Способ моделирования процессов развития коры больших полушарий

 

Изобретение относится | экспериментальной медицине. Способ позволяет получить ускоренное развитие теменной коры у новорожденных крысят. Для этого на 7-14 сутки беременности животных - матерей вводят дезоксикартИкостерон-ацетат внутримышечно в дозе 2,0-0,8 мкг/100 г массы тела.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

8ЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) (я)5 G 09 В 23/28

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 (21) 4873942/14 (22) 03.09.90 (46) 23,12.92. Бюл. N. 47 (71) Университет дружбы народов им. Патриса Лумумбы (72) И.Г.Павлова . (56) Авторское свидетельство СССР

М 1422238, кл. G 09 В 23/28, 1986.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной гистологии для изучения закономерностей раэвитйя (процессов клеточной пролиферации и дифференцировки) различных органов и систем, в частности головного мозга. Оно может быть использовано также в эксперйментальной эндокринологии, фармакологии и других областях медицины.

Известно, что введение минералокорти коидов в дозах 0,02-0,8 мкг/100 г массы интактным животным вызывает у них отклоненйя or нормы показателей мочи и крови,.аналогичные изменениям, возникающим у человека при первичном альдостеронизме (синдроме Конна) Розен В.Б., Основы эндокринологии, M., Высшая школа. 1984).

Способ моделирования ускоренного развития коры больших полушарий мозга в литературе нами не найден.

Прототипом может служить способ моделирования нарушений развития коры больших полушарий у плода путем введения беременным живот ным биологически активных веществ, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, на 14-й день беременности однократно вводят продигиоэан (см, авт, св. N 1422238). Однако в

„,5LI „„1783571 А1 (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПРОЦЕССОВ РАЗВИТИЯ КОРЫ БОЛЬШИХ ПОЛУШАРИЙ (57) Изобретение относится к экспериментальной медицине. Способ позволяет получить ускоренное развитие теменной коры у новорожденных крысят. Для этого на 7-14 сутки беременности животных — матерей вводят дезоксикартикостерон-ацетат внутримышечно в дозе 2,0-0,8 мкг/100 г массы тела. противоположность авторам, создавшим модель недоразвития коры больших полушарий мозга, необходимо было получить Я модель ускоренного ее развития.

Цель изобретения — получение ускоренного развития теменной коры.

Цель достигается тем, что в способе моделирования ускоренного развития коры больших полушарий мозга путем введения биологически активного вещества в дозах

2,0 — 0;8 мкг/100 r массы тела в период 7—

14 суток беременности самки, крысам вводят внутримышечно дезоксикортикосте- Q(j рон-ацетата в последние 1 — 2 недели () беременности Ql

Способ осуществляется следующим образом, Пример 1. ДОКА вводили внутримышечно ежедневно крысам II группы в течение последних 7 суток беременности по 4 мкм. Так как масса тела самки в процессе беременности в эти сроки увеличивалась с

400 г до 500 r, доза ДОКА на 100 г массы постепенно падалв с 1,0 мкг до 0,8 мкг.

Пример 2. ДОКА вводили внутримышечно ежедневно крысам III группы в течение последних 14 суток беременности по 4 мкг. Так как масса тела самки в эти сроки

1783571 око л о с осудов; Гематоэнцефалический барьер обнаруж1лвает признаки структурно-фуйкцибнальной незрелости, вь|ра>кающиеся в йедоразвитии базал:ьной мембраны", отсутствием сплошной оболочкй Ма"кднце- ых астроцитарных ножек и резрелостй посперних, наличии широких экЮрЪвазапьных промежутков. Базапьная мембрана имеет вид нешироких полосок спабоосмиофильного фипаментозного материаЛа. В местах наибольшей удаленности клеточных теп (астробпастов, перицитов) и

50 беременности увеличивалась с 200 r до

500 r, доза ДОКА на 100 г массы постепенно уменьшалась с 2,0 мкг до 0,8 мкг. Дозы ДОКА преднамеренно брали довольно высокими (1,0 — 2,0 мкг/100 ), учитывая, что его 5 значительная ддпя задерживается плацентарным барьером. Ийтактные беременные крысы составили 1 контрольную группу. Новорожденные животные также были разделены на 3 соответствующйе группы. 10

Переднетеменную кору новорожденных крысят изучали методами световой и электронной микроскопии. На полутонких срезах, окрашенных толуидиновым синим, измеряли толщину коры с помощью окуляр- 15 микрометра определяли среднюю величину профильного поля тел, ядер и цитоплазмы

50 крупных пирамидных нейронов Ч слоя и их ядерно-цитоппазматйческого дтношения, подсчитывали количество тел нейронов 20 (отдельно учитывая многоядрышковые) и глиальных клеток в нижних ее слоях (V-Vll), на площади, соответствующей 100 окулярным измерительным сеткам стандартной площади при увеличении 90 х 15 х 1,5 и устайавлйвали" глиальный -= йндекс (глий/нейрон); на той же площади с помощью той же самой сетки подсчитывали процентное соотношение долей объема те-. менной коры, приходящихся на тела нейро- 30 нов, глиальных элементов и нейропиль.

По результатам исследования проводили статистический анализ, Различия считали значимыми (по Стьюденту} при уровне P

0,05. Расчеты выполнены на ДВК-2, 35

Полученные результаты, i группа. У новорожденных крысят от интактных самок нейроны коры — недостаточно зрелые клеточные элементы; что выражается в более или менее плбтном их 40 расположении и преобладании крупного ядра над цитбппазмой, в отсутствие ипи слабом развитии 1ðàíóëÿðíîão эндоппазматического ретикупума. Гпиальные элементы представлены преимущественно не- 45 дифференцированными и дифференцирующимися глиобластами. Астробласты и микрогпиоциты встречаются редко, обычно со стороны экстравазальных промежутков она развита очень слабо или полностью отсутствует.

И группа. При введении ДОКА в дозах

1,0-0,8 мкг/100 г увеличиваются абсолютная и относительная массы большого мозга, утолщается теменная кора; увеличивается профильное поле тела, ядра и цитойлазмы крупных пирамидных нейронов, уменьша-: ется их ядерно-цитоплазматическое отношение, нарастает число многоядрышковых нейронов. Укрупнение нейронов подтверждается и уменьШением их плотности на единицу стандартной площади при неизменяющемся количестве долей объема, занятых их телами. Все эти изменения йейронов в совокупности с усилением базофилии цитоплазмы свидетельствуют о повышении степени их дифференцировки. Это подтверждается и следующими ультра-. структурными признаками: увеличением количества митохондрий, численности и протяженности цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума, гипертрофией пластинчатого комплекса Гольджи, повышенным образованием на телах и отростах нейронов конусов роста (мест образо-. вания отростков) и др. Чаще по сравнению с контролем встречаются митотически делящиеся глиобласты, а также дифференцирующиеся глиобласты и астробласты — клетки .: более крупнь1е и дифференцированные, чем недифференцированные глиобласты. Плотность расположенйя глиальных элементов и количество долей объема, приходящихся на них, не изменяются. Тем не менее с утолщением теменной коры количество их в целом. увеличивается. Повышается содержание микроглиоцитов и отмечаются признаки их активизацйи;

В тонком строении гематоэнцефалического барьера установлены ультраструктурные признаки усиления синтетических и обменных процессов в эндотелйоцитах и перицитах (гипертрофия ядер и цитоплазмы, гиперплазия их органелл) удлинение и повышение осмиофильности специализированных плотных контактов между эндотелиоцитами; утолщение базальной мембраны и развитие ее на большем протяжении сосуда; увеличение числа и степени зрелости концевых ножек астробластов.

Иl группа. При введении ДОКА в дозах

2,0 — 0,8 мкг/100 r в течение последних 14 суток беременности в теменной коре крысят возрастает количество долей объема, приходящихся на гпиапьные элементы, при неизменной плотности их расположения, Это является доказательством укрупнения значительной части данных клеток. Митозы гпи1783571

Составитель И.Павлова

Техред М.Моргентал: Корректор А. Козориэ

Редактор

Заказ 4519 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКЙТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб;, 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

5 6 областов отмечаются реже (в сравнении со . ера. Кора мозга у ДОКА — зависимых живоil группой), Чаще встречаются дифференци- . тных по степени развития гематоэнцефалирующиеся глиобласты и астробласты (no ческого барьера, и дифференцировки сравнению с 1 и Il группами). Обнаружи- . глиальных нервных элементов соответствуваются единичиые клетки, похожие. на 5 ет коре 6 — 7 дневнйх белйх крыс. олигодендроциты. Также повышается со-:: Модель очень удобна для изучения продержание микроглиоцитов и отмечаются: цессов пролиферации и дифференцировки признаки их активации. Еще в большей сте- клеточных элементов мозга и становления пени (в сравнении со И группой) выражены . гематоэнцефалического барьера. Ее можно утолщение теменной коры; увеличение аб- 10 рекомендовать в качестве одной из моделей .солютной и относительной масс большого: .. для изучения влйяния избытка минерало- мозга; свето- и электронномикроскопичЕ- кортикоидов в системе мать-плод íà проские признаки дифференцировки крупных . цессы морфогенеза -различных систем и пирамидных нейронов и ускоренного разви- органов у потомства. Выявленные морфотия гематоэнцефалического барьера. В те- 15 функциональные критерии изменений орга,менной коре крысят III группы более нов у детенышей могут быть использованы выражены(посравнениюс1иИ)деструктив- " в разработке рекомендаций по коррекции ные изменения глиобластов, нервных отро- . этих изменений, что может быть внедрено в стков и сосудистой стенки, не имеющие :- практикуакушерства и педиатрии. широкого распространения. Однако увели- 20 чениедозДОКАсвыше20мкг/100гидли- Формула изобретения тельности воздействий (более 14 суток): Способ моделирования процессов размогут прйвести к грубым деструктивным из- вития коры больших полушарий путем ввеменениям, отеку мозга и гибели животных. дения биологически активных веществ

: Таким образом, при меньших дозах ДО- 25 самке на 14 день беременности, о т л и ч аKA (Игруппа) более выражены процессы,: ю шийся тем; что, с целью получения пролиферации глиобластов, при больших,.ускоренного раэвития теменной коры у по-" дозах и длительности воздействия гормо-- . томства вводят дезоксикортикостерон-аценом(111группа) — процессы ускорения диф-" тат в дозе 2,0-0,8 мг/300 r массй тела ференцировки нейронов, глиобластов и 30 внутримышечно .в период с 7 по 14 день становления гематоэнцефалйческого барь- беременности,