. Соколовской, влагалищный расширитель и шприц-катетер конструкции

Ю.Н. Трофимова. Доза осеменения за один прием 0,2 мл с концентрацией 60-80 млн. сперматозоидов.

25 Результаты опыта представлены в табл.8.

Среда с добавлением ксантофилла и хлорофилла способствует повышению доли объягнившихся овец от числа осемененных

30 на 17,1 и увеличению выхода ягнят в расчете на 100 осемененных овцематок на 19,2 головы.

1706608

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Таблиц а 4

Таблица 5

Таблица 6

1706608

Таблица 7

АПП

С э

Таблица 8

* р < 0,05.

Составитель А.Павлов

Техред M.Ìîðãåíòâë Корректор И.Муска

Редактор И.Шулла

Заказ 219 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35, Рауаская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Предлагаемая

Известная

3,1

10,0