Способ получения 17- @ -алкилированных 6-метил-19-норпрегна- 4,6-диенов и промежуточные соединения этого синтеза

 

Использование: в качестве прогестоммметических средств с замедленным гепатическим метаболизмом. Сущность: продукт - 17-алкилированный 6-метил-19-норпрегна- 4,6-диен ф-лы 1, где RI и R2 - водород,алкил Ci-Сз; Нз-алкил Ci-Сб. Выход 68-70%. Реагент 1: соответствующее 6-деметил производное соединения ф-лы 1. Реагент 2: алкилортоформйат. Реагент 3 соответствующий 3-енолэфир, соединения ф-лы .1. Реагент 4; реагент Вильсмайера-Хака. Реагент 5: 6- формилпроизводное соединения 1. Реагент 6: 6-гидроксиметилпроизводное соединения 1. Реагент ; 6-метиленпроизводное соединения 1. Условия реакции: стадия 1-в кислой среден стадия 3-е условиях восстановления смешанным гидридом щелочного металла: стадия 4 - обработка минеральной или органической кислотой; стадия 5 - обработка катализатором изомеризации, ф-ла 1: ИСП с 2 с, и 4 з.п, ф-лы, 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

COliMA ×ÈÑTÈ×ÅÑÊÈX

РЕСПУБЛИК (я)5 С 07 J 5/00

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, К ПАТЕНТУ

-Р1 р

2 с. и 4 з.п: ф-л ы, 3 табл.

СН

Р1 » p (21) 4894526/04 (86) РСТ/FR 90/00270 (13,04.90) (22) 12,12.90 (46) 23.08.93, Бюл. ¹ 31 (31) 89 04910 (32) 13,04.89 (33) FR (71) Лаборатуар Терамекс С.А. (MC) (72) Клод Чернатинский (FR) и Неджиб Мохамед Насрауи (ТН) (56) Патент Франции ¹ 2077877, кл. А 61 К

27/00, 1973, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 17- а-АЛКИЛИРОВАННЫХ 6-МЕТИЛ-19-НОРПРЕГНА-4,6ДИЕНОВ И ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ЭТОГО СИНТЕЗА (57) Использование: в качестве прогестомиметических средств с замедленным гепатическим метаболизмом. Сущность: продукт—

17-алкилированный б-метил-19-норпрегна4,6-диен ф-лы 1, где R) и Яг — водород, алкил

C1 — Сз; Кз-алкил С1 — Сб. Выход 68 — 70 . Реагент 1: соответствующее 6-деметил произИзобретение относится к синтезу лекарственныхх препаратов, s частности стероидов.

Более конкретно обьектом изобретения является способ получения новых стероидных производных 19-норпрогестерона, имеющих в положении 17 и возможно 21 алкильный заместитель, в частности 6-метил-19-норпрегна — 4,б-диенов, алкилированных в положении 17 и возможна 21, общей формулы 1

„„ 0„„1836379 АЗ водное соединения ф-лы 1. Реагент 2: алкилортоформиат, Реагент 3" соответствующий

З-енолэфир, соединения ф-лы 1. Реагент 4; реагент Вильсмайера-Хака, Реагент 5; бформилпроизводное соединения 1. Реагент

6; 6-гидроксиметилпроизводное соединения 1. Реагент 7 6-метиленпроизводное соединения 1. Условия реакции: стадия 1-в кислой среде, стадия 3 — e условиях восстановления смешанным гидридом щелочного металла: стадия 4 — обработка минеральной или органической кислотой; стадия 5 — обработка катализатором изомеризации. ф-ла 1: где R> и Rz одинаковые или разли Гные означают водород или низший алкил "., Сз;

1Н 36379

Нз — низший алкил С1- Сл, обладающих интересн ыми и рогестомиметическими свойствами и замедленным гепатическим метаболизмом.

В настоящее время известны производные 19-норпрогестерона, в частности производные, содержащие характеристическую цепь метилб-диеном в циклах А и В стероидной молекулы (патент Франции N. 2271833), например 6-метил-17-а — гидрокси 3,20-диоксо-19-норпрегна-4,6-диен и его простые и сложные эфиры.

Многочисленные стероидные производные, имеющие углеродный скелет 19норпрогестерона, имеющего в положении

17 и/или 21 углерода алкильные радикалы, известны как прогестативные молекулы (патент Франции М 2077877, например

3,20-диоксо-17- а-метил-19-норпрегна-4,9диен.

Предлагаются новые соединения общей формулы 1, обладающие интересными прогестомиметическими свойствами с улучшенной связью с рецепторами прогестерона и замедленным гепатическим метаболизмом.

Эффективность этих новых соединений может быть связана со структурой 19 норпрогестерона, характеризующейся стероидной системой, несущие в то же время цепь, называемую "метил-6-диеном", и присутствием трех заместителей R1, и и Рз, определенных выше, которые препятствуют или замедляют метаболизм продукта в организме энзимами, не препятствуя связыванию с рецепторами прогестерона.

Среди соединений общей формулы 1 можно назвать следующие:

6,17 а-21-триметил-3,20-диоксо-19-норпрегна-4,6-диен, 17 а-атил-6,21-диметил-3,20-диоксо-19норп регн а-4,6-дие н, 17 а-атил-3,20-диоксо-á-метил-19-норпрегна-4,6-диен, ° 6,17 а-диметил-3,20-диоксо-19-норпрегна-4,6-диен, 17 а, 21-атил-б-метил-3.20-диоксо-19норп регна-4,6-диен, которые являются предпочтительными соединениями, Исходные вещества общей формулы 3l

-R1

CH

Я

О где R1. R2 и Рз имеют уклэанчые значения, необходимые для получения соединении формулы 1, получают иэвесгным методом, подвергая производные 19-норстероида частичной формулы 1а

3 (Ас

10 где А — ацильный остаток карбоксильной органической кислоты, имеющей 1 — 4 атома углерода; волнистая линия указывает пространственную ориентацию а или /1; цикл А является полностью ароматическим типа 3-алкилокси Л -эстратриенового

1,3,5 (10) или частично ненасыщенным типа 3-ексо-4эстренового возможно блокированные в форме функционального производного, за.трагивая или не затрагивая двойную связь, действию сильного основания, а затем алкилирующего агента для образования моноили бис-алкилированного производного частичной формулы!1а 1

СН (;(2

30 где R1, Я и Кз — имеют приведенные значения.

Сильным основанием могут быть щелочные алкоголяты — производные низшего спирта, имеющего 1 — 5 атомов углерода, линейной или разветвленной структуры и ме40 талла, например лития, натрия или калия, например т-амилат натрия, т-бутилат калия, этанолят натрия, или амиды щелочных или щелочно-земельных /3=металлов (лития, натрия, калия, кальция или бария).

45 Предпочтительно используют амиды натрия или иэопропиламид лития, Алкилирующим агентом может быть диалкилсульфат, например диметилсульфат, или галогеналкид, причем галогеном может

50. быть иод или бром.

Растворителем может быть одно вещество или смесь веществ, выбранных из группы: жидкий аммиак. эфир, тетрагидрофуран, бенэол, гексан, спирт, причем предпочти55 тельными растворителями являются жидкий аммиак и тетрагидрофуран.

Сильное основание и алкилирующий агент используются в избытке по отношению к стехиометрическому количеству. Ре1836379 акцИя сопровождается кислотным гидролизом.

Соединения общей формулы !!а,моноили полиалкилированные, очищают при не. обходимости соответствующими средствами, например методом кристаллизации или хроматографией на колонке, содержащей подходящий для хроматографии адсорбент, например двуокись кремния, тальк, силикат магния или окись алюминия.

Температура реакции может изменяться в широких пределах от -60 до +50 С.

Предпочтительная температура реакции от

-60 до -40 С, поскольку используют жидкий аммиак в качестве растворителя.

Для получения моно-алкилированных производных (случай, когда R 1 и Й вЂ” водород) используют более слабую концентрацию основного характера (4-7 эквивалентов) и более низкую концентрацию алкилирующего агента.

Напротив, для получения 17,21-диалкилированных производных необходимо вводить повышенное количество основного агента (10-50 эквивалентов) и повышенное количество алкилирующего агента (50-75 эквивалентов).

Выбор основания имеет значение, Эксперимент показал, что изопропиламид лития является лучшим реактивом для алкилирования в положении 21.

Щелочные алкоголяты благоприятствуют алкилированию в положении 17, предпочтительным основным агентом в этом случае является амид металла, получающийся в результате реакции "In situ" жидкого аммиака со щелочным или щелочно-земельным металлом, таким как литий или кальций, Алкилирование в положении 17 а исходя из щелочного енолята, является трудноосуществимым и требует присутствия очень большого избытка основного агента.

Получение метилированного в положении 21 производного с помощью алкилирующего агента затрудняется, если положение 17 уже занято алкильной группой, Получают смесь моно- и диалкилпроизводных в положении 21 и поэтому требуется

6anbwoA избыток металла и алкилирующего агента.

Моноалкилировэние в положении 21 облегчается при использовании такого основного агента, как изопропиламид лития в тетрагидрофурэне, вследствие стерической затрудненности Основного реактива.

Напротив, учитывая разную скорость алкилирования, можно сначала алкилировать в положении 17 а, вводя малый избыток алкилирующего агента в реакционную среду, потом добавляя снова алкилирующий агент, идентичный или различный для проведения алкилирования в положении 21 с алкильным радикалом, идентичным или раз5 личным радикалу в положении 17 .а, Возможно также испольэовать в качестве исходного вещества. 19-норпрегнадиен, уже метилираванный в положении 21, и осуществить бис-алкмлировэние в положении

10 17 и 21, но в этом случае. алкилирование в положении 21 отлегчается, так как углерод в положении 21 образует вторичный карбанион, более устойчивый и более реакционноспосабный, 15 Реакция может быть записана как реакция этилирования: сн сн 2

ЭТИЛИРУНМЦИИ

-снз сн (59%) о

% с н

25

В том случае, когда используют в. качестве исходного продукта экстра-триеновое производное (!!а),,/т.е. соединение. в котором ядро А — явЛ ется ароматическим, осу35 ществляют превращение в соединение формулы ii следующими этапами: . подвергают соединение общей формулы !!а

О 1

-CH р, где R 1, Rz,йз и Ра имеют укаэанные значения, 50 восстановление по методу Бирха-Нельсона с последующим гидролизом в сильнокислой среде, затем окислению реактивом

Джонса для получения 3-кето- I9-норпрегнэ-4-ена формулы I!.

55 Восстановление по Бирху-Нельсону протекает в интертной среде, например в линейном или циклическом эфире, с помощью щелочного металла в растворе жидкого аммиака в присутствии донора протонов, например спиртов. таких как ме1836379

CH 1

Д

О

CH

-й1

О

СН2

15 R1

О

R>O

СНО

О-

Ц сн он танол или этэнол, Затем отгоняют аммиак и удаляют избыток щелочного металла добавлением алканола, Образующийся енольный эфир затем гидролизуют действием сильной минеральной кислоты.

Способ получения соединений общей формулы используют в качестве исходного продукта енольный эфир 3,20-диоксо-19норпрегна-4-ена, полученного из 3,20-диоксо-19-норпрегна-4-енов, общей формулы II где R 1, R z u R з имеют указанные значения.

Соединения общей формулы II этерифицируют до енольного эфира алкилортоформиатом и полученное соединение общей формулы I! I где Й4 — низший алкил, R1, R z u R з имеют указанные значения подвергают действию формилирующего агента типа Вильсмайера-,Хака и полученное формилированное производное общей формулы IV где R1. Rz. и Вз и R4 имеют указанные значения восстанавливают смешанным гидридом щелочного металла до получения гидроксиметилированного производного общей формулы V

35 где R1, R2, Йз и R4 имеют указанные значения, которое обрабатывают минеральной или органической кислотой и получают 3-оксо-6метиленовое производное общей формулы

Vl где R 1, R z и Рз имеют укаэанные значения, которое, в свою очередь, подвергают воздействию катализатора изомеризации для получения 6-метил-3-оксо-19-норпрегна-4,6-диенового и роизводного, соответствующего общей формуле 1.

Предлагаемые соединения могут входить в качестве активнодействующего начала в фармацевтические композиции, предназначенные для приема внутрь следующими путями: парентеральным, оральным, ректальным, через слизистую оболочку или кожным путем.

Эти фармацевтические композиции могут использоваться при лечении гинекологических заболеваний, таких как нарушение менструального цикла, дисменоррея, предменструальный синдром и нарушение менопауз. Они могут быть использованы самостоятельно или в сочетании эстрогеном как контрацептивным агентом.

Изобретение также относится к промежуточным продуктам формул I I, I I I, I V, V u. Vl.

Пример 1. 6,17а-диметил-3,20-диоксо-19-но рп ре гна-4, 6-дие н.

Стадия А. 17 а-Ацетокси 3-этокси-20-оксо-19-норпрегна-3,5-диен.

B интертной атмосфере при комнатной температуре добавляют в раствор 126 г 3,20диоксо-17 а-ацетокси-19-норпрегна-4-ена в

1010 мл этанола 115 г этилортоформиата, затем после перемешивания в течение 10 мин вводят 0,63 r n-толуолсульфоновой кислоты.

Смесь перемешивают в течение 60 мин и реакции останавливают добавлением

17 мл триэтиламина. Разбавляют смесь

380 мл этанола и затем нагревают ее с обратным холодильником до растворения.

Кристаллизуют путем доведения раствора до комнатной температуры. затем охлаждают в бане со смесью ацетона и льда. Получают 113 г 17 а-ацетокси-3-этокси-20-оксо1836379

19-норпрегна-3,5-диена, что соответствует выходу 837 от теоретическою.

Енол эфира имеет следующие характеристики.

ИК-спектр, см: 1740 (СО ацетокси), 1710 (СО в положении 20), 1650, 1620 (Л3,5).

УФ-спектр Амакс, 243 нм, 8=20840, Спектр ЯМР: (Т,ЗН) 1,3 ppm для СНз этокси, (О, 2Н) 3,60 ppm для СН2 атил, (S, 1Н) 5,25 ppm Н, характерный для С6, (S, 1Н)

5,40 ppm Н, характерная для С4..

Стадия В, 17 а -Метил-3,20-диоксо-19норпрегна-4-ен- и 17 а, 21-диметил-3,20диоксо-19-норпрегна-4-ен.

Готовят сначала раствор 46 r кальция в

1000 мл жидкого аммиака, охлаждают до60 С в интертной атмосфере, добавляют тонкой струей раствор 30 г енольного эфира со стадии А в 495 мл тетрагидрэфурана. ilo-. сле 15 мин перемешивания вводят по каплям 363 мл йодметила. Образуется серо-белый осадок. После окончания добавления в течение 60 мин перемешивают, затем удаляют максимально возможное количество аммиака под вакуумом и на теплой бане. После этого добавляют 1000 мл метанола и соляной кислоты (6Н) до кислого рН, все время поддерживая температуру среды около 0 С, используя баню ацетона со льдом.

Смесь выдерживают при перемешивании еще в течение 60 мин. Продукты реакции осаждают добавлением 2000 мл воды-и экстрагируют их толуолом. Получают после выпаривания растворителя 22,9 г сырого масла, содержащего 68 17 а-метилированного производного и 24 17 а, 21-диме-TMIIvlpoBBHHoI производного,. определенных методом жидкостной хроматографии с высоким выходом (ЖХВ В).

Хроматографическим путем на.кремнеземе (элюент циклогексэн с 10% эфира) выделяют в головных фракциях 1,1 г 17 а, 21-диметилирован ного производного и затем 6 г 17 а-метилировэнного производного в хвостовых фракциях. Эти два продукта перекристаллизовывают отдельно в метаноле, Они обладают приведенными далее физическими константами.

3,20-диоксо-17 а -метил-19-норпрегна4-ен, ИК-спектр, см,1705 (СО в 20), 1680(СО в 3), 1620 (для С=С сопряженной связи).

УФ-спектр: 2„, 240 нм, F. =17385.

Спектр ЯМР: (S, ЗН) 1,2 ppm СНз — 17 а, (S, ЗН) 2,2 ppm СНз — 21.

3,20-диоксо-17 rñ, 21-диметил-19-нори ре гна-4-е н, ИК-спектр, см 1697(CO в 20), 1670 (СО в 3), УФ-спектр: 4акс 240 нм, х =16515, Спектр RMR (S, ЗН) 1,2 ppm СНз -17 а, 5 (Т, ЗН) 1,07 ppm СНз-22, мультиплет 2,55

ppm СН2 — 21.

Стадия С. 3-Этокси-17 а-метил-20-оксо19-норп регна-3,5-диен.

Это соединение получают согласно

10. методике стадии А, но исходя из 3,20-диоксо-17 а-метил-19- норпрегна-4-ена, 12 мл этанола, 1;85 мл этилортоформиата, 0,102 г и-толуолсульфоновой кислоты и 0,2 мл триэтиламина.

15 Получают с выходом 78 кристаллический енольный эфир, физические константы которого приведены далее.

ИК-спектр, см: 1695 (СО в 20), 1640, 1620 (5 -3,5), 20 УФ-спектр Ам, с 243 нм,F =16520.

Спектр ЯМР: (S, ЗН) 1,15 ppm для СНз—

1.7а, (T, ЗН) 1,30 ppm для СНз этокси, ($, 3H)

2,15 ppm для СНз -21, (Q, 2Н) 3,80 ppm для

СНз этокси, (S, 1Н) 5,22 ppm для Н в С6, (S, 1Н) 5,32 ppm для Н в С4.

Стадия 0 3-Этокси-6-формил-17 а-метил-20-оксо-19-норпрегна-3,5-диен, Готовят формилирующий реактив, растворяя по каплям под азотом при темпера30 туре 2 С 3,15 мл свежеперегнанного РОС!3 в 28 мл диметилформамида с последующим перемешиванием в течение 5 мин.

Полученный продукт добавляют по каплям к раствору 7 г 3-этокси-17 а -метил-20-оксо19-норпрегна-3,5-диена в 56 мл диметилформамида в течение .1 0 -15 мин.

Выдерживают при перемешивании в течение 10 мин, затем гидролизуют ион имония добавлением по каплям раствора 14 r аце40 тата калия в 28 мл воды так, чтобы температура не превышала +30 С, Раствор, окрашенный сначала в красный цвет, меняет окраску на желтый при начале кристаллизации, После 30 мин пе45 ремешивания добавляют 105 мл ледяной воды. Выделяют 1,2 г, что соответствует теоретическому выходу 95 сырого 3-этокси6-ф о рм ил-17 а-метил-20-оксо-19-норпрегна-3.5-диена; Проводят перекристаллизацию из спирта и получают 3,1 г чистого продукта.

ИК-спектр, см; 1700 (СО в 20), 1650 и

1615 (Ь -3,5).

УФ: Аракс 220 и 320 нм.

Спектр ЯМР: исчезновение (S, 1Н)

5,22 ppm.

Стадия E 17 а=Метил-б-метилен-3,20диоксо-19-норп регна-4-е н.

1836379

5

15 мина

35

45

Добавляют маленькими порциями в атмосфере азотэ,и при комнатной температуре 95 мг боргидридэ натрия в раствор 1,9 г

3-этокси-17 а-метил-6-формил-19-нор-20кетопрегнэ-3.5-диена в 5,7 мл этэнола и

4,7 мл диметилформамида. Смесь выдерживают при перемешивании в течение 2 ч, Снижают температуру реакционного раствора до 0"С и добавляют раствор 0,4 мл 2 н, серной кислоты в 2 мл воды в течение 2 мин, Температура поднимается до 10 С и появляется легкий желтый осадок в виде резины, Перемешивэние продолжают еще

20 мин. После этого добавляет раствор

0,88 r кэрбонэта калия в 2 мл воды по каплям. Осадок увеличивается, Его отделяют фильтрованием и промывают обильно водой до нейтральной реакции промывной воды. Получают 1,40 г 17 -метил-6-метилен3,20-диоксо-19-норпрегна-4-енэ, что соответствует выходу 87%, ИК-спектр, см: 1700 (СО в 20), 1660(СО в 3), 1620, 1595 (С=С), УФ спектр: Ям®<с 263 нм, <=12280.

Спектр ЯМР: появление двух хорошо разрешенных синглетов при 5 и 5,25 ppm, Стадия F. 3,20-Диоксо-6,17 а-диметил19-норпрегнэ-4,6-диен (соединение формулы 1).

Готовят суспенэию 0,65 г угля с 5% паллэдия в 33,5 мл метанола, которую нагревают с обратным холодильником в течение

30 мин, добавляют 1,34 г 6-метиленового производного, полученного на стадии Е.

Поддерживают нэгревэние с обратным холодильником. Реакция сопровождается определением поглощения в УФ-спектре, После 30 мин перемешивания оставляют смесь для охлэждения до комнатной температуры. Фильтруют нэ -фильтре Кларсель (С(агсе!). Фильтрат концентрируют, очищают хроматографическим путем нэ кремнеземе (30-кратном по весу) и элюируют толуолом. Фракции, содержащие 6-метиловые производные, рекристаллизуют из метанола и получают таким обрэзом 0,83 г

3.20-диоксо-6,17 -.диметил-19-норпрегна4,б-диена с выходом 62% от теоретического, т.пл. 164,6" С (а)о в диоксане +22,32О.

Найдено,%: С 80.26; Н 9,20.

Сп Нзо Ог

Вычислено,%: С 80,93; Н 9,26.

ИК-спектр см: 1695 (СО в 20), 1650 (СО в 3), 1622, 1576 (Л-4,6).

УФ-спектр: Х щк 289 нм, е =23900.

Мэсс-спектр (m/ñ); 326 молярная масса, 283 потеря СНзСО, 43 СНзСО.

Спектр ЯМР: (S, ЗН) 0 75 ppm для

CH3=18, (S, ЗН) 1,19 pprn для СН3=17 а, (S, ЗН) 188 ppm для СНз в б, (S, ЗН) 216 ppm для СНз=21, (S, 1Н) 6,01 ppm для Н в С7, (S, 1Н) 6,12 ppm для Н в С4, Пример 2. 6,17 (i, 21-Триметил-3,20диоксо-19-норп регна-4,б-диен.

Стадия А. 3-Этокси-17 а, 21-диметил20-оксо-19-норпрегна-3,5-диен.

Действуют, как нэ стадии А примера 1, но исходя из 5,85 г 3,20-диоксо-17 а, 21-диметил-19-норпрегна-4-енэ, полученного на стадии В примера 1, в 12 мл этанола, 5,9 мл этилортоформиатэ и 0,029 г и-толуолсульфоновой кислоты. По окончании реакции ее останавливают, добавляя 0,6 мл триэтилаЕнольный эфир получают не кристэллизующийся, его экстрагируют бензолом и промывают бензольную фазу водой. Получают таким образом 7,07 г сырого енольного эфирэ, который подвергают очистке хроматогрэфическим методом на глиноземе основного хэрэктера и элюировэнию гексэном и 1% триэтиламина, получают 5,8 r 3-этокси17 а, 21-диметил-20-оксо-19-норп регнэ-3,5диена с выходом 91 %.

Стадия В, 3-Этокси-6-формил-17 а, 21диметил-20-оксо-19-норпрегнэ-3,5-диен.

Проводят формилирование в положении 6 соединения со стадии А по описанной процедуре стадии D примера 1, Исходят из

5,1 r енольного эфира стадии А в 41 мл диметилформэмидэ.

Формилирующий реактив получают из

2,15 мл РООз в 20 мл диметилформамида.

Гидролизующий агент получают из 13,8 г ацетэтэ калия в 20 мл воды.

Получают 4,4 г, что соответствует выходу 77% б-формилировэнного производного.

Стадия С, б-Метилен-17 а, 21-диметил3,20-диоксо-19-норп регна-4-,ен, Используют ту же самую последовательность операций, описанных в стадии Е примера 1, Исходят из 4,3 г б-формилированного .производного стадии В в 43 мл этэнола. Восстановление проводят рэствором 0,273 г боргидридэ натрия в 4 мл диметилформамида. Перемешивают в течение 10 мин, затем дегидатируют гидроксиметилированное производное раствором

5,15 мл 2 н. серной кислоты в 40 мл воды

Тэк получэют 1,9 г, что соответствует выходу 50% производного б-метиленового, макс=258 нм.

Стадия D 6,17 o, 21-Триметил-3,20-диоксо-19-норпрегна-4,б-диен (соединение формулы 1).

Нагревают с обратным холодильником суспензию, содержащую 25 мл этанолэ и

0,14 г пэллэдированного угля в течение

18363 И

60 мин, Добавляют затем 1,1 г 6-метиленового производного стадии ". За протеканием реакции следят УФ-спектрометрическим путем. После 50 мин перемешивания с обратным холодильником констатируют смещение акс при 286 нм Фильтруют на фильтре

Кларсель, фильтрат высушивают досуха и остаток выделяют на хроматографе толуолом на 35-кратном по весу кремнеземе.

Собирают фракцию (0,83 г) 6,17 а, 21-триметилированного производного, которое очищают перекристаллизацией из этанола при

95оС, 6, 17 а, 21-Триметил-3 20-диоксо-19норпрегна-4,6-диен плавится при 160ОC (e)p

+18,9 (c=0,53% диоксана), И К-спектр, см: 1695 (CO в 20), 1680 (СО в 3), 1628, 1580 (Л-4,6).

УФ-спектр: Laic, 288,5 нм, 8 =24280.

Масс-спектр m/å: 340 малярная масса, 283 (М-57) потеря СОСН2СН3.

Найдено,%: С 81,06: Н 9,46.

С23Н 3202

Вычислено,%: С81,13; Н 9,47.

Спектр-ЯМР: (S, 3H) 0,71 ppm для СНз18, (Т, ЗН) 1,05 ppm для СНз — 22, (0,9) 2,45

ppm для CH2 — 21, (S, 3H) 1,13 ppm для СНз21, ($, ЗН) 5,95 ppm для Н в С7, (S, 1Н) 6,05

ppm для Н в Сб.

Пример 3, 17а-Этил-б-метил-3,20-диоксо-19-норпрегна-4, б-диен, Стадия А. 3,20-Диоксо-17 Л-этил-19норп регна-4-ен.

Растворяют 1 г кальция в 40 мл жидкого аммиака при температуре -60 С в атмосфере инертного газа. Добавляют затем тонкой струйкой раствор 1 г 3-этокси-20-оксо-19норпрегна-3,5-диена в 18 мл тщательно обезвоженного тетрагидрофурана. Геремешивают в течение 1 ч, затем добавляют

9,8 мл этилиодида, Перемешивают смесь в течение 1 ч, затем удаляют аммиак выпариванием под вакуумом в теплой водяной бане.

Получают беловатую пасту, которую растворяют в 100 мл метанола, затем добавляют

Зн. соляной кислоты до кислого рН, все время охлаждая нэ водно-ацетоновой бане.

После 60 мин перемешивания продукт экстрагируют толуолом, толуольную фазу отделяют и промывают водой. После выпаривания получают 0,81 г (или 95,5%) 17 а-этилированного производного, содержащего

41,6% 17 а-этилпроизводного,,определенного ЖХВВ. Продукт очищают хроматографическим путем на 50-кратном количестве кремнезема, используя в качестве растворителя циклогексан с 10% эфира, Фракция, соответствующая 17 а-этилированному производному высушивается, и

10 сухой остаток рекристаллизуют циклогексаном.

ИК-спектр, см: 1705 (СО в 20), 1620 (Ь-4), 1670 (СО в 3).

УФ-спектр; Lame 240 нм, г =17520.

Спектр ЯМР: (S, 3H) 0,70 ppm для СН318, (Т, ЗН) 0,75 ppm для СН3 17 а-этила, (S, ЗН/т) 2,05 ppm для СН3-21, (S, 1Н) 5,80 ppm для Н в С4.

Стадия В. 3-Этокси-17 а-этил-20-оксо19-норп регна-3,5-диен, Проводят эфир-енолизацию по той же методике, которая описана в стадии А примера 1, исходя из 9,6 г 17 а-этилированного

15 производного стадии А в 29 мл этанола, а также 9,6 мл этилортоформиата, 0,048 г и-толуолсульфоновой кислоты и 1 мл триэтиламина, Получают 7,1 r чистого енольного эфира, 20 выход 68%.

ИК-спектр, см; 1700 (карбонил в 20)

1650 и 1620 (двойные связи в 3 и 5).

УФ-спектр: ). 243 нм, к =18520, Спектр ЯМР:(Q, 2Н) 3,7 ppm для CH эток25 си,($,3H)2,3 ppmдля СНзв 21, (S, 1Н) 5,2 pprh для Н в Сб,(S, 1Н)5,8 ppm для Н в С4, Стадия С, 3-Этокси-6-формил-17 а-этил20-оксо-19-норпрегна-3,5-диен.

Проводят формилирование, как на ста30 дии D примера 1. Реактив формилирования .: 0,5 мл РОС!3 в 4,5 мл диметилформамида, гидролизующий раствор: 2 г ацетата калия в

40 мл воды, Исходя из 1 г 3-этокси-17 а-этил-20-ок35 со-19-норпрегна-3,5-диена, получают 1,18 г сырого 6-формилированного производного, которое в результате хроматографии дихлорметаном на силикате магния дает 0,7 r (выход 65О/) чистого 3-этокси-6-формил17 а-этил-20-оксо-19-норпрегна-3,5-диена, макс 323 и 220 нм

Стадия D 3,20-Диоксо-б-метилен-17 а

-атил-19-норп регна-4-ен.

Готовят б-метиленированное производное, исходя из 6-формилированного производного со стадии С, путем той же методики, описанной в примере 1 стадии Е. исходя из

0,5 г 3-этокси-6-формил-17 а -этил-20-оксо19-норпрегна-3,5-диена в 65 мл этанола и

0,419 r борогидрида натрия с последующим . гидроливом и дегидоатацией 8 мл 2н. серной кислоты и 55 мл воды. Выделяют . 4,4 r 6-метиленированного производного с выходом 76%. Этот продукт содержит небольшие количества промежуточного б-гидроксиметилированного производного. ИК-спектр, см : 3400, слабая, соогветствует НО, 3080, очень слабая, соответствует

Н2С б-метилена, 1695 (СО в 20), 1660 (СО в 3).

1836379

УФ-спектр: Айзакс 258 нм, Спектр ЯМР: (S, ЗН) 0,7 ppm для СНз-18, (3Г, ЗН) 0,75 ppm для СНз 17 а-этила, (S, ЗН)

2,1 ррах для СНз-21, появление ЗН этилено. soro при 4;95 ppm, 5,17 ppm, 6,10 ppm, 5 (GI) очень слабая при 3,74 ррах, соответствующая СН2 группы этокси гидроксиметилированного продукта, что является свидетельством, с учетом слабой полосы

ИК-спектра при 3400 см, присутствия не- 10 которого количества гидроксиметилированного стероида.

Стадия Е: . 3,20-Диоксо-б-метил-17 аЭтил-19-норпрегна-4,6-диен (соединение формулы 1). 15

Нагревают с обратным холодильником суспензию, образованную 5,5 г палладированного угля в 820 мл этанола, в течение

60 мин, Затем добавляют 4,1 г 3,20-диоксо6-метилен-17 а-атил-19-норпрегн-4-ена и 20 следят за иэомеризацией с помощью УФспектрометрического контроля. После 8 мин реакции максимум смещается к 288 нм. Реакцию останавливают, фильтруют суспензию и фильтрат высушивают досуха, 25

Получают 3,65 r сырого 6-метилированного продукта. Его очищают хроматографическим методом на 30-кратном количестве кремнезема и проводят кристаллизацию в метаноле, 30

Сырой продукт плавится при 162 С, (а)о

+О (с=1,26%-диокса на).

ИК-спектр, см: 1695(СО в 20), 1660(СО в Э), 1662, 1579 (Л-4,6).

УФ-спектр: смаке 228,5 нм, e= 25880, 35

Масс-спектр (m/е): 340 молярная масса, 297 (М-43) потеря СОМе 268 (М-72) потеря

СОМе и Et.

Найдено,%: С 81,34; Н 9,41; О 9,24.

С23 Н32 О 2

Вычислено,%: С 81,13; Н 9,47; О 9,40.

Пример 4. 3,20-Диоксо-6,21-диметил17 а-этил-19-нор п регна-4,6-диен.

Стадия А. 3-Метокси-17 а-ацетил-17 рацетокси-астра-1,3,5 (10)-триен, 45 . Добавляют 1250 мл катионообменной смолы типа полистиролсульфон в 4 л воды.

Суспензию перемешивают в течение 12 ч, фильтруют и снова суспензируют смолу в

3,5 л воды. Затем добавляют 50 г ацетата 50 ртути и 1 мл уксусной кислоты и перемешивают в течение 60 мин. Фильтруют и обильно промывают смолу водой, 100 мл ртутной смолы отбирают и суспендируют в растворе

100 г ацетата местранола, 50 мл диоксана и 55

1500 мл этанола. После 20 мин перемешивания добавляют 20 мл воды и нагревают с обратным холодильником 15 ч, Реакционную смесь фильтруют в горячем состоянии и промывают этанолом, Фильтрат выпаривают досуха и остаток перекристаллизовывают этанолом, Получают 83 г (выход 79%) чистого 3-метокси-17 а -ацетил-17 Р -ацетокси-астра-1,3,5 (10)-триена, ИК-спектр, см: исчезновение полос при 3265 и 2100 (С=С-Н), появление полосы при 1709 (СО в 17 а).

Стадия В, 3-Метокси-17 а -атил-20-оксо-19-нор и регна-1,3,5 (10)-трие н.

Готовят раствор 3,75 г.лития в 800 мл жидкого аммиака под аргоном и ри температуре -60 С. Добавляют затем раствор 50 г

3-метокси-17 а-ацетил-17 Р-ацетокси-эстра1,3,5 (10)-триена в 750 мл тетрагидрофурана. После 3 ч перемешивания добавляют за

20 мин 270 мл этилйодида и перемешивают в течение 2 ч.

Испаряют аммиак на горячей водяной бане под вакуумом, реакционную среду нейтрализуют добавлением разбавленной соляной кислоты, и затем экстрагируют водную фазу хлористым метиленом. После разделения и выпаривания органического раствора получают 40 г сырого продукта(выход 87% от теоретического). Продукт снова нагревают с обратным холодильником в смеси 400 мл метанола и 60 мл хлористого метилена.

После частичного концентрирования смеси и испарения получают 34 г чистого

3-метокси-17 а-этил-20-оксо-19-норпрегнина-1,3,5-(10)-триена с выходом 74%, ИК-спектр, см, исчезновение полосы

1738, 1268 и 1240 (ацетокси).

Стадия С. 3-Метокси-17 а-этил-20-оксо21-метил-19-норпрегна-1,3,5 (10)-триен., В атмосфере азота при 0 С готовят раствор 1 мл диизопропиламина и 6,5 мл безводного тетрагидрофурана, затем добавляют по каплям 4 мл раствора метиллития с 5% простого эфира, После 5 мин перемешивания добавляют раствор 1 r 3-метокси-1.7 а-этил-20-оксо-19-н ори регна-1,3,5 (10)-триена в 22 мл безводного тетрагидрофурана по каплям,.Доводят температуру раствора до комнатной и продолжают перемешивание в течение 80 мин, охлаждают затем до 0 С. Добавляют при энергичном перемешивании 2 мл метилйодида сразу и продолжают перемешивание в течение 2 ч при комнатной температуре, Образуется осадок беловатой соли, которую отделяют фильтрованием.

Фильтрат испаряют досуха, экстрагируют толуолом. Толуольный раствор промывают водой, высушивают и выпаривают досуха. Получают 1 г сырого 17 а-этил-2117

1836379 метилированного производного с выходом

96%, который очищают затем перекристаллизацией в 20 мл метанола. получают 0,8 г (выход 77%) 3-метокси-17 а-атил-20-оксо21-метил-19-норпрегна-1,3,5 (10)-триена, 5

Вычислено,%; С 81.31; H 9,37; 09,03.

Найдено, %: С 81,46; H 9.66; О 8,87.

С24 НЭ4 Н2

Спектр ЯМР: (Q, ЗН) 0,65 ppm для СНз в

17, (Т, ЗН) 0,75 ppm для СНз в 17 а-этило, (Т, 10

ЗН) (1,10 ppm для СНз в 22, (Dg, 2Н) при 2,42

ppm для СН2 в 21, (S, ЗН) при 3,78 ppm для

СНз в метокси.

Стадия Д, 3,20-Диоксо-17 а-этил-21-метил-19-норп регна-4-ен. 15

При -50 С и в атмосфере аргона добавляют раствор 172 r 3-метокси-17 а-атил-20оксо-21-метил-19-норп ре гна-1,3, 5(10)-триена в 1750 мл безводного тетрагидрофурана с 3000 мл аммиака. Добавляют 20 затем с интервалом в 30 мин при перемешивании 3 раза 90 мл этанола и 17,2 r лития.

После 60 мин перемешивания удаляют аммиак на горячей водяной бане под вакуумом, 25

Затем добавляют 13 л воды и перемешивают смесь в течение 2 ч. Нерастворенное вещество отделяют фильтрацией и фильтрат промывают до нейтральной реакции, Разбавляют 300 мл метанола, добавляют 4н, 30 раствор соляной кислоты до рН 2 и поддерживают при перемешивании 2 ч, При добавлении воды осаждается стероид и его отделяют фильтрацией. Получают 145 r сырого продукта, ИК-спектр которого показы- 35 вает полосы ОН, СО сопряженные и С=С сопряженную связь, который поглощает

1960 мл ацетона и окисляют 114 мл реактива

Джонса.

После 20 мин перемешивания добавля- 40 ют 400 мл метанола и 4000 мл воды. Стероид экстрагируют хлористым метиленом и очищают хроматографически на колонне с кремнеземом. Выделяют 84 г 3,20-диоксо-17 а-атил-21-метил-19-норпрегна-4-ена 45 с выходом 54%. Кристаллизация изопропиловым эфиром дает чистый продукт.

И К-спектр, см,: 1705 (СО в 20, 1680 (СО в 3, 1620 (Л-4 ).

Масс-спектр (m/е):343 малярная масса, 50

285 потеря COCzHs.

Спектр ЯМР; исчезновение пика (S, 3Н) при 3,7 ppm (СНз в метокси) и пиков при 7,2

ppm (ароматическое ядро).

Стадия Е. 3-Этокси-17 а-этил-21-метил- 55

20-оксо-19-нори ре г на-3,5-ди е н.

Проводят енольную .этерификацию 5 г

3,21-диоксо-17 а-этил-21-метил-19-норпрегна-4-ена s 10 мл этанолэ с 5 мл этилортоформиата и экстрагируют бензолом с 1% триэтиламина.

Хроматография на глиноземе основного характера: с растворителем бензолом дает 4,8 г енольного эфира с выходом

89%;

ИК-спектр, см-1; исчезновение 1680 (CÎ в 3), появление 1640 (Л-5), Масс-спектр (m/е): 370 малярная масса, 342 потеря CsH4, 285 потеря С2Н4 и СОСрНя.

Спектр ЯМР: (Т, 3Н) l,3 ppm для СНз в этокси, (массив, 2Н) 3,7 ppm при СН2 в этокси, (S, 1Н) 5.7 ppm для Н в Сб, (S,1Н) 5,8 ppm для Н,в С 4.

Стадия F. 3-Этокси-6-формил-17 а-этил21-метил-20-оксо-19-норп регна-3.5-диен.

Проводят формилирование 12,5 г 3зтокси-17 а-этил-21-метил-20-оксо-19-норпрегнэ-3,5-диена в 87,5 мл диметилформамида с реактивом формилирования, состоящим из 6,25 мл РОС!з и 37,6 мл диметилформамида. Гидролиз имониевой соли проводится добавлением трех последовательных порций оаствора 37,5 r ацетата калия в воде, Продукт реакции окрашен в желтый цвет. Кристаллы отделяют фильтрацией, высушивают и получают 12,75 r сырого продукта (выход 95% от теоретического).

ИК-спектр, см.: полоса 1699 (СО в 20), полоса 1651 и 1610 (С-О сопряжение), Масс-спектр (m/e): 398 молярная масса, 341 потеря СОС2Н5, Спектр ЯМР:(S, 1Н) при 6,20 ppm этиленовая, появление (S, 1Н) при 10,25 ppm для (СНО), Стадия G. 3,20-Диоксо-б-метилен-17 аэтил-21-метил-1 9-нор и ре гн а-4-е н.

При выдерживании на ледяной бане добавляют 40 мг борогидрида натрия в растворе 0,5 г 3-этокси-б-формил-17 а-этил20-оксо-21-метил-19-норпрегнэ-3,5-диена, растворенного в 3,8 мл метанола и 2,2 мл диметилформэмида. Доводят смесь до комнатной температуры, выдерживают в течение 40 мин при перемешивании. УФспектр указывает на смещение максимума при 250 нм.

Затем добавляют при 0 С 1 мл 2 н. раствора серной. кислоты и 0,8 мл диметилформамида. После 30 мин перемешивания нейтрализуют дббавлением 2,5 мл водного раствора карбоната натрия. Закристаллизовавшееся в среде 6-метиленовое производное фильтруют и обильно промывают водой.

Ьчакс наблюдается при 262 нм.

Стадия Н. 3,20-диоксо-6,21-диметил-17 а-этил-19-норп регна-4,6-диен (с оед пение формулы I).

1836379

Проводят изомеризацию 5 r сырого 6метиленового производного в 245 мл этанола с 5 r палладированного угля с обратным холодильником, После 25 мин перемешивания УФ-спектр указывает на присутствие 5 максимума при 288 нм. Фильтруют на фильтре Кларсель и концентрируют фильтрат досуха. Остаток очищают хроматографическим методом на 60-кратном количестве кремнезема с дихлорметаном в качестве 10 растворителя. Продукт перекристаллизованный из метанола дает чистый 3,20-диоксо6,21-диметил-17 а-атил-19-норпрегна-4,6диен, т.пл. 180 С, (а)р 4;4 (с=1,26 Д диоксана), 151

Найдено, 7;. С 81,84; Н 9,75; О 8,59.

С24 Н34 02

Вычислено, ; С 81,31; Н 9,67; О 9,03.

ИК-спектр, см : 1700 (СО в 20), 1660 (СО в 3), 1630, 1580 (Л-4,6).. gp

Спектр ЯМР: (S, ЗН) 0,70 ppm для СНз—

18, Т, ЗН) 0,75 ppm для СНз в 17 Q-этила, (T, 3H) 1,05 ppm СНз-21, (Dg) 2,40 ppm для CHz21, (gg, ЗН) 1,.85 ppm при СНз в Сб, (S, 1Н)

5,96 ppm при Н в С 7, (S, 1Н) 6,05 ppm для Н 25 в С4.

Исследование фармакологических свойств предлагаемых соединений.

Изучение относительного сродства.

Были сделаны попытки определить для ре- 3р цептора прогестерона сравнительную эффективность каждого стероида по сравнению с эталонным веществом (холодный прогестерон), Прогестерон, маркированный углеро- 35 дом С, инкубировали с цитозолом матки, 14 один или в присутствии нарастающих концентраций холодного стероида (включая немаркированный прогестерон) так, чтобы отношение R изменялось от 1 до 1000 между 40 двумя веществами.

В табл.1 приведено количество в процентах маркированного прогестерона, связанного с рецептором в присутствии.холодного прогестерона. 45

Соединение D-17 а-ацетокси-6,21-диметил-3-оксо-19-норпрегна-4,б-диен, соединение А-3,20-диоксо-6,17 а-диметил-19норпрегна-4,б-диен, соединение  — 3,2-диоксо-б-метил-17 Q-атил-19-норпрегна-4,6- 50 диен, соединение С вЂ” 3,20-диоксо-6,17 а-20-триметил-19-норпрегна-4,6-диен.

Данные табл.2, позволяют вычислить относительное сродство (AR), это — отношение между концентрациями 507;-ного ингибирования (CI50) данного стероида и холодного специфического гормона, взятого для сравнения (CIM.n) прогестерона, AR = —

Clso cp

Это относительное сродство выражается, таким образом, в процентах, при этом для гормона (или стероида) сравнения AR равно 100 .

С!щ позволяют сделать расчет К!(константа.ингибирования) исследуемых стероидов при связывании стероида сравнения.

Измерения AR дают, таким образом, следующую посл едовател ьность; соединение В>ацетат номегестрола > соединение А> прогестерон > соединение

С>номегестрол.

Шесть изученных продуктов принадлежат.к серии производных ацетата номегестрола.

Рассмотрим два типа продуктов: алкилы в положении 17 а; удлинение цепи в положении 21 метилированием, Группы 17 а-метил (соединение А), 17 а-атил (соединение В) и 17 а-ацетокси, как в ацетате номегестрола, дают молекулы, сродство которых к прогестативному рецептору равно сродству прогестерона и эквивалентно сродству медроксип рогестерона.

Но разница в сродстве, наблюдаемая на этой стадии исследований, обнаруживают иерархию между этими тремя продуктами.

Напротив, номегестрол имеет ту же боковую цепь в положении 17 /3, что и три изученных йродукта (соединение А, соединение В и ацетат номегестрола), но, обладая гидрокси лом в положении 17 а, обнаруживаетуменьшенное сродство, от 40 до 60 раз более слабое, чем три указанных продукта.

Принимая AR-1 для ацетата номегестрола как эталона, можно построить таблицу значений, переходя через ацетат номегестрола от 1,20 для соединения В и 0,81 для соединения А до 0,45 для соединения С.

Результаты приведены в табл,3, Предлагаемые соединения не обладают никакой экстрагормональной токсичностью, Для одного и того же заместителя в положении 17 а удлинение цепи в положении

21 приводит к уменьшению сродства к прогестативному рецептору, Однако следует отметить, что уменьшение-сродства к рецептору 1п vitro не означает возможного уменьшения активности биологической In vivo.

Действительно, если структурная модификация приводит к уменьшению сродства,. она может тем не менее сопровождаться улучшенным биораспределением (затрудненное разрушение, выраженный энтерогепатический цикл. пониженная секвестрация

1836379

СН Он

0

К1

СН

СН

Р,1

55 40

СНО плазматических протеинов), что может приводить к увеличению псевдогестерогенной активности, Исходя из того, что наиболее слабое относительное сродство группы алкильных производных согласно изобретению имеет порядок 60;, и из исследований замещения гидроксильной группы в положении 17 0

I цепью низшего алкила, было сделано заключение, что моно- или бис-алкилирование

6-метил-19-норпрегнадиенов приводит к повышенной прогестативной активности.

Формула изобретения

1, Способ получения 17 Q-алкилированных б-метил-19-норпрегна-4,6-диенов общей формулы I -Р1

СН

3 бнз где Ri u Rz — идентичные или различные, водород или низший С1 — Сз-алкил, R3 низший С1 Сб алкил, отличающийся тем, что производное

3-оксо-19-норпрегна-4-ена общей формулы

II 1

CH 2 где R 1, R г и R з имеют указанные значения, подвергают енольной этерификации в кислой среде до образования енольного эфира общей формулы ill где R i, R z u R з имеют указанное значение;

R 4 — низший алкил, который формилируют агентом типа Вильсмайера-Хэка для получения 6-формилиро- ванного производного общей формулы IV .

CH

1 где R1. Rz. Rç и Кб имеют указанные значе ния. которое восстанавливают смешанным гидридом щелочных металлов до образования гидроксиметилированного и роизвпдного обшей Формулы V — Р1

CH

Ц

2 где R1, Rz, R з и Ra имеют указанные значения," которое обрабатывают минеральной или органической кислотой и получают 3-оксо-6метилированное производное общей формулы И 1

СН

25 СН2 где R R z и Кз имеют. указанные значения, которое. в свою очередь, обрабатывает катализатором иэомеризации для получения

6-метиллированного производного, соответствующего общей формуле I, 2, Промежуточные соединения общей формулы II

CH 1

0 3

40 где R 1 и R z низший С1-Сз-алкил;

R з — низший С1-С -алкил, кроме значений метил или атил, в качестве промежуточных соединений в синтезе соединений общей формулы I.

3. Промежуточные соединения общей формулы III где Ri u Rz — идентичные или различные водород или С1 Сз алкил;

Яз — низший С1 — Сб-ал ки л:

R 4 — низший алкил, в синтезе соединений общей формулы 1, 24

1836379 общей где Rt u Rz — идентичные или различные, водарад или низший С1 — Сз-алкил, R 1 — низший C> — С -алкил.

R 4 низший алкил, 5 в синтезе соединений общей формулы 1, СН0 где R> и Rz — идентичные или различные 10 водород или низшиЙ С1 — Сз-элкил; йз — низший С1 — Се-алкил;

R 4 — низший алкил, в синтезе соединений общей формулы!.

5. Промежуточные соединения общей 15 формулы V

CH 1

Я

О где R> и Rz — идентичные или различные, водород или низший С вЂ” Сз-алкил;

2(} R3 — низший С3 Сб-длкил, в синтезе соединений общей формулы l, сн он

Таблица 1

Таблица 2

4. Промежуточные соединения формулы IV 1

CH 2

6. Промежуточные соединения общей формулы И

Таблица 3

Составитель И, Федосеева

Техред M.Моргентал. Корректор С. Юско

Редактор

Производственно-издательский комбинат Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 3005 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СCCP

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5