Способ диагностики лихорадки ку у животных
Использование: ветеринарная микробиология , иммунология, комплексный антиген из коксиелл Бернета I и II фазы, серологическая диагностика лихорадки Ку. Сущность изобретения: получают комплексный антиген посредством физического смешивания антигенов II фазы и I фазы из шт. Грита в рабочих дозах в соотношении 1:1-1:2. 4 табл.
СОКЭЭ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБПИК (sils G 01 N 33/53
ГОСУДАРСТВЕНЮЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4457117/13 (22) 14.06,88 (46) 30,06.93. Бюл. hh 24 (71) Научно-исследовательский ветеринарный институт и Казанский государственный ветеринарный институт им, H.Ý. Баумана (72) P.Ã.Ãîñìàíîâ, P,Х.Юсупов, И,А,Курбанова, В.Г.Наливайко и Я.А.Крылов (56) ТУ 42 — 14. Приказ по Минздраву СССР
М 160 от 27.05.71.
Куделина Р,И. ЖМЭИ, 1969, М 5, с. 9-13.
The Journal of Immunology, 1962, ч. 88, р. 741 — 749.
ЖМЭИ, 1979, N. 12, с. 90 — 95
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к способу серологической диагностики лихорадки Ку, и может быть рекомендовано для выявления больных и переболевших животных.
Цель изобретения — разработка эффективного способа диагностики лихорадки Ку у животных с комплексным антигеном иэ коксиелл Бернета 1 и II фазы по РДСК и упрощение и удешевление технологии постановки серологических реакций.
Поставленную цель достигают составлением комплексного антигена из корпускулярных коксиелл Бернета II фазы (производство института эпидемиологии и микробиологии им. Гамалеи или Ташкентского института вакцин и сывороток) и растворимого антигена I-ой фазы из штамма
"Грита" по гв.с. М 1236631 путем физического смешивания в рабочих дозах (об/об) 1:!в
1:2. С этой целью путем предварительного титрования антигенов в гемосистеме РДСК устанавливают рабочие титры отдельно 1-й и II-й фаз, определяют их рабочие дозы для опытных исследуемых проб сывороток кро„„5U„„1824582 А1 (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛИХОРАДКИ
Ку У ЖИВОТНЫХ (57) Использование: ветеринарная микробиология, иммунология, комплексный антиген из коксиелл Бернета I и II фазы, серологическая диагностика лихорадки Ку. Сущность изобретения; получают комплексный антиген посредством физического смешивания антигенов II фазы и! фазы иэ шт. Грита" в рабочих дозах в соотношении 1:1 — 1:2. 4 табл. ви и составляют смесь не физрастворе в соотношении фаз 1:1 - 1:2.
Примеры по cocTBBëåíèþ комплексного антигена.
Пример 1. Проводились опыты по титрации известных антигенов коксиелл
Бернета I u II фаз в РДСК с целью определения рабочих доз, Титрация проводилась по общепринятой для РДСК методике.
Результаты опытов представлены в табл. 1.
В результате опытов установлено титр антигена II-й фазы равен 1:8, 1-й фазы — 128.
Для постановки РДСК согласно "Методических указаний по серологической диагностике лихорадки Ку животных", утвержденного ГУВ MCX СССР 14.09.84 г, используют в удвоенном титре, следовательно, рабе ей дозой антигенов для коксиелл Бернета!-ой фазы будет 1:64-, 2-ой фазы — 1:4, Пример 2, Опыты по составлению комплексного антигена путем физического смешивания антигенов коксиелл Бернета Iой и II-ой фазы в рабочих дозах в соотчоше1824582
45 ниях 1:1, 1:2 и 1:4 и изучение их специфичности к иммунным сывороткам крови от зараженных с возбудителем лихорадки Ку морских свинок.
С этой целью антигены l-й и II-й фазы в рабочих дозах на физиологическом растворе по общепринятой методике смешивались, например, путем добавления к 10 мл антигена 1-й фазы+ 10 глл антигена II-и (1.1), соответствонтто б,б! мл I-й фазы + 3.33 мл
ll-й фазы (1:2) и 7,5 мл I-и фазы + 2 мл Il-й фазы (1:1) и, ттаобоиот, путем добавления соотве те твенно к ан т гену II-й фазы получение соотношений I è фазы 1;1, 1:2 и 1,4.
Полученными разведениями смесей антигенов 1-и a i.-й фаз коксиелл Бернета ставились РДСК на специфическую активность комплекс»ых антигенов с иммунными сыворотками от морских свинок, Результаты представлены в табл. 2.
В результате проведенных опытов установлено, что комплексный антиген проявляет себя в наиболее высокой активности с иммунной сывороткой от зараженных с возбудителем лихорадки Ку животных при соотношениях разведения смесей антигенов I и II фаз 1:1 и 1:2. Наивысшая активность проявляется в соотношениях антигенов в комплекс» 1:1, когооый был использован в да. ыте "тших опытах.
Г! р и м е р 3. Проводились специальные опыты по изучению специфической активности комплексного антигена в РДСК с гетерологичными иммунными сыворотками от животных, зараженных возбудителями бруцеллеза, листериоза, парагриппоэной и хламидийной инфекций. Результаты представлены в табл. 3.
Из данной таблицы следует, что гетерологичные иммунные сыворотки от больных и зараженных животных бруцеллезом, листериоэом, парагриппом и хламидиоэом по
РДСК с комплексным антигеном лихорадки
1 y дают отрицательную реакцию при положительной реакции в контроле - со специфической иммунной сывороткой.
Пример 4. Предложенное техническое решение апробировалось в производственных условиях при исследовании сыворотки крови животных 18 проб по реакции длительного связывания комплемента (РДСК).
По данной реакции комплексный антиген сравнивался с антигенами в отдельности коксиелл Бернета I и I! фазы. Результаты представлены в табл, 4.
Из таблицы видно, что комплексный антиген выявляет в сыворотке крови и животных специфические антитела к антигенам как в фазе I, так и в фазе II. Такитл образом, исключается необходимость исследования сыворотки крови на лихорадку Ку с антигенами фазы I и фазы ll в отдельности.
Технико-экономическая эффективность предлагаетлого изобретения заключается в том, что использование комплексного антигена по серологической диагностике лихорадки Ку, например, в РДСК позволяет сэкономить дорогостоящих компонентов реакции (комплемент, гемолизин, эритроциты, антигены и др.), повышает производительность труда и ускоряет серологическую диагностику в два раза и, очевидно, позволяет выявить с помощью компонента антигенов II-й фазы животных со "свежим" течением инфекции и компонента I-й фазы — животнытл с хроническим течением или обнаружить следовой иммунологический ответ анамнестического характера в хозяйствах ранее неблагополучных по данной инфекции для взятия их на Ретеринарный контроль.
Формула изобретения
С юсоб диагностики лихорадки Ку у животных путем постановки серологической реакции с антигенами и !! фаз с последующим учетом полученных результатов, о т л ич а ю шийся тем, что ставят реакцию длительного связывания компонента, при этом антигены I u II фаэ перед постановкой реакции смешивают в рабочих титрах в соотношении (об/об) 1. 1 — 1;2.
1824582
Таблица1
П р и меча н ие. Крестик
Таблица 2
П р и м е ч а н и е. Крестиками о
Таблица 3 ° ..
П р и м е ч а н и е: — обозначено отрицательная РДСК;
+ степень задержки гемолиэа по РДСК (положительная реакция).
Таблица 4
1824582
4+
2+
Комплексный фазы1 азы И комплексный фазы 1 азы И комплексный фазы 1 фазы II комплексный фазы 1 азы II комплекСный фазы 1 азы И комплексный фазы 1 аэы И комплексный фазы 1 азы И комплексный фазы 1 комплексный фазы 1 азы II
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4 .
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
2+
2+
2+
2+
Продолжение табл.4
1824582
Продолжение табл.4
4+
4+
4+
4+
4+
12
4+
4+
13
14
16
4+
" 4+
18
Составитель P.Ãîñìàíîâ
Техред М.Моргентал Корректор А.Обручар
Редактор
Заказ 2223 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина, 101 комплексный фазы 1 фазы II комплексный фазы 1 азы П комплексный фазы 1 аэы II комплексный фазы 1 азы И комплексный фазы 1 азы II комплексный фазы 1 аэы И комплексный фазы 1 фазы II комплексный фазы 1 азы П
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
3+
4+
3+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
2+
2+
