Способ контроля режимов стерилизации жидких растворов и биологический индикатор для его осуществления

 

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при стерилизации лекарственных веществ в аптеках. При стерилизации суспензию спор тест-организмов с нейтральной средой помещают в стерилизуемый раствор. Нейтральная среда исключает рост спор и обеспечивает их жизнеспособность до тестирования режимов стерилизации. Перед инкубацией суспензию соединяют с концентрированной питательной средой. При этом их объемы берут в таком соотношении, что получают среду, обеспечивающую в случае выживания спор при стерилизации их рост при температуре инкубации. Индикатор содержит емкость с концентрированной питательной средой и емкость с суспензией спор тест-организмов в нейтральной среде. Каждая емкость закрыта крышкой в виде мембраны, имеющей форму петли. Мембрана имеет свободный конец, выступающий за боковую стенку емкости. При вытягивании мембран за их свободные концы они отделяются от стенок емкостей с образованием общей внутренней полости, в которой суспензия смешивается с концентрированной питательной средой. Изобретение исключает одновременно ухудшение ростовых свойств питательной среды, деградацию индикатора и контаминацию тест-организмов. 2 с. и 1 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при стерилизации растворов лекарственных веществ в аптеках.

В настоящее время в зависимости от физико-химических свойств растворов лекарственных веществ, объема и теплофизических свойств материала флакона, в котором находится раствор, в аптеках используются следующие режимы стерилизации: Температура, ^oC - Экспозиция, мин 100 - 8 100 - 12 100 - 30 120 - 8 120 - 15 120 - 30 Биотестирование является самым надежным способом контроля режимов стерилизации в автоклавах.

Известен способ контроля режимов стерилизации жидких растворов (Международный стандарт ISO/DIS 14161 "Стерилизация изделий медицинского назначения", с. 17 - 18), заключающийся в том, что суспензию спор тест-организма Bacillus stearothermophillus в питательной среде стерилизуют в одном объеме со стерилизуемым раствором. Для обеспечения стабильности результатов до проведения биотестирования суспензию хранят при низкой температуре в холодильнике, так как нередко температура при транспортировке и хранении может превышать температуру, при которой споры данного тест-организма начинают развиваться. Перед биотестированием суспензию доводят до комнатной температуры. После тестирования режима стерилизации проводят инкубацию.

Биологический индикатор для осуществления данного способа представляет собой запаянную ампулу из нейтрального стекла, в которой находится суспензия спор тест-организмов в индикаторной питательной среде. Количество жизнеспособных микроорганизмов в ампуле с высокой резистентностью к инактивации определяется значениями критических параметров режимов стерилизации растворов.

Недостатками известных технических решений являются хранение и транспортировка суспензии при низкой температуре (в холодильнике), что значительно удорожает и усложняет доставку биотеста к потребителю; доведение суспензии перед употреблением в течение 1 - 2 ч до комнатной температуры, что приводит к увеличению времени проведения контроля режимов стерилизации; возможность ухудшения ростовых свойств питательной среды (уменьшение чувствительности) деградации Ph индикатора под воздействием высокой температуры при ее стерилизации во время тестирования процесса.

Задача изобретения - разработать способ контроля режимов стерилизации жидких растворов и биологический индикатор для его осуществления, исключающих одновременно ухудшение ростовых свойств питательной среды, деградацию Ph индикатора и контаминацию тест-организмов.

Поставленная задача решается тем, что в способе контроля режимов стерилизации жидких растворов путем стерилизации в одном объеме со стерилизуемым раствором спор тест-организмов и последующей их инкубации в индикаторной питательной среде согласно изобретению для стерилизации спор тест-организмов используют суспензию этих спор в нейтральной среде, исключающей рост спор и обеспечивающей их жизнеспособность до тестирования режимов стерилизации, а перед инкубацией простерилизованную суспензию спор тест-организмов в нейтральной среде соединяют с концентрированной индикаторной питательной средой, при этом объемы суспензии и питательной среды выбирают так, что получают индикаторную питательную среду, обеспечивающую в случае выживания спор при стерилизации их рост при температуре инкубации.

Поставленная задача решается также тем, что биологический индикатор, содержащий герметичную емкость со спорами тест-организмов, согласно изобретению дополнительно содержит герметичную емкость с концентрированной индикаторной питательной средой, а в емкость со спорами тест-организмов введена нейтральная среда, исключающая рост спор и обеспечивающая их жизнеспособность до тестирования режимов стерилизации, при этом каждая из емкостей герметично закрыта крышкой, выполненной в виде мембраны, имеющей форму петли, внутренняя часть которой герметично соединена по периметру с торцевой стенкой емкости, а ее наружная часть имеет свободный конец, выступающий за боковую стенку емкости, причем в одной из емкостей размещено уплотнение, примыкающее к внутренней части мембраны и обеспечивающее герметизацию общей внутренней полости, образующейся при фиксированном друг относительно друга положении емкостей и отделении мембран за их свободные концы от стенок емкостей.

Предпочтительно, чтобы уплотнение было размещено в емкости с суспензией спор тест-организмов в нейтральной среде.

На фиг. 1 изображены емкости с суспензией спор тест-организмов и с концентрированной индикаторной питательной средой; на фиг. 2 - общий вид биологического индикатора; на фиг. 3 - то же, но с удаленными крышками.

Предлагаемый способ контроля режимов стерилизации жидких растворов осуществляется следующим образом.

Контроль режимов стерилизации осуществляют с помощью биотеста, представляющего собой суспензию дозированного количества спор тест-организмов Bacillus stearothermophillus в стерильной нейтральной среде, например, дистиллированной воде. Количество жизнеспособных микроорганизмов определяется значениями критических параметров режимов стерилизации, проводимых в аптечных условиях.

Дистиллированная вода, используемая в качестве нейтральной среды, исключает рост спор и гарантирует из жизнеспособность (сохраняемость) в течение нескольких лет при нормальных условиях.

Биотест при стерилизации находится в стерилизуемом растворе лекарственных веществ. После стерилизации суспензия спор B. stearothermophillus в дистиллированной воде соединяется с концентрированной питательной средой. Объемы суспензии и питательной среды берут, например, в соотношении 1 : 1, т.е. по 0,25 мл, в результате чего в получаемой после их соединения питательной среде гарантирован рост спор тест-организмов при температуре инкубации.

Биологический индикатор, который используется для проведения контроля режимов стерилизации в аптеках, содержит емкость 1, в которой находится суспензия 2 спор тест-организма в нейтральной среде, и емкость 3 с концентрированной индикаторной питательной средой 4.

Емкости 1 и 3 герметично закрыты крышками 5 и 6, каждая из которых представляет собой мембрану, например, из инертной пленки, имеющей форму петли, внутренняя часть 7 или 8 которой герметично соединена, например, посредством клея, с торцевой стенкой емкости 1 или 3. Наружная часть 9 или 10 каждой пленки имеет свободный конец 11 или 12 соответственно, выступающий за фланец 13 или 14 емкости 1 или 3. В верхней части емкости 1 размещено уплотнение 15 в виде, например, кольца из инертной резины, которое выступает за поверхность фланца 13 на 0,5 мм.

Для осуществления бактериологического контроля процесса стерилизации жидких растворов лекарственных веществ емкость 1 с суспензией 2 спор помещают в один объем со стерилизуемым раствором. По окончании стерилизации и охлаждения емкость 3 с концентрированной индикаторной питательной средой 4 соединяют с емкостью 1 с суспензией 2 спор. Для этого емкости 1 и 3 соединяются друг с другом так, что полоски пленок совмещаются и фланец 14 давит на уплотнение 15 (фиг. 2) и лежит в одной емкости с фланцем 13 емкости 1. Соединение емкостей 1 и 3 осуществляется в приспособлении, конструктивное выполнение которого может быть различным. В этом фиксированном положении, когда обе емкости 1 и 3 установлены соосно друг относительно друга, пленки вытягиваются за их свободные концы 11 и 12 в направлении, указанном стрелкой, т.е. от стенок емкостей, отделяясь при этом от поверхностей торцевых стенок емкостей. Образующийся в процессе удаления пленок зазор между уплотнением 15 и фланцем 14, равный четырем толщинам пленки (примерно 60 - 70 мкм) мгновенно заполняется материалом уплотнения 15. В процессе удаления крышек 5 и 6 происходит соприкосновение только стерильных поверхностей уплотнительного кольца 15 и фланца 14 емкости 3 с питательной средой 4.

Затем емкость 3 с концентрированной питательной средой 4 плотно (с натягом) входит в верхнюю цилиндрическую часть емкости 1 (фиг. 3) с суспензией 2 спор, образуя общую внутреннюю полость, которую герметизирует уплотнение 15, при этом суспензия 2 смешивается с концентрированной питательной средой 4. Перевернутый на 180^o индикатор помещают в инкубатор.

Таким образом, соединение двух емкостей 1 и 3 индикатора раздельного типа исключает контаминацию как суспензии 2 спор, так и концентрированной питательной среды 4 в условиях нестерильных помещений, сохраняет чувствительность питательной среды, исключает деградацию Ph индикатора при высоких температурах, устраняет дегидрацию питательной среды, что влияет на срок инкубации.

Формула изобретения

1. Способ контроля режимов стерилизации жидких растворов путем стерилизации в одном объеме со стерилизуемым раствором спор тест-организмов и последующей их инкубации в индикаторной питательной среде, отличающийся тем, что для стерилизации спор тест-организмов используют суспензию этих спор в нейтральной среде, исключающей рост спор и обеспечивающей их жизнеспособность до тестирования режимов стерилизации, а перед инкубацией простерилизованную суспензию спор тест-организмов в нейтральной среде соединяют с концентрированной индикаторной питательной средой, при этом соотношение объемов суспензии и питательной среды выбирают так, что получают индикаторную питательную среду, обеспечивающую в случае выживания спор при стерилизации их рост при температуре инкубации.

2. Биологический индикатор, содержащий герметичную емкость со спорами тест-организмов, отличающийся тем, что дополнительно содержит герметичную емкость с концентрированной индикаторной питательной средой, а в емкость со спорами тест-организмов введена нейтральная среда, исключающая рост спор и обеспечивающая их жизнеспособность до тестирования режимов стерилизации, при этом каждая из емкостей герметично закрыта крышкой, выполненной в виде мембраны, имеющей форму петли, внутренняя часть которой герметично соединена по периметру с торцевой стенкой емкости, а ее наружная часть имеет свободный конец, выступающий за боковую стенку емкости, причем в одной из емкостей размещено уплотнение, примыкающее к внутренней части мембраны и обеспечивающее герметизацию общей внутренней полости, образующейся при фиксированном друг относительно друга положении емкостей и отделении мембран за их свободные концы от стенок емкостей.

3. Индикатор по п.2, отличающийся тем, что уплотнение размещено в емкости с суспензией спор тест-организмов в нейтральной среде.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3