Способ получения ферментного препарата каталазы
СПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Секта Советских
Свциалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Кл. 6а, 22/04
Заявлено 27 1Ч.1966 (№ 1072521/28-13) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 04 Ч.1967. Бюллетень № 10
Дата опубликования описания 15Х1.1967
МПК С 12k
Комитет по делам иаобретеичй и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 663.11.576.8.093.1 (088.8) Авторы изобретсния
Е. И. Лебедева, Л. Ш. Левина, В. A. Витковская, В. А. Вакуленко, T. Н. Лаврищева и Г. А, Гаврилова
Украинский научно-исследовательский институт спиртовой и ликеро-водочной промышленности
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТН01 О ПРЕПАРАТА КАТАЛАЗБ1
Известен способ получения ферментного препарата каталазы из культуральной жидкости плесневого гриба Penicillium vitale Pidopl.
et Bilai, который продуцирует каталазу. По такому способу . каталазу выделяют путем дробного осаждения спиртом, и получаемую каталазу, содержащую примесь глюкозооксидазы, также продуцируют плесневым грибом.
Предлагаемый способ позволяет получить каталазу, не содержащую примесь глюкозооксидазы.
С этой целью каталазу адсорбируют на окиси алюминия из культуральной жидкости гриба Penicillium vitale Pidopl. et Bilai npu рН 3,5 — 4,2, затем отделяют окись алюминия с адсорбированной на ней каталазой, например, фильтрацией, и выделяют каталазу одним из известных способов, например элюцией н осаждением спиртом.
Из культуральной жидкости, оставшейся по- 20 сле отделения окиси алюминия с адсорбированной на ней каталазой, можно выделить ферментный препарат глюкозооксидазы одним из известных способов.
Способ получения ферментного препарата каталазы заключается в следующем.
К культуральной жидкости плесневого гриба Penicillium vitale Pidopl. et Bilai, продуцирующего каталазу и глюкозооксидазу, после отделения мицелия добавляют безводную 30 окись алюминия в два приема с интервалом
15 мин при перемешивании из расчета 10 вес.
% на объем жидкости.
При рН культуральной жидкости 3,5 — 4,2 каталаза сорбируется окисью алюминия, которая вместе с каталазой отделяется от культуральной жидкости фильтрацией. Фильтрат, содержащий глюкозооксидазу, используют для извлечения ее одним из известных способов.
Каталазу, адсорбированную на окиси алюминия, выделяют, например, элюцией. Элюцито каталазы осуществляют 0,1 тт фосфатным буфером с рН, равным 6,8 — 7,0, дробно, тремя порциями элюэнта, при интенсивном перемешивании. Первая порция составляет 80 об. % от веса окиси алюминия, две последующие—
40 об. %.
Окись алюминия отделяют фильтрованием и регенерируют. Из элюэнта каталазу осаждают равным объемом изопропилового спирта при комнатной температуре. Осадок каталазы от спиртового маточника отделяют центрифугированием, после чего препарат направляют на вакуум-сушку.
Активность ферментных препаратов каталазы 200000 — 600000 ед/г. Выход фермента каталазы составляет 80 — 85%.
KaTaëàçà Penicillium vitale обладает ценными технологическими качествами: термостабильна до 60 С, активна в широком диапазоне
195414
Предмет изобретения
Составитель Г. Лошкарева
Редактор Э. Н. Шибаева Текред T. П. Курилко Корректоры. Г. И. Плешакова и Н. И. Быстрова
Заказ 1678/6 Тираж 535 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2 рН от 2,5 до 9,0, имеет высокую начальную скорость действия — так называемый «взрывной эффект».
1. Способ получения ферментного препарата каталазы из культуральной жидкости плесневого гриба PeIIIcillium vitale Pidopl. et Bilai, являющегося продуцентом каталазы, отличаюи ийся тем, что, с целью получения каталазы, не содержащей примесь глюкозооксидазы, продуцируемой одновременно с каталазой этим же грибом, каталазу адсорбируют на окиси алюминия при рН культуральной жидкости
3,5 — 4,2, затем отделяют окись алюминия с адсорбированной на ней каталазой, например фильтрацией, и последнюю выделяют одним
5 из звестнь cIIocoooB, напри ер э. Юц ей и осаждением спиртом.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что,: целью получения ферментного препарата глю10 козооксидазы, последнюю выделяют из культуральной жидкости (фильтрата), оставшейся после отделения окиси алюминия с адсорбированной на ней каталазой, одним из известных способов.
