Посевная питательная среда для получения аминогликозидного антибиотического комплекса

 

Использование: микробиологическая и медицинская промышленность, способ получения аминогликозидного антибиотического комплекса. Сущность изобретения: посевная питательная среда для получения аминогликозидного антибиотического комплекса с помощью продуцента Streptomyces cremeus subsp. nebramycini, содержащая источники углерода, азота, фосфора и соли. Применение посевной среды позволяет увеличить активность культуральной жидкости на 20% за счет использования соевой муки и глюкозы вместо дорогостоящего глицерина и кукурузного экстракта. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э С 12 P 19/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ (/)

С:

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4731518/13 (22) 16.08.89 (46) 23.05.92. Бюл, hL 19 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биотехнологии (72) Г.Н.Вострокнутова, В.Н.Ковалев, Л.П.Жиганова, Г.М.Симонова, Н.А.Саитова и О.А.Белоусова (53) 615.475(088.8) (56) Лабораторный регламент на производство тобрамицина сульфата. — М,: ВНИИантибиотиков, 1983, (54) ПОСЕВНАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА

ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОГЛИКОЗИДНОГО АНТИБИОТИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА

Изобретение относится к микробиологической и медицинской промышленности, в частности к способу получения аминогликозидного антибиотического комплекса, состоящего из карбамоилтобрамицина (тобрамицин — медицинский препарат, представляет интерес в химиотерапии инфекций, обусловленных грамотрицательными бактериями, в том числе Ps. aeruginosa), карбамоилканамицина и апрамицина (применяется в ветеринарии йри лечении желудочно-кишечных заболеваний крупного рогатого скота и свиней).

Известны различные посевные питательные среды для получения аминогликозидного антибиотического комплекса, содержащего тобрамицин и апрамицин.

Наиболее близким к изобретению является процесс, согласно которому вегетативный посевной материал культуры

Streptomyces cremeus subsp. nebramycini выращивают на посевной среде следующего состава, мас.%: кукурузный экстракт 2,0; глицерин 2,0; хлористый аммоний 0,2; хло,... Ж,, 1735367 Al (57) Использование: микробиологическая и медицинская промышленность, способ получения аминогликозидного антибиотического комплекса. Сущность изобретения: посевная питательная среда для получения аминогликозидного антибиотического ком плекса с помощью и родуцента

Streptomyces cremeus subsp. nebramycini, содержащая источники углерода, азота, фосфора и соли. Применение посевной среды позволяет увеличить активность культуральной жидкости на 20% за счет использования соевой муки и глюкозы вместо дорогостоящего глицерина и кукурузного экстракта. 1 табл. ристый натрий 0,3; мел 0,5; животный жир

0,75; водопроводная вода остальное.

Недостатком прототипа является низкая антибиотическая активность культуральной жидкости в конце ферментации.

Целью изобретения является увеличение антибиотической активности культуральной жидкости.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве источников углерода, азота и фосфора используют соевую муку и глюкозу при следующих количественных соотношениях компонентов, мас.%:

Соевая мука 2,4 — 2,6

Глюкоза 0,9 — 1,1

Мел 0,4 — 0,6

Животный жир 0,65 — 0,85

Вода Остальное.

Соевая мука является источником углерода, азота, фосфора, микроэлементов.

Глюкоза является легкоутилизирующимся источником углерода, Использование этих двух КОМпоНВНТОЕ в заданных пределах Iloзволяет получить в посевной среде опти1735367

0,9 — 1,1

0,4 — 0,6

0 65 — 085

Остальное

55 мальное соотношение углерод:азот, что мел 0,5; животный жир 0,75; водопроводная приводит к увеличению антибиотической вода остальное; рН среды до стерилизации активности культуральной жидкости. При- 6,2+ .1,0. менение этих двух компонентов в заданных При приготовлении этой среды контросоотношениях позволяет исключить из со- 5 лируют концентрацию фосфора в среде, костава среды дефицитный дорогостоящий торая должна быть в пределах 18-20 мг /„в глице ин и кукурузный экстракт, который противномслучаедобавляютфосфат калия. не является стандартным сырьем. Посевной материал используют на стаПример 1 (по известному способу). В дии ферментации по схеме примера 1. Сумкач естве объекта исследования используют 10 марная антибиотическая активность культуру Streptomyces cremeus subsp. культуральной жидкости составляе д

nebramycini (штаммы 2242, 9871). Вегета- штаммов 9871 и 2242 3340 мкг/мл и тивный инокулят выращивают при 37+1 С в 1680 мкг/мл соответственно.

Пример 3-9, Биосинтез аминогликооборотов 240 об/мин и в посевном аппара- 15 зидного антибиотического комплекса проте вместимостью 7 л (коэффициент запол- водят по примеру 2.

0 7) с числом оборотов мешалки Концентрации ингредиентов посевной нения, ) с чи л м сти к ль150 об/мин на среде следующего состава, среды и антибиотические активнос у мас.7,: глицерин 2,0; кукурузный экстракт туральных жидкостей представлены в таб2,0; животный жир 0,75; хлористый аммоний 20 лице, 0,2; хлористый натрий 0,3; водопроводная Концентрации мела и жира в пределах вода остальное; рН среды до стерилизации 0,4-0,6 и 0,65-0Я5

0 65-0 "5;,4 -соответственно, 7,4 1,0, 4+1,0, устанавливаемые исходя из их оптимальноПосевной материал используют при го действия на стабилизацию рН и пеногапроведении ферментаций в аппаратах вме- 25 шение культуральной жидкости, не стимостью 30 л (коэффициент заполнения оказывают заметного влияния на актив0,5) и в колбах(Чт о 100 мл среды) на качалке ность культуральной жидкости, с числом оборотов 240 об/мин, добавляя его Из приведенной таблицы следует, что в количестве 2 от объема культуральной оптимальными являются концентрации мужидкости. Ферментации проводят при 37 - 30 ки соевой и глюкозы 2,4-2,6 и 0,9-, мас. /

"-1 С на егламентной ферметационной соответственно. При этих значениях ингресреде следующего состава, м его состава, мас.7;: мука со- . диентов активность культуральной жидкоевая 3,5; глюкоза 1,5, животный жир 1,5; сти возрастает на 20, что приводит к хлористый аммонии,; р

0 6 сернокислый маг- увеличению выхода антибиотического комний 1,1; мел 0,7; водопроводная вода ос- 35 плекса и соответственно к снижению его тальное, рН среды 6,2 0,1, Количество себестоимости. подаваемого воздуха 1 об./1 об, среды в Ф о р м ул а и за б ре те н и я

1 мин, абота мешалки непрерывная, Посевная питательная среда для пол150 об/мин. Продолжительность фермента- учения аминогликозидного антибиотиче40 ского комплекса с помощью продуцента ции 72 ч.

Антибиотическую активность культу- Streptomyces cremeus subsp. nebramycini, содерральной жидкости определяют методом жащая источники углерода, азота, фосфора, диффузии в агар с использованием тест- мел, жир животный и воду, о т л и ч а ю щ акультуры aci us su i i шт

B П ЬтТs штамм 6633 и вы- я с я тем, что, с целью увеличения антибиоражают в единицах на а 1 мл, Суммарная 45 тической активности культуральной жидкоантибиотическая активность культуральной сти, в качестве источников углерода, азота и жидкости 2800 мкг/мл для штамма 9871 и фосфора используют соевую муку и глюкозу ш эмма 2242, 1400 мкгlмл для штамма при следующих количественных соотношениях компонентов, мас. :

П -р и м е р 2. Вегетативный инокулят 50 Соевая мука 2 4 — 2,6 продуцента Streptomyces cremeus subsp.

nebramycini (штаммы 2242, 9871) выращивают по примеру 1 на среде следующего со- Жир животный става, мас. : соевая мука 2,5; глюкоза 1,0; Вода

1735367

15

25

35

Составитель Г. Вострокнутова

Техред M,Ìîðãåíòàë Корректор Т. Малец

Редактор Н. Гунько

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 1793 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35, Раушская наб.; 4/5