Способ диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда

 

Использование: способ диагностики пейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике заболеваний. Цель изобретения: повышение точности ранней диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда, особенно ее ранних, донозологических форм. Сущность: указанная цель достигается путем смешивания суспензии лейкоцитов пациента с равными объемами 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных дофамином. Смесь инкубируют в течение 10-15 мин при -К37,0-+37,50С, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза. Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более эритроцитов барана (РОК). При увеличении количества РОК, специфичных дофамину по сравнению с нормой (7,8± 0,8%), диагностируют нейроинтоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4841762/14 (22) 22.06.90 (46) 15,12.92. Бюл. N. 46 (71) Пермский государственный медицин-. ский институт (72) В.В.Юшков, Т.А,Юшкова и Н,С.Сединина (56) Седина Н.С. Vl Всероссийский съезд психиатров. Тез. докл. Томск, 1990, с. 169. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НЕЙРОИ1IТОКСИКАЦИИ ВЫСШИМИ АЛИФАТИЧЕСКИМИ АМИНАМИ ЖИРНОГО РЯДА (57) Использование: способ диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного.ряда относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике заболеваний. Цель изобретения; повышение точности ранней диагностики нейроинтоксикации высшими алифатичеИзобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний и может быть использовано для постановки диагноза нейроинтоксикации. Диагностика нервно-психических нарушений, связанных с нейроинтоксикацией, вызываемой высшими алифатическими аминами жирного ряда (ВААЖР), затруднена не только из-за длительного латентного периода, поздних клинических проявлений, но и из-за отсутствия лабораторной диагнсстики, подтверждающей специфическое поражение центральной нервной системы, Цель изобретения — ранняя лабораторная диагностика нейроинтоксикации ВААЖР на этапах отсутствия клинической симптоматики.

„„ Ц„„1781607 А1 (ss)s G 01 N ЗЗ/53 скими аминами жирного ряда, особенно ее ранних, донозологических форм. Сущность: указанная цель достигается путем смешивания суспензии лейкоцитов пациента-с равными обьемами 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных дофамином. Смесь инкубируют в течение 10-15 мин при +37,0-+37,5 С, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза. Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более зритроцитов барана (POK). При увеличении количества РОК, специфичных дофамину по сравнению с кормой (7,8+ 0,8%), диагностируют нейроинтоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.

Способ осуществляют следующим обра: зом.

Забирают 0,1-0,2 мл крови пациента в

0,1-0,2 мл 5% раствора цитрата натрия для предупреждения свертывания крови, После (р тщательного встряхивания пробирки в нее добавляют для лизирования эритроцитов

0,8 мл дис1иллированной воды на 30 секунд, а потом доливают до 9-10 мл среды 199 для восстановления рН=70. Пробирки центрифугируют 5-10 мин при 1500 пй/мин, после ) И чего надосадочную жидкость сливают, а осадок лейкоцитов ресуспендируют в 0,1-0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия или среды 199. К полученной взвеси добавляют 0,1-0.2 мл 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных дофамином, смесь инкубируют 10-15 мин при температуре +37,0-+37,50Е, после чего

3 1781607 4 центрифугируют при 1500 об/мин, 5-10 мин.

Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, осадок ресуспендируют в капле любой интактной сыворотки (бычьей, лошадиной, человеческой). Из полученной суспенэии клеток делают мазок, фиксируют в метиловом спирте или этиловом спирте, высушивают. окрашивают по Романовскому — Гимза.

Под микроскопом рассматривают 100 лимфоцитов, Отмечая среди них число () клеток, фиксировавших на себе три более эритроцитов (POK). Зная содержание в крови больного лейкоцитов, высчитывают абсолютное содержание РОК в 1 мл крови.

Обработку эритроцитов барана в глютаровом альдегиде производят следующим образом: соединяют 1 мл 5 взвеси тщательно отмытых нативных эритроцитов барана с 0,25 раствором глютарового альдегида в соотношении 1:1, Смесь выдер>кивают при температуре +37,0 С в течение 15 минут, после чего эритроциты дважды отмывают от альдегида забуференным изотоническим раствором хлорида натрия рН=7,2 и доводят до первоначального объема этим же раствором (5/ взвесь). Для сенсибилизации эритроцитов готовят раствор дофамина с концентрацией 6;1.мг/кг на забуференном физиологическом растворе рН=6,4 ° 1 мл 5 взвеси глютаризированных эритроцитов центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют, а к осадку эритроцитов приливают 1 мл раствора дофамина, Смесь тщательно встряхивают и выдерживают при комнатной температуре 25-30 мин, после чего лимфоциты дважды отмывают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 минут изотоническим раствором хлорида натрия и им же доводят до 0,5 взвеси. Показателем нормы является обнаружение числа РОК, специфических дофамину, равное 7,8+0,2.

Пример 1. Больная В.Н,В„26 лет, аппаратчица, До контакта с ВААЖР была здоровой, из перенесенных заболеваний отмечает детские инфекции, ОРЗ. В контакте с аминами работает 8 лет, Первые полгода плохо переносила запах аминов. Года через 4-5 работы с аминами после ночных смен стала беспокоить головная боль давящего характера, повышенная усталость и концу смены, стала раздра>кительной, эф фективно неустойчивой, периодически нарушался сон. Данные проявления исчезали после отдыха, за медицинской помощью не обращалась. В последующем стала плохо переносить шум, громкие звуки, чаще дает эффективные реакции, ближе стали слезы, Психическое состояние. Все виды ориентировки сохранены, охотно дает о себе работать в прежних условиях. Состояние постепенно ухудшалось, нарастали психиче50 ские нарушения по органическому типу.

Стала медлительной в делах, мыслях, нарастали эффективные расстройства, стала конфликтной, несостоятельной в решении каких-либо проблем, снизилась память, по55 стоянно испытывает чувство усталости, не переносит фиэиогенных раздражителей. В

1987 r. находилась на лечении в психиатрической клинике. Предьявляла жалобы на нарушение сна, быструю утомляемость, непереносимость жары, шума, громких зву5

45 сведения, отмечает гиперестезию к шуму, звукам, запахам. Периодически испытывает неприятные ощущения в пальцах рук. Внимание устойчивое, сни>кен объем произвольного внимания, мнестическая деятельность без особенностей. Мышление логичное, ипохондрична, озабочена изменившимся самочувствием, настроение ровное, но легко плачет. Понимает и хорошо оценивает свое состояние. Имеет установку продол>кать работу в прежних условиях.

В соматическом состоянии заболеваний не выявлено, В неврологическом статусе усилены вегетативные реакции — периодические нарушения сна, головные боли, гипергидроз, стойкий красный дермографизм.

У больной взяли 0,1 мл крови и добавили

0,1 мл 0,5 взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных дофамином, инкубировали 10 минут при температуре +37,0 С. При подсчете в мазке обнаружено увеличение экспрессии дофаминовых рецепторов, о чем свидетельствует высокое число РОК, равное 80/, тогда как в норме оно не превышает 7,8й 0,8 .

Диагноз: начальные проявления интоксикации ВААЖР, донозологический этап.

Пример 2, Больная К.А.С. 48 лет, аппаратчица сушильного отделения ф

СКПРУ М t. Находится под наблюдением с

1976 г. Из анамнеза: до начала контакта с

ВААЖР в 1961 r, была практически здорова, Через 2-3 года работы на химфабрике стала отмечать периодические головные боли, усталость после смены, Этим проявлениям значения не придавала,они исчезали после отдыха, Постепенно состояние ухудшилось: стала эмоционально лабильной, эффективно неустойчивой, головная боль носила постоянный характер, нарушился сон, испытывала неприятные ощущения в дистальных отделах конечностей. Сформировался стойкий неврозоподобный церебрастенический синдром. Через 14 лет работы в контакте с ВААЖР подтвержден диагноз профинтоксикации, но продолжала

1781607

Формула изобретения

Способ диагностики нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда путем исследования организма, отличающийся тем, что, с целью раннего выявления интоксикации, исследуют дофаминовые рецепторы на лимфацитах в реакции розеткообразования с эритроцитами барана, нагруженных дофамином, и при наличии ро""эток диагностируют нейроинтоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.

Составитель Г,Крюкова

Редактор, В.Трубченко Техред М.Моргентал Корректор О.Густи

Заказ 4271 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ков, смены погоды, снижение памяти, медлительность в делах, мыслительной деятельности, ухудшение сообразительности, быструю смену настроения, В отделении говорит и ходит медленно. Отмечается гиле- 5 рестеэия к физиогенным раздра>кителям, гипопатия к вкусовым ощущениям, неприятные ощущения в области сердца, дистальных отделах конечностей. Память снижена на текущие события. Мышление замедлен- 10 но по темпу, Эмоционально неустойчива, дает эффективные реакции по пустякам,. конфликтует с больными, медперсоналом, не терпит возражений, не умеет ждать. Бывает мрачной, раздражительной. Очень бы- 15 стро устает, При патопсихологическом обследовании выявляется медленный темп деятельности, истощаемость, малый объем производительного внимания, ослабление 20 оперативной памяти.

В неврологическом состоянии выявляется сон с трудным засыпанием, частыми просыпаниями, постоянная давящая головная боль. Лицо гипомимично, сухожильные 25 рефлексы оживлены, брюшные отсутствуют, тремор пальцев вытянутых рук. Выраженный стойкий красный дермографизм, гипергидроз. На ЭЭà — умеренные десинхронно-диффузные изменения. На глазном 30 дне несколько сужены артерии сетчатки. На краниограмме — парасагитально единичные пахионовы ямки, пальцевые вдавления не усилены.

Со стороны внутренних органов — уме- 35 ренное увеличение сердца с поперечнике, приглушенность тонов, болезненность в правом подреберье и по ходу кишечника, АД с наклонностью к повышению, лабильность пульса, 40

Анализ данного наблюдения дает возможность проследить поэтапное формирование хронической профессиональной интоксикации. Доноэологические проявления возникли через 2-3 года работы с ами- 45 нами и были представлены периодическими астеническими и вегетативными дисфункциями. Постепенно состояние ухудшается, Через 8-10 лет работы в контакте с ВААЖР формируется стойкий неврозоподобный астенический синдром с эмоциональными и вегетативными нарушениями. Постепенно клинические проявления усложняются, в структуре астенического синдрома нарастает интеллектуально-мнестическое снижение по органическому типу с астенизацией и эксплозивностью.

Способ в данном случае осуществляли в различных условиях: результаты предлагаемого метода с использованием 0,1 или 0,2 мл крови и 0,1 или 0,2 мл 0,5 взвеси эритроцитов барана, нагруженных дофамимом, инкубацией в течение 10 или 15 минут при температуре+37,0 С или 37,5 С.

Диагноз: хроническая профессиональная нейроинтоксикация ВААЖР, токсическая энцефалопатия, психоорганический синдром, эстена-эксплазивный вариант, Преимущества способа заключаются в высокой специфичности и чувствительности, использовании малого количества крови (0,1-0,2 мл) обследуемых, простоте технического исполнения, высокой воспроизводимости, в необходимости минимальных количеств, причем вполне доступных реактивов, несложного оборудования, возможности обучения среднего медицинского персонала, что позволяет использовать дан-ный способ в клинике, массовых профилактических осмотрах. Способ позволяет диагностировать раннее, начальные доклинические стадии нейроинтоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда.