Способ производства витамина d3 -белкового препарата "видеин"

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к производству витаминных препаратов в таблетированной форме. Получаемый препарат используется для профилактики и лечения Д-гиповитаминоза и рахита у детей. Цель изобретения - повышение активности и стабильности препарата путем улучшения качества очистки. Для достижения цели казеин предварительно очищают путем растворения в щелочи, осаждения уксусной кислотой, грануляции и сушки, в качестве витамин D₃-содержащего препарата используют видехол, который смешивают с витамином Е в соотношении 1 : 1, растворяют в спирте, после сушки витамин D₃-белковый комплекс смешивают с сахарным гранулятом, полученным путем увлажнения сахара поливинилпирролидоном в соотношении /18,6 - 22/ : 0,11, и стеариновокислым кальцием в соотношении соответственно /5 - 2/ : /18,6 - 22,0/ : 0,24, и полученную массу таблетируют. 2 табл.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к производству витаминных препаратов в таблетированной форме. Получаемый согласно изобретению препарат используется для профилактики и лечения Д-гиповитаминоза и рахита у детей и разных форм костных патологий.

Известен лабораторный способ получения комплекса на основе жирорастворимых витаминов и белка, где казеин растворяют в щелочи, а витамины (например, Д₂, Д₃, А, Е) в органическом растворителе, в который предварительно вводят ледяную уксусную кислоту. После смешивания полученных растворов выпавший осадок, представляющий собой витамин-белковый комплекс, центрифугируют, сушат, измельчают. Полученные комплексы содержат до 2% витаминов Д₂ и Д₃, до 6% витамина А и до 8% витамина Е.

Известен производственный способ получения витамин Д-белкового препарата видеин для сельского хозяйства, где растворенный в щелочном растворе казеин смешивают со спиртовым концентратом витамина Д₃. Полученный комплекс осаждают уксусной кислотой, фильтруют, измельчают и сушат. Выход витамина Д₃ составляет 87,8% активность 200000 МЕ на 1 г сохраняется в течение 0,5 года. Однако известный способ обладает рядом недостатков: в качестве активного начала используют спиртовый концентрат витамина Д₃, который содержит около 12% примесей в виде промежуточных продуктов получения витамина Д₃, например 7-дегидрохолестерин, люмистерин и ряд продуктов окисления. Получаемый препарат может использоваться только в качестве кормовой добавки для сельского хозяйства.

Целью изобретения является повышение активности и стабильности препарата путем улучшения его очистки.

Для достижения цели в способе производства витамин Д₃-белкового препарата, где казеин растворяют в щелочи, а витамин Д₃-содержащий препарат в спирте, смешивают оба раствора, осаждают уксусной кислотой, центрифугируют, гранулируют и сушат, дополнительно осуществляют следующие операции: казеин предварительно очищают путем растворения в щелочи, осаждения уксусной кислотой, грануляции и сушки; в качестве витамин Д₃-содержащего препарата используют видехол (фармакопейная статья ФС-42-20-5383), представляющий собой смесь витамина Д₃ и холестерина; видехол и витамин Е в соотношении 1:1 растворяют в этиловом спирте; приготовляют сахарный гранулят путем увлажнения сахара поливинилпирролидоном в соотношении (18,6-22,0):0,11; массу для таблетирования получают путем смешивания витамин Д₃-белкового комплекса, сахарного гранулята и стеариновокислого кальция в соотношении соответственно (5-2):(18,6-22,0):0,24; полученную смесь таблетируют под прессом.

Выход витамина Д₃ 98,6-99,0% В одной таблетке полученного препарата (20 или 50 мг субстанции) содержится 2 или 5 тыс. МЕ витамина Д₃ (из расчета 100 тыс. МЕ на 1 г). Препарат сохраняет 100% активность в течение 2,5 лет и 95-90% активность в течение 3-4 лет.

Предложенная технологическая схема, условия и режимы операций позволяют получить высокоочищенный препарат для применения в медицине.

Способ иллюстрируется примерами конкретного выполнения. Общая схема способа включает три основных этапа: предварительная очистка казеина; получение витамин Д₃-белкового комплекса; получение таблетированной формы препарата "Видеин".

Конкретизация качественного и количественного состава для поэтапного осуществления способа показана в табл.1 в примерах 1-6.

I. Предварительная очистка казеина.

Реактор с мешалкой и нагревателем заполняют дистиллированной водой при 40^оС и добавляют гидроокись натрия до конечной концентрации 0,2 ± 0,05% Затем вводят казеин до концентрации 3-3,5% перемешивают до полного растворения в течение 20-30 мин при 40^оС. Фильтруют через два слоя хлопчатобумажной ткани. Осаждают казеин в реакторе при работающей мешалке в течение 1-2 мин ледяной уксусной кислотой до достижения рН 4,5-4,6. После отстаивания в течение 10 мин осадок фильтруют, промывают 2-3 раза дистиллированной водой. Жидкость снова центрифугируют, полученный осадок пропускают через сито 1,0-2,0 мм и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 45 ± 1^оС в течение 4 ч.

II. Получение витамин Д₃-белкового комплекса.

В реакторе очищенный казеин растворяют в гидроокиси натрия до конечной концентрации 3-3,5% Выход казеина составляет 98 ± 2% Фильтруют через два слоя хлопчатобумажной ткани. Видехол берут из расчета 0,0025 кг витамина Д₃ на 1 кг казеина. Альфа-токоферол ацетат (витамин Е) берут в равном количестве 0,0025 кг. В мернике со спиртом растворяют соответствующие навески витаминных препаратов и смешивают с уксусной кислотой. Приготовленную витаминную смесь вводят тонкой струей в реактор и перемешивают с очищенным казеином в течение 1-2 мин при температуре не выше 40^оС. Смесь отстаивают, фильтруют. Осадок промывают дистиллированной водой, центрифугируют для обезвоживания полученного витамин Д₃-белкового комплекса. Комплекс гранулируют через сито с диаметром отверстий 1-2 мм и сушат при температуре не выше 45^оС при перемешивании. Высушенный препарат измельчают, просеивают через сито с диаметром отверстий 0,3 мм.

III. Получение таблетированной формы препарата "Видеин".

Сахарный гранулят получают путем смешивания измельченного сахара с 10% поливинилпирролидоном, просеивают через сито (ячейки диаметром 1 мм), просушивают на воздухе до остаточной влажности 0,15% Сухой гранулят снова просеивают через это сито. В смеситель загружают сахарный гранулят (диаметр частиц 1 мм), витамин Д₃-белковый комплекс, кальция стеарат и перемешивают до получения однородной массы в течение 15-20 мин. Таблетирование осуществляют на роторном таблеточном машино-прессе РТМ-12. Получаемые таблетки имеют плоскоцилиндрическую форму с диаметром 8 ± 0,2 мм и средней массой 0,24 ± 0,01 г. Готовые таблетки препарата "Видеин" расфасовывают в контурные ячейковые упаковки по 10 мг. Активность препарата по витамину Д₃ 2000 МЕ (субстанция массой 20 мг) или 5000 МЕ (субстанция массой 50 мг). Выход витамина Д₃ 98,6 ± 0,2% П р и м е р 7. Биологическую активность препарата "Видеин" изучают на крысах-отъемышах массой 30-40 г, которых разделяют на 5 групп по 5 животных и содержат в течение 30 дней на витамин Д-дефицитной диете. Отрицательным контролем (I группа) служит группа животных, которая получает только витамин Д-дефицитную диету (рахит); II группа животных получает 10 МЕ витамина Д₃ в масле; III группа получает 10 МЕ витамина Д₂ в спирте. Животные IV и V групп получают препарат "Видеин" в дозах 10 МЕ и 5 МЕ витамина Д₃ соответственно. Препараты витамина Д вводят перорально с помощью зонда.

Учитывая, что биологическая и лечебная эффективность препаратов группы витамина Д связана с наличием в организме их биологически активных метаболитов: 25-оксихолекальциферол (25-ОНД), 24,25-диоксихолекальциферол (24,25-ОНД), 1,25-диоксихолекальциферол (1,25-(ОН)₂Д), во всех исследуемых группах в сыворотке крови определяют содержание указанных метаболитов витамина Д, а также уровень минеральных компонентов и активность щелочной фосфатазы. Полученные результаты представлены в табл.2.

Сопоставление данных показывает, что высокий уровень содержания активных метаболитов витамина Д в сыворотке крови наблюдается у животных, получавших новый препарат "Видеин". Эти данные коррелируют с уровнем минеральных компонентов в сыворотке крови этих животных. Полученные результаты свидетельствуют, что "Видеин" обладает высокой биологической активностью, превышающей активность коммерческого препарата витамина Д₂ в спирте, витамина Д₃ в масле, что является следствием лучшего транспорта данной формы витамина через желудочно-кишечный тракт и уменьшения степени его окисления в организме. При этом в V группе животных, получавших 1/2 дозы видеина, сопоставимы с показателями II и III групп. Следовательно, благодаря высокой биологической активности нового препарата расчетные дозы можно уменьшить вдвое.

Анализ доклинических испытаний показал, что данная форма препарата обеспечивает точность дозирования витамина Д, что в свете последних данных о его физиологической роли в организме и дозозависимости этих процессов очень существенно, а именно передозирование вызывает явления Д-гипервитаминоза (гиперкальциемия), нарушение синтеза белков, липидов, так как витамин Д относится к группе прогормонов.

Кроме того, таблетированная форма обеспечивает возможность применения препарата при желудочно-кишечных заболеваниях и исключает вредное воздействие растворителей витамина Д (спирта и масла растительного) на организм новорожденных детей.

Результаты клинических испытаний применения таблетированного препарата "Видеин" при лечении рахита и рахитоподобных заболеваний у детей, Д-гиповитаминоза у беременных женщин и ряда заболеваний костной системы свидетельствуют о высокой лечебной эффективности препарата, которая выражается в сокращении сроков выздоровления, полной нормализации патологических изменений.

Формула изобретения

1. Способ производства витамин D_з-белкового препарата, включающий растворение казеина в щелочи, а витамин D_з-содержащего препарата в спирте, смешивание обоих растворов, осаждение витамин D-белкового комплекса уксусной кислотой с последующим центрифугированием, гранулированием и сушкой, отличающийся тем, что, с целью повышения активности и стабильности препарата путем улучшения качества очистки, казеин предварительно очищают путем растворения в щелочи, осаждения уксусной кислотой, грануляции и сушки, в качестве витамин D_з-содержащего препарата используют видехол, который смешивают с витамином Е в соотношении 1 1, растворяют в спирте, после сушки витамин D_з-белковый комплекс смешивают с сахарным гранулятом и стеариновокислым кальцием в соотношении соответственно (5 2) (18,6 22,0) 0,24 и полученную массу таблетируют.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что сахарный гранулят получают путем увлажнения сахара поливинилпирролидоном в соотношении (18,6 22,0) 0,11.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2