Способ определения метакриловой кислоты в биологическом материале

 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам количественного определения метакриловой кислоты в тканях животных при проведении токсикологических исследований. Целью изобретения являетсяповышение точности определения метакриловой кислоты в тканях животных и сокращение продолжительности анализа. Поставленная цель достигается тем, что метакриловую кислоту в тканях животных определяют путем газохроматографического анализа, причем предварительно навеску ткани гомогенизируют в присутствии 0.1 N~ раствора серной кислоты в соотношении 1:1, после чего осуществляют ввод пробы в газовый хроматограф посредством металлической трубки, состоящей из двух частей, одна из которых служит для ввода пробы, а другая постоянно находится в испарителе. Изобретение может быть использовано для количественного определения метакриловой кислоты в тканях животных при проведе,нии токсикологического эксперимента. 2 ил.;2 табл.С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (Я)5 601 N 33/49

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4770949/14 (22) 31.10.89 (46) 15.02.92, Бюл. N. 6 (71) Нижегородский научно-исследовательский институт гигиены труда и профзаболеваний (72) Л. В. Кузнецова и Ю, П. Тихомиров (53) 615.475(088.8) (56) Дмитриев М. Г. и др. Гигиена и санитария, М 12, f986, с. 44. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТАКРИЛОВОЙ КИСЛОТЫ В БИОЛОГИЧЕСКОМ

МАТЕРИАЛ Е (57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам количественного опре деления метакриловой кислоты в тканях животных при проведении токсикологических исследований, Целью изобретения является

Изобретение относится к медицине, а: именно к способам количественного определения метакриловой кислоты в тканях животных при проведении токсикологических исследований, Целью изобретения является повышение точности определения метакриловой кислоты в тканях животных и сокращение, продолжительности анализа.

Способ осуществляется следующим образом. Навеска анализируемой ткани, например, печени, легкого, мышечной ткани, ° гомогенизируется в присутствии 0,1N раствора серной кислоты в соотношении 1:1.

Такое соотношение пробы и раствора является оптимальным, так как при меньшем соотношении консистенция пробы является

„„ 4 „„1712874 А1

1 повышение точности определения метакриловой кислоты в тканях животных и сокращение продолжительности анализа.

Поставленная цель достигается тем, что метакриловую кислоту в тканях животных определяют путем газохраматографического анализа, причем предварительно навеску ткани гомогенизируют в присутствии 0,1й раствора серной кислоты в соотношении

1:1, после чего осуществляют ввод пробы в газовый хроматограф посредством металлической трубки, состоящей из двух частей, одна из которых служит для ввода пробы, а другая постоянно находится в испарителе.

Изобретение может быть использовано для количественного определения метакриловой кислоты в тканях животных при проведении токсикологического эксперимента. 2 . ил.,2 табл. недостаточно подвижной и неудобной для дальнейшего анализа, при большем соотношении - увеличение чувствительности метода необходимо из-за увеличения разведения, что также является нежелательным. После гомогенизации проба вводится . в газовый хроматограф при помощи устройства, состоящего из двух частей.

На фиг. 1 представлена нижняя часть устройства — пята; на фиг, 2 — трубка.

Пята имеет конусное отверстие 1, в которое вставляется трубка, заканчивающаяся корпусом 2. В верхней части трубка имеет небольшое отверстие 3 для ввода газа-носителя. Пята находится в испарителе-постоянно, а трубка с пробой анализируемой ткани вставляется в пяту во время анализа. Длина

1712874

20

35 трубки с пятой в собранном виде равна длине испарителя хроматографа. Обе части во время анализа соединчются герметично, В трубку помещают кусочек стекловолокна или обычной ваты, затем трубка прокаливается до выхода нулевой линии и взвешивается беэ навески и с навеской гомогената.

По разности масс устанавливается точный вес анализируемой пробы ткани. Трубка вводится в испаритель хроматографа, где происходит термодесорбция летучих органических веществ, содержащихся в пробе, в том числе и метакриловой кислоты.

Количественное определение проводится методом абсолютной градуировки прибора по водным растворам метакриловой кислоты в пределах 0,01 — 1,00 мкг в 10 мл раствора, Чувствительность метода при навеске анализируемой ткани 10 мг — 0,001 мг/г. Расчет содержания МАК проводится по формуле

С =,мг/кг

2 где С вЂ” концентрация МАК;

g — количество МАК, найденное по графику, мкг;

m — навеска образца, введенного в испаритель, мг;

2 — коэффициент, учитывающий степень разведения при гомогенизации, Сущность изобретения заключается в совокупности последовательных операций путем использования реактивов в определенном соотношении и конкретного приспособления. Все перечисленные признаки существенны: именно использование металлической трубки, состоящей иэ двух частей, дает возможность после минимальной обработки пробы ткани (гомогенизация в присутствии 0,1И серной кислоты) вводить ее в газовый хроматограф, что повышает точность анализа и значительно сокращает

его продолжительность.

Пример 1. Иавеску печени контрольной крысы 1,6 г гомогенизировали в присутствии 1,6 мл 0,1Nсерной кислоты,,затем в гомогенат вводили 160-.мкг метакриловой кислоты в аиде водного раствора, концентрация кислоты в ткани 0,05 мкгlмг. Определение метакриловой кислоты в гомогенате проводилось по предлагаемому способу, Проанализированы навески гомогената

10,5 мг, 11,4 мг и 13,0 мг — найдено соответственно 0,47 мкг, 0,52 мкг и 0,65 мкг кислоты, Таким образом обнаружено 93,57; от введенного количества кислоты.

Пример 2. B ходе эксперимента крысы подвергались воздействию метилметакрилата, который подавался в эатравочные камеры непрерывно в течение 5 ч в концентрациях 360-450 мг/м, При попадании в организм метилметакрилат разлагается на метанол и метакриловую кислоту.

После затравки одна из крыс забивалась и в ее печени. определялось содержание метакриловой кислоты по укаэанному способу. С этой целью 2,4 г печени гомогенизируют с

2,4 мл 0,1N серной кислоты, вводят пробу в газовый хроматограф при помощи описанного устройства и проводят десорбцию в испарителе хроматографа, Условия анализа: Прибор — хроматограф Цвет-100 с пламенно-ионизационным детектором, колонка стеклянная 1 м; заполнена насадкой 10 ПЗГА на целите, Тисп. 200О, T on.=

120, Чг-н=35 мл/мин, %-12= 40 мл/мин, Чвозд=400 мл/мин, Дляпредотвращения адсорбции МАК в поток газа-носителя вводйли пары муравьиной кислоты. Время удерживания МАК 3 мин. По градуировочному графику найдено, что в пробе содержится 0,022 мкг MAK следовательно, содержание MAK в печени 0,0046 мг/г.

Параллельно проводят определение метакриловой кислоты в печени по прототипу:

2,4 г печени растирают, заливают 10 мл серного эфира, выдерживают 20 мин, перемешивая, операцию .повторяют трижды, Серный эфир отделяют от печени фильтрованием, экстракты объединяют, выпаривают эфир. к сухому остатку добавляют 0„5 мл дистиллированной воды и анализируют 10 мкл полученного раствора в тех же условиях, при этом метакриловая кислота была определена лишь качественно.

Таким образом, преимущества предлагаемого изобретения заключаются в том, что данный способ позволяет определять количественное содержание MMA в тканях животных, что является более точным методом. Использование данного способа сокращает время исследований.

Сравнение проводили в моделируемых условиях. В извлеченную печень контрольной крысы вводили метакриловую кислоту в количестве 5 мкг/мг. Далее проводили определение по заявляемому способу и прототипу. Результаты анализов представлены в табл. 1.

Из представленных результатов видно, что точность заявляемого способа намного выше точности способа, взятого в качестве прототипа. Время выполнения одного анализа в заявляемом способе, включая время обработки пробы, 15 мин. Время выполнения одного анализа по способу, взятому з качестве прототипа. более 1 ч.

Формула изобретения

Способ определения метакриловой кислоты в биологическом материале путем хро1712874

Таблица 1

Таблица 2

Ч вствительность, мг/г

Точность, Соотношение вес ткани.вес 0,1

4,4

15,0

0,001

0,002

0,003

1:1

1:2

1:3

euaf

Составитель В;Митюшин

Техред М.Моргентал Корректор Н.Король

Редактор В.Трубченко

Заказ 533 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб;; 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 матографического анализа, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа за счет исключения предварительной обработки пробы, пробу гомогенизируют в присутствии 5

0,1N раствора серной кислоты в соотношении 1:1, а ввод пробы в газовый хроматограф осуществляют с помощью разъемного устройства, состоящего из 2 металлических трубок, одна из которых постоянно находится в испарителе хроматографа, а другая служит для ввода пробы.