Способ консервирования роговицы и устройство для его осуществления

 

Использование: в криобиологии и крмомедицине. Сущность изобретения; роговицу фиксируют, помещают в контейнер с криопротектором. замораживают со стороны переднего эпителия через равномерный слой криопротектора при одновременной теплоизоляции со стороны каймы склеры. Устройство включает корпус 1, имеющий нижнюю сферическую часть 2 и герметичную крышку 9 с концентричными гофрами, фиксатор 4 роговицы. Фиксатор 4 содержит фиксирующее кольцо 5 с внутренней конической посадочной поверхностью и кольцевым выступом 11 и прижимное кольцо 6, помещающее фиксирующую коническую поверхность и боковую коническую поверхность. Диаметры верхней и нижней кромок боковой конической поверхности соответственно больше или меньше диаметра кольцевого выступа. 2 с.п.ф-лы, 1 ил. 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з А 01 и 1/02

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1О (21)4773446/14 (22) 25,12.89 (46) 23.08.93. Бюл. М 31 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины (72) Ю.М.Рудько и T.Н.Юрченко (56) Авторское свидетельство СССР

34 404455, кл. А 01 и 1/02, 1973. (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ РОГОВИЦЫ И УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ (57) Использование: в криобиологии и криомедицине. Сущность изобретения: роговицу фиксируют, помещают в контейнер с криопротектором, замораживают со стороны пе„„ ЯЦ„„ 1835238 Ai реднего эпителия через равномерный слой криопротектора при одновременной теплоизоляции со стороны каймы склеры, Устройство включает корпус 1, имеющий нижнюю сферическую часть 2 и герметичную крышку

9 с концентричными гофрами, фиксатор 4 роговицы. Фиксатор 4 содержит фиксирующее кольцо 5 с внутренней конической посадочной поверхностью и кольцевым выступом 11 и прижимное кольцо 6, помь щающее фиксирующую коническую пояерхHocTb и боковую коническую поверхность.

Диаметры верхней и нижней кромок боковой конической поверхности соответственно больше или меньше диаметра кольцевого выступа. 2 с.п.ф-лы, 1 ил. 4 табл.

1835238

Изобретение относится к криобиологии этом охлаждение роговицы ведут со сторои криомедицине. ны нижней части 2 корпуса 1 через тонкий целью изобретения является повыше- (1,0-1,5 мм) равномерный слой криопротекние эффективности способа. тора. Расположение склеральной части роНачертежепредставленасхемаустрой- 5 говицы между фиксирующим кольцом 5 и ства для консервирования роговицы. прижимным кольцом 6, которые выполнены устройство включает .полый корпус 1, из теплоизолирующего материала, а также нижняя часть 2 которого выполнена сфери- большая толщина (4 — 5 мм) криопротектора ческой. Вовнутренней полостикорпуса1на в фиксаторе 4 обеспечивают равномерное кольцевой площадке 3 установлен фиксатор .10 замораживание роговицы.

4 роговицы, выполненный в виде двух коак- Процесс отогрева выполняют помеще. сиально расположенных колец- фиксирую- нием устройства в подогретую воду. щего кольца 5 и прижимного кольца 6. Пример осуществления способа. Из

Контактные рабочие поверхности 7 и 8 ко- глазных яблок кроликов (10 шт. от 5 кролилец5и 6 выполнены койусообразными(под 15 ков) вырезали роговицы с каймой склеры, углом40-55ОC). Ккорпусу1 герметично при- закрепляли их в фиксаторах 4, переносили варена крышка 9 с кольцевым выступом 10, во внутреннюю полость корпуса 1, заполнявнутренний диаметр которого соответству- ли криопротектором — 10 -ным ПЭО-400 и ет наружному диаметру фиксирующего инкубировали в течение 30 мин, Слой криопкольца 5, На внутренней поверхности фик- 20 ротектора между роговицей и стенкой сосирующего кольца 5 имеется кольцевой вы- ставлял 1 мм. После герметизации устройство ступ 11, который с наружным диаметром помещали в замораживатель.и охлаждали со прижимного кольца 6 образует замковый . скоростью1-2 град/мин до-8 C. 3атемустэлемент 12. Высота внутренней полости ройство погружали в жидкий азот и хранили фиксирующего кольца 5 больше высоты 25 при -196 С в течение 7 сут. прижимного кольца 6 на толщину каймы Параллельно замораживали роговицу склеры. Внутренняя полость корпуса 1 и (10 шт. от 5 кроликов) в известном устройстфиксатор 4 роговицы заполнены криопро- ве согласно прототипу. тектором. Отогрев производили в водяной бане

Устройство работает следующим обра- 30 при 42ОС в течение 1,0-1,5 мин. После зом. отогрева роговицу извлекали за кайму склеНа контактную рабочую поверхность 7 ры и исследовали клетки заднего эпителия. фиксирующегокольца5укладываютрогови- Для подсчета количества клеток заднего цу, выделенную из глазного яблока в виде . эпителия препараты окрашивали гематокконеосклерального комплекса. При этом 35 силином и эозином. Подсчет клеток проиэсобственно роговица выступает за наруж- водили под микроскопом МБИ-6 при ную поверхность фиксирующего кольца 5. увеличении 600х в 13 полях зрения: 9 — ценНесдавливающую фиксацию комплекса тральных и 4 — периферических. Для этого производят по кайме склеры контактной ра- использовали сетку с площадью квадрата, бочей поверхностью 8 прижимного кольца 6 40 равной 0,0576 мм .

2 при em введении внутрь фиксирующего В табл. 3 представлен сравнительный кольца 5 через кольцевой выступ 11. Зафик- анализ показателей табл. 1 и 2, сированный комплекс переносят в корпус 1 Различия между показателями табл. 1 и на кольцевую площадку 1„при этом рогови- 2 по количеству клеток заднего эпителия ца располагается в нижней части 2 корпуса 45 95,0="1,577, по коэффициенту вариации—

1, В фиксатор 4 и корпус 1 наливают криоп- 11,8 +1,57 ротектор, равномерный слой которого меж- Для оценки биологических свойств ду роговицей и нижней частью 2 консервированных роговиц проводили кеобеспечивается геометрией контейнера, ратопластику на кроликах, для чего было учитывающей кривизну роговицы по сред- 50 использовано 10 роговиц, консервированнестатическим размерам глазного яблока. ных заявленным способом (1 группа) и 10—

Корпус 1 накрывают крышкой 9 и герметич- известным (И группа). Модель аутокератопно приваривают ее к корпусу 1 по перимет- ластики: правый глаз- донор, левый — рециру. Центрированиефиксатора4вкорпусе1, пиент позволила избежать явлений а также компенсация изменения внутренне- 55 тканевой несовместимости, наблюдающих го объема устройства при изменении темпе- при аллокератопластике, и получить объекратуры в процессе охлаждения и нагрева тивные данные о влиянии условий замораобеспечивается кольцевым выступом 10. Ус- жива н и я на конечное состоя н ие тройство помещают в эамораживатель. при биологического материала. Срок наблюде1835238

Таблица 1

Количество клеток заднего эпителия после консервироварования заявленным способом ния за животными после трансплантации—

1 мес. Через 1 сут. после трансплантации у всех оперированных животных наблюдалась конъюктивальная иньекция, незначительное отделяемое, пересаженные 5 лоскуты были слегка отечны. Через 3 сут. в I группе 8 трансплантатов были прозрачными, 2 оставались несколько отечными. Во И группе прозрачными были 6 трансплантатов, 4 — в значительной степени отечны, 10 рисунок радужки и область зрачка через них плахо определялись. К 7 сут, в I группе 9 лоскутов были прозрачными, 1 оставался резко отечным, во И группе 7 трансплантатов были резко отечны, 2 отечны в меньшей 15 степени, 1 оставался прозрачным. Через 14 сут. в I оставалось такое же состояние: 9 прозрачных и 1 мутный. Такая картина приживления оставалась до 30 сут. Во II группе к 14 сут. и до конца срока наблюдения 8 20 трансплантатов были мутными, 1 полупрозрачный и 1 прозрачный. В обеих группах отсутствовали осложнения, связанные с кератопластикой. В табл, 4 представлены результаты трансплантации. 25

Различия по количеству прозрачных приживлений 80 «+14 j,.

Формула изобретения

1. Способ консервирования роговицы, включающий фиксацию роговицы, помещение ее в контейнер с криоппотек ором—

10ф, полиэтиленоксид-400, инкубэцию в течение 30 мин, замораживание со скоростью

1-2 /мин до -8"C с последующим погружением в жидкий азот, хранением при -190"Ñ

7 суток и отогревом в водяной бане при 42 "С в течение1,0-15 мин, от л и ч а ю щи йс я тем, что, с целью повышения эффективНости способа, замораживания и отогрев осуществляют направление со стороны переднего эпителия через равномерный слой криопротектора при одновременной теплоизоляции со стороны каймы склеры, 2. Устройство для консервирования роговицы, содержащее полый корпус с крышкой, внутренняя полость которого заполнена криопроектором и фиксатором с роговицей, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что фиксатор выполнен в виде двух коаксиально расположенных колец, контактные ра0очие поверхности которых выполнены конусообразными, при этом замковый элемент образован кольцевым на внутренней поверхности фиксирующего кольца и наружным и диаметром прижимного кольца, причем высота внутренней полости фиксирующего кольца больше высоты прижимного кольца, а корпус в нижней части выполнен сферическим, кроме того, крышка снабжена кольцевыми выступом, внутренний диаметр которого соответствует наружному диаметру фиксирующего кольца.

1835238

Таблица 2

Количество клеток заднего эпителия после консервирования известным способом

* эти обозначения являются результатом статистической обработки, что специалистам . понятно.

Таблица 3

Таблица 4

Составитель Ю.Рудько

Редактор M.Êóýíåöàââ Техред М.Моргентвл Корректор М Керецмвн

Заказ 2967 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Мофква, Ж-35, Рву1шская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101