5-хлор-2 //([(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил] /сульфинил/) - 1н-бензимидазол или его фармацевтически приемлемая соль, способ получения, фармацевтическая композиция и 5-хлор-2 //([(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил]тио) - 1н-бензимидазол

 

Использование изобретения: в качестве вещества, ингибирующего секрецию желудочной кислоты у млекопитающих. Сущность изобретения: продукт: 5-хлор-[[(3,4-диметокси-2- пиридинил)метил]сульфинил]-IH-бензимидазол или его фармацевтически приемлемая соль. Реагент 1:5-хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил]тио]- IH-бензимидазол. Реагент 2: окислитель. Условия реакции: с выделением, при желании, в виде соли. 1 табл.

Целью изобретения является получение нового соединения и его терапевтически приемлемых солей, которые экзогенно и эндогенно ингибируют чрезмерную секрецию желудочной кислоты и которые таким образом можно использовать для профилактики и лечения пептической язвы.

Изобретение также относится к использованию предлагаемого соединения, особенно его терапевтически приемлемых солей для ингибирования секреции желудочной кислоты у млекопитающих, в том числе человека. В более общем смысле предлагаемое соединение можно использовать для профилактики и лечения воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта и заболеваний, связанных с секрецией желудочной кислоты у млекопитающих, включая человека, например, как гастрит, язва желудка, язва двенадцатиперстной кишки, рефлюкс-эзофагит и ульцерогенная аденома поджелудочной железы. Более того, предлагаемое соединение можно использовать для лечения других желудочно-кишечных патологий, где требуется антисекреторный эффект относительно желудочной кислоты, например у пациентов, страдающих ульцерогенной аденомой поджелудочной железы, и больных с желудочно-кишечными кровотечениями. Его можно также использовать для больных в случаях интенсивной терапии, а также и в до- и постоперационном периодах для предотвращения аспирации кислоты и образования язвы. Предлагаемое соединение можно также использовать для лечения и профилактики воспалительных процессов у млекопитающих, включая человека, особенно процессов связанных с лизозимальными ферментами. К таким заболеваниям, которые можно указать относятся ревматоидный артрит и подагра. Предлагаемое соединение можно также использовать при лечении заболеваний, связанных с нарушениями метаболизма в костях, а также лечения глаукомы.

Изобретение также относится к лекарственным препаратам на основе заявляемого соединения или его фармацевтически приемлемых солей, используемого в качестве активного компонента. В другом аспекте изобретение относится к способам получения указанного нового соединения, нового промежуточного соединения в процессе получения предлагаемого соединения и использованию его в качестве активного компонента в лекарственных препаратах для применения в медицине по показаниям, указанным выше.

Цель изобретения получение соединения с высоким уровнем биологической доступности. Предлагаемое соединение также обладает высокой стабильностью при нейтральном рН и высокой активностью относительно ингибирования секреции желудочной кислоты.

Биодоступность определяется как часть или процентная доля вводимой дозы соединения, которая проникает в кровеносную систему, не претерпевая изменений. Эффективность в данной заявке определяется как показатель ЕД₅₀.

Производные бензимидазола, предназначенные для ингибирования секреции желудочной кислоты, раскрыты в многочисленных патентных документах, среди которых можно указать патенты Великобритании NN 1500043, 1525958, США 4182766, 4255431, 4599347, 555518, 4727150, 4629098, Европатент N 208452 и реферативный журнал Дервента 87 294449/42. Производные бензимидазола, предлагаемые для лечения и профилактики воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта, раскрыты в патенте США N 4539465.

Соединения, раскрываемые в указанных патентах, являются эффективными ингибиторами кислотной секреции, и таким образом их используют в качестве противоязвенных веществ.

Для дополнительного повышения эффективности этого типа лекарств требовалась более высокая биологическая доступность, и более того указанные соединения должны иметь высокую активность при ингибировании секреции желудочной кислоты, а также высокую химическую стабильность при нейтральном показателе рН.

В ходе испытаний установлено, что 2-[(2-пиридинилметил) сульфинил]-IH-бензимидазолы обнаруживают сильный разброс в биологической доступности, а также активности и стабильности, и трудно установить соединения, имеющие все эти три свойства. В известных технических решениях нет никаких данных относительно способа получения соединений с вышеуказанной комбинацией свойств.

Предлагаемое соединение, как установлено, проявляет чрезвычайно высокую биологическую доступность, и в то же время оно очень эффективно в качестве ингибитора секреции желудочной кислоты и демонстрирует высокую химическую стабильность в растворе при нейтральном рН. Таким образом, предлагаемое соединение можно использовать при вышеприведенных симптомах заболеваний у млекопитающих, включая человека.

Предлагаемое соединение представляет собой 5-хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил] сульфинил]-IH-2-бензимидазол, (соединение I) и его физиологически приемлемые соли.

Предлагаемое соединение содержит асимметрический центр при атоме серы, т.е. существует в виде двух оптических изомеров (анантиомеров).

В объем изобретения входят оба этих чистых анантиомера, рацематы (содержащие по 50% каждого из указанных энантиомеров) и неравновесные смеси обоих. В объем изобретения входят также 4 синтетических промежуточных соединения и способ получения.

Получение.

Предлагаемое соединение можно получить в соответствии с нижеследующим способом.

Осуществляют окисление 5-хлор-2-[[(3,4- диметокси-2-пиридинил)-метил] тио] -IH-бензимидазола (соединение (II) с получением предлагаемого соединения. Окисление можно проводить с использованием окислителя, например как азотная кислота, перекись водорода (возможно в присутствии соединений ванадия), надкислоты, эфиры надкислот, озон, азотноватый ангидрид, иодозобензол, N-галоидзамещенный сукцинимид, 1-хлорбензотриазол, трет-бутил-гипохлорит, диазабицикло[2,2,2] октановый комплекс брома, метаперйодат натрия, диоксид селения, диоксид магния, хромовая кислота, нитрат церийаммония, хлористый бром, хлор или сульфурил. Окисление обычно проводят в растворителе, например галоидзамещенных углеводородах, спиртах, простых эфирах, кетонах.

Реакцию окисления можно также проводить ферментативным методом с использованием окисляющего фермента или микробиологически с использованием подходящего микроорганизма.

В зависимости от условий проведения процесса и исходных материалов предлагаемое соединение получают либо в виде нейтрального соединения, либо в виде соли. В объем настоящего изобретения включены как нейтральное соединение, так и соли его. Таким образом, можно получить основные, нейтральные или смешанные соли, а также и геми-, моно-, сескви- или полигидраты.

Щелочные соли предлагаемого соединения представлены его солями с Li⁺, K⁺, Mg²⁺, Ca²⁺ и N⁺(R)₄, где R означает С_1-4 алкил, Особенно предпочтительны соли с катионом Na⁺, Ca²⁺ и Mg²⁺. И наиболее предпочтительны соли с катионом Na⁺ и Mg²⁺. Такие соли можно получить при взаимодействии соединения изобретения с основанием, способным отдавать требуемый катион. Ниже приведены примеры таких оснований и примеры реакционных условий.

а) Соли, в которых катионом является Li⁺, Na⁺ или K⁺, получают путем обработки предлагаемого соединения LiOH, NaOH или КОН в водной или безводной среде, либо с использованием LiOR, LiNH₂, LiNR₂, NaOR, NaNH₂, NaNR₂, KORKNH₂ или KNR₂, где R означает С₁ C₄-алкил, в безводной среде.

b) Соли, в которых катионом являются Mg²⁺ или Са²⁺, получают путем обработки предлагаемого соединения Mg(OR)₂, Ca(OR)₂ или СаН₂, где R означает С₁ C₄ алкил в безводном растворителе, например спирте (только для алкоголятов), например ROH, либо в простом эфире, например как тетрагидрофуран.

Полученные рацематы можно разделить на чистые энантиомеры. Указанную операцию можно осуществлять известными методами, например, из рацемических диастереоизомерных солей хроматографией или дробной кристаллизацией.

Исходные материалы, раскрываемые в примерах получения промежуточных соединений, можно получить известными способами perse.

Для использования в клинических условиях предлагаемое соединение приготавливают в виде фармацевтических составов для перорального, ректального, парентерального либо других способов приема. Лекарственный препарат включает предлагаемое соединение, как правило, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем. Указанный носитель может быть в форме твердого, полутвердого или жидкого разбавителя, либо в виде капсулы. Указанные лекарственные препараты представляют собой еще один объект настоящего изобретения. Обычно количество активного соединения варьирует от 0,1 до 95 мас. от всего препарата, от 0,2 до 20 мас. в препаратах для парентерального введения, от 0,2 до 50 мас. в препаратах для перорального приема.

При приготовлении фармацевтических составов на основе предлагаемого соединения в виде разовых доз для перорального приема, выбранное соединение можно смешать с твердым, порошкообразным носителем, например как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, амилопектин, производные целлюлозы, желатин, или другим подходящим носителем, стабилизатором, например как щелочными соединениями, например карбонатами, гидроокиси или окиси натрия, калия, кальция, магния и тому подобное, а также с замасливателями, например как стеарат магния, стеарат кальция, стеарилфумарат натрия и полиэтиленгликолевые воски. Гранулы и таблетки можно покрывать энтеросолюбильным и оболочками, защищающими активное соединение от катализированного кислотой разложения до тех пор, пока лекарственная форма удерживается в желудке. Энтеросолюбильное покрытие выбирают среди фармацевтически пригодными материалами для использования в качестве энтеросолюбильной оболочки, например пчелиные воски, шеллачные или анионные пленкообразующие полимеры, например как фталат ацетата целлюлозы, гидроксипропилметил целлюлозы фталат, полимеры на основе неполного метилового эфира метакриловой кислоты и тому подобное, при желании в комбинации с подходящим пластификатором. В указанные покрытия можно вводить различные красители для различения в таблетках и гранулах с различными активными компонентами или с различными дозами имеющегося активного соединения.

Мягкие желатиновые капсулы можно получить с капсулами со смесью, состоящей из активного соединения изобретения, растительного масла, жира или другого носителя, пригодного для мягких желатиновых капсул. Эти капсулы можно также покрывать энтеросолюбильной оболочкой, о которой говорилось выше. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы или покрытые энеросолюбильной оболочкой гранулы с предлагаемым соединением в качестве действующего начала. Твердые желатиновые капсулы могут также включать предлагаемое активное соединение в комбинации с твердым порошкообразным носителем, например лактозой, сахарозой, сарбидом, маннитом, картофельным крахмалом, амилопектином, производными целлюлозы или желатином. Твердые желатиновые капсулы могут быть покрыты вышеуказанной энтеросолюбильной оболочкой.

Лекарственные формы для ректального введения можно приготавливать в виде суппозиториев, содержащих предлагаемое активное соединение в смеси с нейтральным основанием жирного ряда, либо их можно получать в виде желатиновой капсулы, вводимой ректально, содержащей предлагаемое соединение в качестве действующего начала в смеси с растительным, парафиновым маслами или другим носителем, пригодным для получения желатиновых капсул для ректального применения. Указанные лекарственные препараты можно также приготавливать в виде готовой для использования микроклизмы, либо в виде сухого состава для микроклизмы, который перед использованием разбавляют в соответствующем растворителе.

Жидкие препараты для перорального приема можно приготавливать в виде сиропов, суспензий, например растворов суспензий, содержащих от 0,2 до 20 мас. активного компонента, а остальное составляет сахар или его спирты и смесь этанола, воды, глицерина, пропиленгликоля и/или полиэтиленгликоля. При желании, указанные жидкие препараты могут включать красители, отдушки, сахарин и карбоксиметилцеллюлозу, либо другие загустители. Жидкие препараты для перорального приема можно также получить в виде сухого порошка, который перед использованием разбавляют подходящим растворителем.

Растворы для парентерального введения можно получать в виде раствора, содержащего предлагаемое соединение в фармацевтически приемлемом растворителе, предпочтительно при концентрации его от 0,1 до 10 мас. Указанные растворы могут также включать стабилизаторы и/или буферы и их можно выпускать в ампулах или флаконах с различными лечебными разовыми дозами. Растворы для парентерального введения можно также приготавливать в виде сухого препарата, который перед использованием непосредственно разводят подходящим растворителем.

Обычная суточная доза активного компонента зависит от различных факторов, например индивидуальных особенностей каждого больного, способа приема и заболевания. Обычно дозировка для перорального и парентерального введения составляет от 5 до 500 мг активного компонента в сутки.

Пример 1. Получение 5-хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил) метил]-сульфинил]-IH-бензимидазола.

5-хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил] тио] IH-бензимидазола (645 мг, 0,0019 моль) растворяют в 25 мл СН₂Cl₂ и затем перемешивают с NaHCO₃ (323 мг, 0,0038 моль), растворенного в 10 мл воды. Перемешанную смесь охлаждают до 0^oC и обрабатывают МХФМК (МСРВА) (84% 389 мг, 0,0019 моль), растворенной в 6 мл СН₂Cl₂. Через 10 мин образовавшиеся слои разделяют, и водный слой экстрагируют с использованием 5 мл СН₂Cl₂. Органические слои объединяют и экстрагируют 20 мл воды, содержащей NaOH (154 мг, 0,0038 моль). Последний водный слой собирают (остаток СН₂Cl₂ отгоняют на выпарном аппарате) и обрабатывают двумя порциями НСООСН₃)2 x 118 мкл, 0,0038 моль).

Образовавшийся твердый продукт собирают, промывают небольшим объемом воды, охлажденной льдом с выходом 253 мг (38%) чистого продукта в виде белого порошка. Маточный раствор быстро экстрагируют с использованием 20 + 10 мл СН₂Cl₂. Органические слои объединяют, сушат через сульфат магния и после упаривания получают пену, которая после обработки СН₃CN одновременно кристаллизуется. Твердый осадок собирают, промывают небольшим объемом охлажденного льдом СН₃CN с получением еще 225 (34%) чистого целевого соединения. Данные ЯМР анализа приведены ниже.

Пример 2. Получение 5-хлор-2-[[3,4-диметокси-2-пиридинил) метил]сульфинил] -IH-бензимидазола в виде натриевой соли 5-хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил] сульфинил] -IH-бензимидазола (4,1 г, 11,65 ммоль), растворенного в дихлорметане (100 мл), переносят в разделительную воронку. Полученную смесь интенсивно перемешивают до гомогенного состояния, после чего слои растворителя разделяют. Водную фазу промывают дихлорметаном (2 х 25 мл), а затем сушат вымораживанием. Остаток перекристаллизовывают из смеси этилацетат/диэтиловый эфир.

Выход: 3,7 г (86%) названного соединения. Данные ЯМР анализа приведены ниже.

Растворитель I CDCl₃(500 МГц) данные ЯМР δ ч/млн 3,84 (c, 3H), 3,88 (c, 3H), 4,70 (д, 1H), 4,84 (д, 1H), 6,80 (д, 1H) 7,26 (дд, 1H), 7,55 (Д, 1H), 7,58 (д, 1H), 8,16 (д, 1H), Растворитель 2 D₂O (D₂O · 4,82) (300 МГц). Данные ЯМР d ч/мин 3,68 (c, 3H), 3,91 (C, 3H), 4,64 (д, 1H), 4,80 (д, 1H), 7,04 (д, 1H), 7,20 (м, 1H), 7,60 (д, 1H), 7,67 (д, 1H), 8,11 (д, 1H) Получение синтетических промежуточных соединений Пример 1.1. Получение 3,4-диметокси-2-хлорметилпиридина.

3,4-диметокси-2-гидроксиметилпиридин (0,34 г 0,002 моль) растворяют в СН₂Cl₂ (8 мл). Затем к полученному раствору прибавляют SOCl₂ (0,27 г, 0,00227 моль), растворенного в СН₂Cl₂, при перемешивании при комнатной температуре. Через 10 мин полученную смесь нейтрализуют с использованием NaHCO₃ (5 мл). Образовавшиеся фазы разделяют, СН₂Cl₂ фазу промывают раствором NaCl, сушат через Na₂SO₄ и после упаривания получают требуемый продукт (0,61 г, 88%).

Пример 1.2. Получение 5-хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил) метил]тио] -IH2-бензимидазола.

2-хлорметил-3,4-диметоксипиридина гидрохлорид (896 мг, 0,004 моль) растворяют в 25 мл МеОН и обрабатывают NaOH (390 мг, 0,008 моль), растворенной в 1,5 мл воды. Затем прибавляют 5-хлор-2- меркапто-IH-бензимидазола (812 мг, 0,0044 моль), и полученную смесь выдерживают в течение 2 ч при комнатной температуре. Растворитель отгоняют и остаток разделяют между 50 мл 2,5% NaOH и 75 мл СН₂Cl₂. Водный слой отделяют и экстрагируют дважды 25 мл СН₂Cl₂. Органические слои объединяют, промывают 25 мл воды, сушат через MgSO₄, и упаривают растворитель.

Неочищенный продукт порошкуют с использованием примерно 5 мл Etoc, насыщенного NH₃. Твердый осадок собирают и после повторной обработки маточного раствора получают 650 мг (48%) названного соединения в виде беловатого порошка.

Ниже приведены данные, подтверждающие исходное соединение, полученное в соответствии с указанным примером.

Растворитель 1-2 CDCl₂. Данные ЯМР анализа d ч/млн (5 МГц) 3,96 (c, 3H), 3,99 (c, 3H), 4,46 (c, 2H), 6,96 (д, 1H), 7,18 (дд, 1H), 7,48 (д, IH), 7,56 (д, 1H), 8,31 (д, 1H) Наилучший способ осуществления изобретения, известный в настоящее время, заключается в использовании натриевой соли предлагаемого соединения, описанного в примере 2.

Лекарственные препараты, содержащие соединение изобретения в качестве действующего начала, проиллюстрированы в следующих рецептурах.

Сироп.

Сироп, содержащий 1% (масс на объем) активного вещества, получают на основе следующих ингредиентов, г: Соединение примера 1 1,0 Сахар, пудра 30,0 Сахарин 0,6
Глицерин 5,0
Отдушка 0,05
Этанол, 96% 5,0
Дистиллированная вода д.s. до конечного объема 100 мл
Сахар и сахарин растворяют в 60 г теплой воды. После охлаждения активное соединение прибавляют к сахарному раствору, а затем добавляют к полученной смеси глицерин и раствор, содержащий ароматические добавки в этаноле. Смесь разводят водой до конечного объема 100 мл.

Таблетки с энтеросолюбильной оболочкой.

Таблетку, содержащую 50 мг активного соединения в энтеросолюбильной оболочке, получают на основе следующих ингредиентов, г:
l. Соединение примера 1 в виде Мо соли 500
лактоза 700
Метилцеллюлоза 6
Сшитый поливинилпирролидон 50
Стеарат магния 15
Карбонат натрия 6
Дистиллированная вода g.s.

Фталат ацетата целлюлозы 200
Цетиловый спирт 15
Изопропанол 2000
Хлористый метилен 2000
Соединение по примеру 1, порошок смешивают с лактозой и гранулируют с использованием водного раствора метилцеллюлозы и карбоната натрия. Мокрую массу пропускают через сито и полученный гранулят сушат в печи. После сушки гранулят перемешивают с поливинилпирролидоном и стеаратом магния. Сухую смесь прессуют в матрицах для таблеток (10000 таблеток), при этом каждая таблетка содержит 50 мг активного вещества, на таблетировочной машине с 7 мм пуансоном.

II. Раствор, содержащий фталат ацетата целлюлозы и цетировый спирт в изопропаноле/хлористом метилене, распыляют на таблетки в установке для получения покрытий фирмы Accela Cota^R, Manesty. Получают таблетки с массой 110 мг.

Раствор для внутривенного вливания.

Состав для парентерального, внутривенного вливания, содержащий 4 мг активного компонента на 1 мл, получают на основе следующих ингредиентов:
Соединение по примеру 2 4 г
Стерильная вода до конечного объема 1000 мл
Активное соединение растворяют в воде до получения конечного объема 1000 мл. Раствор фильтруют через 0,22 мкм фильтр и сразу же разливают в 10 мл ампулы. Ампулы герметично закупоривают.

Капсулы.

Капсулы, содержащие 30 мг активного соединения, получают на основе следующих ингредиентов, г:
Соединение по примеру 1 300
Лактоза 700
Микрокристаллическая целлюлоза 700
Частично замещенная гидроксипропилцеллюлоза 62
Динатрийбифосфат 2
Дистиллированная вода g.s.

Активное соединение перемешивают с сухими ингредиентами и гранулируют с использованием раствора, содержащего динатрийбифосфат. Мокрую массу пропускают через экструдер с получением таблеток (гранул), которые сушат в сушилке с кипящим слоем.

500 г вышеуказанных гранул опускают в раствор, содержащий 30 г гидроксипропилированной метилцеллюлозы в 750 г воды для получения первого покровного слоя с использованием машины для нанесения покрытия с использованием псевдоожиженного слоя. После сушки гранулы покрывают вторым покровным слоем, состав которого приводится ниже.

Раствор для получения покрытия, г:
Фталат гидроксипропилированной метилцеллюлозы 70
Цетиловый спирт 4
Ацетон 200
Этанол 600
Гранулы, покрытые заключительным слоем, инкапсулируют в капсулы.

Суппозитории.

Суппозитории получают на основе следующих ингредиентов с использованием метода сшивания. Каждый суппозиторий содержит 40 мг активного соединения.

Соединение по примеру 1 4 г
Witipsol H-15 180 г
Соединение, используемое в качестве действующего начала, смешивают с Witepsol Н-15 при температуре 41^oС до получения гомогенной смеси. Предварительно изготовленные суппозиторные упаковки заполняют расплавленной массой до чистого веса 1,8 4 г. После охлаждения указанные упаковки герметично укупоривают. Каждый суппозиторий содержит 40 мг активного соединения.

Биологические эффекты.

Биологическая доступность.

Биологическую доступность определяют путем вычисления соотношения между площадью на кривой изменения концентрации в плазме крови после интрадуоденального (и.д.) и внутривенного введения (в.в.) у крысы или собаки. Используют низкие, терапевтические релевантные дозы. Указанный метод общепризнан с научной точки зрения как достоверный при определении биодоступности (см. например: M. Rowland u T.N. Tozer, Clinical Pharmacacocinetics, 2nd, ed. Zea J Febiher, London, 1989, с. 42). В таблице приведены данные, полученные как у крысы, так и у собаки.

Модель грубого скрининга.

Поскольку модель биодоступности, которая описана выше, чрезвычайно трудоемка и требует проведения большого количества анализом плазмы крови, использовали также модель грубого скриннинга, основан на относительной способности ингибирования секреции кислоты (см. например: A 60th, Medical Pharmacology, 7th C.V. Mosby Company, Saint Zouis, 1974, с. 19). Таким образом, рассчитывали соотношение (называемое "Биодоступность" в таблице) между ЭД₅₀ при внутривенном введении и ЭД₅₀ при интрадуодельном введении. Эти данные также приведены в таблице.

Активность.

Активность ингибирования секреции кислоты определены у крысы-самца и у собаки как при внутривенном, так и при интрадуоденальном введении. Если привести в соответствие данные испытаний на животных относительно активности данного соединения на человека по сравнению с имеющимся типом соединений, активность его на человеке, как полагают, будет соответствовать уровню где-то между показателем, полученным у крысы-самца и установленным у собаки. Данные активности, полученные у этих двух видов животных, приведены в таблице.

Биологические испытания.

Ингибирование секреции желудочной кислоты у находящейся в сознании крысы-самца.

Для испытания использовали крыс-самцов линии Spraque-Dawley. В их желудке (полости) и верхнем отделе двенадцатиперстной кишки были выполнены фистулы с канюлями для сбора секреции желудочной кислоты и введения испытуемых веществ соответственно. Перед началом проведения испытания обеспечивали 14-дневный период заживания после проведения операции.

Перед проведением испытаний на секрецию желудочной кислоты животных лишали пищи, но не воды на 20 ч. Желудок неоднократно промывали через желудочный катетер и подкожно вводили 6 мг Рингеровского глюкозного раствора. Секрецию кислоты стимулировали вливанием в течение 3,5 ч (1,2 мл/ч, подкожно) пентагастрина и карбахола (20 и 100 нмоль/кг/ч соответственно) и в течение этого времени собирали фракции желудочной секреции с интервалом в 30 мин. Испытуемые вещества или носитель вводили внутривенно или интрадуоденально через 90 мин после начала стимуляции в дозе 1 мг/кг. Образцы желудочного сока доводили до рН 7,0 при использовании NaOH, 0,1 моль/л, и выброс кислоты рассчитывали как продукт концентрации и объема титрованного раствора. Дальнейшие расчеты проводили на основе групповых усредненных реакций от 4 5 крыс. Выброс кислоты в течение указанных периодов после ввведения испытуемых соединений или носителя выражали в виде ответов на сбор фракций с установлением кислотного выброса за 30-минутный интервал перед введением; до значения 1,0. Показатель ингибирования в рассчитывали по фракционным ответам, вызванным испытуемым соединением и носителем. Значения ЭД₅₀ получены из графической интерполяции на логарифмических кривых зависимости "доза-эффект" либо рассчитаны исходя из испытаний однократной дозы, предполагая такой же наклон для всех кривых зависимости "доза-эффект". Определение биологической доступности получено путем расчета соотношения ЭД₅₀ в.в./ЭД₅₀ и.д. Приведенные результаты базируются на секреции желудочной кислоты в течение второго часа после введения лекарственного средства или носителя.

Биологическая активность у крысы-самца.

Использовали взрослых крыс-самцов.

За день до проведения экспериментов всех крыс подготавливали путем катетеризации левой сонной артерии под анестезией. Крысам, используемым для внутривенных испытаний, также вводили катетер в яремную вену (см. V. Popovic u P. Popovic, G. Appl. Phissiol, 1960, 15, с. 727 728). Крысам, используемым для интрадуоденальных экспериментов, вводили также катетер в верхний отдел двенадцатиперстной кишки. Катетеры выводили на задней части шеи, каждую крысу после указанной операции размещали по отдельности и лишали пищи, кроме воды, перед введением испытуемых веществ. Одинаковые дозы (4 мкмоль/кг) вводили внутривенно и интрадуоденально в виде болюса в течение примерно 1 мин (2 мл/кг). Из сонной артерии производили неоднократно забор проб крови (0,1 0,4 г) с интервалом до 4 ч после принятия указанной дозы испытуемого соединения. Пробы до анализа испытуемого соединения быстро замораживали.

Площадь на кривой зависимости "концентрация время" (AUC) определяли по линейной формуле трапеций и экстраполировали до бесконечности делением концентрации в крови, установленной последней при исключении константы скорости в терминальной фазе. Системная биологическая доступность (F) после интрадуодельного введения рассчитывается по формуле

Ингибирование секреции желудочной кислоты и биологическая доступность у находящейся в сознании собаки.

Использовали гончих собак обоих полов. Им накладывали фистулу на двенадцатиперстную кишку для введения испытуемого соединения или носителя в вентиркулярный свищ с катетером для сбора желудочной секреции.

Перед проведением тестов на секреторную функцию животных лишали пищи примерно на 18 ч, но не исключая, однако, воду. Секрецию желудочной кислоты стимулировали вливанием дигидрохлорида гистамина (12 мл/ч) в дозе, создающей примерно 80% индивидуальной максимальной секреторной реакции, и желудочный сок собирали фракциями с интервалом в 30 мин. Испытуемое соединение или носитель вводили внутривенно или интрадуоденально через 1 ч после вливания гистамина в объеме 0,5 мл/кг массы тела. Кислотность образцов желудочного сока определяли титрованием с доведением рН до 7 и рассчитывали выброс кислоты. Секреция кислоты в течение времени сбора фракций после введения испытуемого соединения или носителя выражалась в виде ответных реакций на сбор фракций с установлением кислотного выброса в указанной фракции перед введением до значения 1,0.

Ингибирования рассчитывали исходя из ответных реакций фракций, вызванных испытуемым соединением и носителем. Значения ЭД₅₀ получали графической интерполяцией на кривых дозовой зависимости или рассчитывали из экспериментов по подбору однократной дозы исходя из одинаковой кривизны кривой "доза-эффект" для всех испытуемых соединений. Все результаты приведены на основе выброса кислоты через 2 ч после введения.

Производили забор проб крови для анализа концентрации испытуемого соединения в плазме с интервалом до 3 ч после забора крови. AUC /площадь на кривой зависимости "концентрация-время"/, экстраполированную до бесконечности, рассчитывали по линейному правилу трапеций. Системную биологическую доступность (F% ) после интрадуоденального введения рассчитывали по формуле 100 х (AUC и.д./AUC в.в.).

Химическая стабильность.

Химическую стабильность различных соединений изобретения наблюдали в кинетике при низкой концентрации при 37^oC в водных буферных растворах с различными значениями рН. Результаты, приведенные в таблице, показывают полупериод времени, после которого половина количества исходного соединения остается без изменений.

Результаты испытаний биологической активности и стабильности.

В таблицу сведены полученные данные испытаний для предлагаемого соединения и известного структурного аналога, упоминаемого в таблице в ссылке как 5-фтор-2-[[(3,4-диметокси2-пиридинил)метил] сульфинил]-IH-бензимидазол, раскрываемый в Европатенте N 208452. Как можно видеть из таблицы предлагаемое соединение имеет высокую биологическую доступность (F 97% у крысы), высокую активность (ЭД₅₀ в.в. 1,3 мкмоль/кг, ЭД₅₀ и.д. 2,6 мкмоль/кг у крысы) и высокую химическую стабильность (полупериод жизни 30 ч). Биологическая доступность предлагаемого соединения имеет гораздо более высокий показатель (97% против 47% ) по сравнению с показателем у соединения, приведенного в ссылке, хотя противопоставляемое соединение имеет более высокую активность и стабильность (у соединения по ссылке ЭД₅₀ при внутривенном введении составляем 0,85 мкмоль/кг, ЭД₅₀ при интрадуоденальном 1,75 мкмоль/кг, а полупериод жизни составляет 58 ч).

Формула изобретения

1. 5-Хлор-2-[[3,4-диметокси-2-пиридинил)метил] -сульфинил]- 1H-бензимидазол формулы I

или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что оно представляет собой натриевую соль.

3. Соединение по п. 1, обладающее ингибирующей секрецию желудочной кислоты активностью.

4. Фармацевтическая композиция, проявляющая ингибирующую секрецию желудочной кислоты у млекопитающих активность, содержащая активный компонент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве активного компонента она содержит соединение формулы I по п. 1 в количестве 0,1 95 мас.

5. Способ получения 5-хлор-2- [[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил]сульфинил]-1H-бензимидазола формулы

или его фармацевтически приемлемой соли, отличающийся тем, что 5-хлор-2- [[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил]тио]-1H-бензимидазол подвергают окислению с выделением при желании в виде соли.

6. 5-Хлор-2-[[(3,4-диметокси-2-пиридинил)метил] тио] -1H-бензимидазол формулы

РИСУНКИ

Рисунок 1