Способ получения средства, обладающего активностью против миксовирусов

 

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа получения средства, обладающего активностью против миксовирусов. Целью изобретения является расширение спектра действия за счет вирулицидной активности по отношению к парамиксовирусам. Сущность изобретения заключается в извлечении методом гидродистилляции из травы душицы мелкоцветковой целевого продукта. Продолжительный эффект заключается в проявлении сильного вирулицидного эффекта по отношению к парамиксовирусам. 5 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармации, и касается способа получения из растительного сырья средства, обладающего активностью против миксовирусов. Цель изобретения расширение спектра фармакологического действия за счет вирулицидной активности по отношению к парамиксовирусам. Сущность изобретения заключается в использовании в качестве сырья травы душицы мелкоцветковой (Оrlganum tyttanthum Gontsch), из измельченной травы которой методом гидродистилляции получают эфирное масло, обладающее активностью по отношению к пара- и ортомиксовирусам. В отличие от прототипа в качестве сырья используют траву душицы мелкоцветковой. Способ осуществляют следующим образом. В качестве сырья для выделения эфирного масла используют цветущую надземную часть многолетнего травянистого растения душицы мелкоцветковой сем. Губоцветных (Lamiaceae). Душица дико растет в Средней Азии (Узбекистан, Таджикистан), в горах Памиро-Алтая и западной части Тянь-Шаня. Широко распространена в средней полосе гор и субальпийском поясе, являясь одним из основных растений, формирующих ландшафт. Сырье следует собирать в период массового цветения, когда содержание эфирного масла в траве достигает 1,21% Возможный объем заготовки до 10 т. Сушку сырья следует проводить на чердаке с хорошей вентиляцией или в тени под навесом, разложив сырье слоем толщиной до 15 см, периодически его переворачивая. Надземную часть душицы мелкоцветковой измельчают до 2-4 см, ее помещают в колбу емкостью 2-3 л и заливают водой из расчета на 1 ч, измельченной травы 10 ч, воды. Под пробкой колбы помещают аппарат Гинзберга, верхняя воронкообразная часть которого касается обратного водяного холодильника, подключенного к водопроводу. Колбу с сырьем ставят на электроплитку мощностью 600-800 Вт и доводят до кипения. Во время кипения эфирное масло вместе с парами воды после охлаждения в холодильнике поступает в аппарат Гинзберга, из которого вода стекает в колбу с сырьем, а эфирное масло, которое легче воды, собирается в аппарате. Как только прекращается увеличение количества эфирного масла в аппарате (через 2-3 ч), плитку отключают и после остывания колбы из аппарата пипеткой или шприцем извлекают полученное эфирное масло, которое перед началом использования просушивают прокаленным сульфатом натрия. Отогнанное эфирное масло и представляет собой противовирусное средство. Эфирное масло, выделенное из травы душицы мелкоцветковой, обладает резким специфическим запахом и представляет собой легкоподвижную жидкость желтого цвета. Физико-химические константы: удельный вес (d)²⁰ 0,916-0,9682, угол вращения (α)²⁴_D 1,4967-1,5148, к.ч. 1,48-4,80, эф.ч. 3,2-22,0 (Кудряшов, 1932; Ходжиматов и др. 1971; Рамазанова, 1977; Нуралиев и др. 1986.). Химический состав эфирного масла: cмесь моно- и сексвитерпеновых углеводородов, в состав которой входит до 56 компонентов, из которых основными являются тимол и кварвакрол: сумма этих веществ составляет от 52 до 89% Определение противовирусной активности эфирного масла душицы мелкоцветковой проводят следующим образом. В чашки Петри помещают по 5 мл испытуемой жидкости. Эфирное масло в объеме 0,2 мл добавляют либо в вируссодержащую жидкость, либо наносят на бумажный фильтр, не соприкасающийся непосредственно с вирусным материалом. В контрольные чашки помещают вируссодержащую жидкость. Чашки помещают в термостат при 34-36^оС и через определенные промежутки времени отбирают пробы материала, которые затем титруют либо на развивающихся куриных эмбрионах в том случае, если тестом служат вирусы гриппа А и В, либо на клетках НЕР-2 (тест вирус парагриппа 3-го типа), либо на клетках RS-41 (тест вирус РС штамм Лонг) по общепринятой методике, Титр вируса рассчитывают по методу Рида и Менча. П р и м е р ы 1 и 2. Универсальность вирулицидного действия эфирного масла душицы мелкоцветковой проявилась и в опытах с РС (респираторно-синцитиальным) вирусом и вирусом парагриппа 3-го типа (см.табл.1 и 2). Вирулицидное действие эфирного масла душицы наблюдалось по отношению к вирусам парагриппа 3-го типа после часового воздействия. Пары эфирного масла уничтожали РС-вирусы через 6 ч, вирусы парагриппа 3-го типа уже через 3 ч, когда в контроле еще сохранилось 3,5 и 2,5 lg ЦПД₅₀ вируса соответственно. Токсичность эфирного масла душицы мелкоцветковой составляла ЛД₅₀2,6±0,27 мг/кг (при введении перорально белым мышам). П р и м е р 3. Как видно из табл.3, эфирное масло душицы мелкоцветковой обладает также резко выраженным вирулицидным действием по отношению к вирусу гриппа типа А, штамм А(Аичи) 1/68 (Н³N₂). Так, уже после часового воздействия эфирного масла инфекционный титр вируса гриппа снижается более чем на 4,5 lg ЭИД₅₀, а после 6-часового инфекционные частицы не выявлялись. Пары эфирного масла оказывают более слабое действие, чем само эфирное масло: через час инфекционный титр вируса снижается незначительно, через 6 ч на 6,5 lg ЭИД₅₀, через 24 ч инфекционные вирусные частицы не выявлялись. Указанный эффект не связан с процессами термоинактивации вируса, так как за 48 ч в контрольном варианте титр вируса в условиях термостата снизился, по сравнению с исходным, всего на 2,1 lg ЭИД₅₀. П р и м е р 4. Вирулицидное действие эфирного масла душицы мелкоцветковой проявлялось и по отношению к вирусу гриппа типа В. Как видно из данных табл. 4, вирулицидная активность эфирного масла в отношении вируса гриппа типа В проявлялась в большей степени, чем в отношении вируса гриппа типа А. Так, уже после 3-часового воздействия эфирного масла инфекционные вирусные частицы в испытуемой жидкости не выявлялись. При применении паров эфирного масла через 3 ч титр вируса снижался на 4,0 lg ЭИД₅₀, а через 6 ч инфекционные частицы вируса не обнаруживались. Сравнительные данные, подтверждающие положительный эффект расширение спектра фармакологического воздействия по антивирусной активности эфирных масел, выделенных из травы душицы мелкоцветковой и эфирного масла из плодов ряда видов борщевика, приведены в табл.5. Из данных табл.5 видно, что оба вещества (эфирные масла) защищают мышей от летальной инфекции (ортомиксовирусы), но масло душицы, кроме того, обладает и вирулицидной активностью по отношению как к ортомиксовирусам, так и к парамиксовирусам. Вирулицидное действие эфирного масла из плодов ряда видов борщевика, взятого в тех же дозах, что и эфирное масло из травы душицы, не удалось установить по отношению к орто- и парамиксовирусам из-за гибели куриных эмбрионов и клеточных культур после введения эфирных масел борщевика. Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить средство, обладающее вирулицидной активностью по отношению к пара- и ортомиксовирусам. Оно может найти применение в медицине и, возможно, в ветеринарии для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызванных пара- и ортомиксовирусами.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АКТИВНОСТЬЮ ПРОТИВ МИКСОВИРУСОВ путем измельчения растительного сырья с последующим извлечением целевого продукта методом гидродистилляции, отличающийся тем, что, с целью расширения спектра действия за счет вирулицидной активности по отношению к парамиксовирусам, в качестве растительного сырья используют траву душицы мелкоцветковой (Origanum tyttanthum Gontsh).

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3