Способ моделирования болезни гиршпрунга

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальному разделу проктологии, и может быть использовано при изучении болезни Гиршпрунга. У экспериментального животного рассекают наружный футляр толстокишечной трубки. Удаляют на протяжении 1 см серозно-мышечную оболочку. На подслизистую основу наносят 0,1 мл 5%-ного раствора AgNO₃. На внутренний футляр кишечной стенки накладывают полихлорвиниловую трубку. Трубку фиксируют. Способ позволяет приблизить модель к клиническому течению болезни Гиршпрунга и отличается простотой воспроизводимости.

Изобретение относится к медицине, в частности к проктологии, и может быть использовано для моделирования и изучения болезни Гиршпрунга.

В основе болезни Гиршпрунга лежит наличие в определенной части толстой кишки аганглионарной зоны, т. е. зоны, в которой наблюдается дефицит или полное отсутствие интрамуральных ганглиев в кишечной стенке с несократимыми гомогенными участками на месте мышечных слоев, что ведет к полному выключению аганглионарной зоны из перистальтики. По мнению Ю.Ф. Исакова (Мегаколон у детей. - М., 1965, c. 64), перистальтика не может осуществляться в тех отделaх кишечника, в которых ауэрбаховское и мейснеровское нервные сплетения разрушены.

Неперистальтирующая часть кишки при болезни Гиршпрунга служит препятствием для нормального пассажа кишечного содержимого, что приводит к усиленной перистальтике супрастенотических отделов и гипертрофии, а в последующем и атрофии мышечных волокон с замещением их соединительной тканью и расширением просвета кишки над аганглионарной зоной (Лукьянова Е.М. Справочник детского гастроэнтеролога. - Киев, 1986, с. 142).

Проведенными исследованиями по патентной и научно-медицинской литературе выявлен способ моделирования болезни Гиршпрунга (a.c. 1509980, бюл. N 35, 23.09.89), взятый в качестве прототипа. Данный способ осуществляется путем пересечения толстой кишки в нисходящем ее сегменте и вшивания между проксимальным и дистальным отрезками пересеченной кишки сосудистого протеза длиной 35 мм и шириной 15 мм. Однако данный способ имеет ряд существенных недостатков.

При этом способе с помощью сосудистого протеза формируется искусственный участок пищеварительной трубки, структура которого совершенно не соответствует послойному строению кишечной стенки. В частности, данный участок не покрыт изнутри слизистой оболочкой, что является существенным недостатком способа, т.к. это не отвечает физиологии кишки как в норме, так и при болезни Гиршпрунга, и в силу этого обстоятельства не обеспечивает соответствия клинического течения болезни Гиршпрунга и клиники модели. Прочное герметичное сшивание сосудистого протеза с кишечной стенкой технически сложно и, кроме того, влечет за собой развитие несостоятельности анастомоза, так как соединяются разнородные ткани, что приводит часто к гибели животного. Из-за этого данный способ трудновоспроизводим.

Обязательное, по мнению авторов, обрабатывание зоны анастомоза клеем КЛ-3 и укрытие сальником усложняет выполнение моделирования, вызывает развитие спаечного процесса в брюшной полости и не соответствует клиническому течению болезни Гиршпрунга. К недостаткам способа можно отнести и то, что размеры протеза строго обусловлены. Так, авторы вынуждены всегда использовать протез длиной 35 мм, т.к. при длине протеза меньше 35 мм возникают трудности сшивания протеза с кишкой, возникают условия негерметичности швов и несостоятельности анастомоза, что ведет к гибели животного. Использование протеза длиной больше 35 мм вызовет затруднение прохождения химуса по протезированному участку. Таким образом, использование протеза ограниченной длины не позволяет моделировать сегментарную форму болезни Гиршпрунга и форму болезни Гиршпрунга с суперкоротким неперистальтирующим участком. Кроме того, сосудистый протез используется диаметром 15 мм, так как это, по мнению авторов, соответствует диаметру левых отделов толстой кишки собаки. Использование протеза другого диаметра сопряжено с техническими трудностями при сшивании протеза с кишкой. Однако не у всех собак диаметр левых отделов толстой кишки одинаков и равняется именно 15 мм. Следовательно, использовать эту методику можно только у тех животных, у которых просвет дистальных отделов толстой кишки равен 15 мм, а подбор собак с таким строго определенным диаметром толстой кишки создает дополнительные трудности при воспроизведении модели. Проведение эксперимента на собаках в настоящее время дорого, также дорого до- и послеоперационное содержание собак. В то же время выполнение оперативных вмешательств на крысах технически проще, а материальное обеспечение эксперимента обходится несравненно дешевле. Поэтому целесообразно использовать для моделирования не собак, а других более дешевых животных, в частности крыс, что значительно удешевляет и упрощает выполнение моделирования.

Цель изобретения - приближение к клиническому течению патологического процесса, повышение воспроизводимости и упрощения способа.

Поставленная цель достигается тем, что у экспериментального животного, например крысы, удаляют на протяжении 1 см толстой кишки серозно-мышечную оболочку, а на подслизистую основу обнаженного участка наносят 0,1 мл 5%-ного раствора AgNO₃, и на внутренний футляр кишечной стенки накладывают и фиксируют полихлорвиниловую трубку для создания жизнеспособного аганглионарного и неперистальтирующего участка кишки.

Способ осуществляется следующим образом. Крысе под эфирным наркозом выполняется нижняя срединная лапаротомия. Находят конечный отдел толстой кишки. Рассекают наружный футляр по всей окружности на участке дистального отдела толстой кишки и на протяжении до 1 см удаляют серозную и мышечные оболочки на этом участке. При иссечении серозно-мышечной оболочки удаляется ауэрбаховское нервное сплетение и повреждается мейснеровское. Затем на оставшийся внутренний футляр наносят 0,1 мл 5%-ного раствора AgNO₃ для более полного повреждения мейснеровского сплетения, накладывают и закрепляют полихлорвиниловую трубку, создавая тем самым ригидный неперистальтирующий участок. Рана брюшной полости послойно ушивается.

Пример 1. Крысе под эфирным наркозом выполнили нижнюю срединную лапаротомию. Нашли конечный отдел толстой кишки. Рассекли наружный футляр по всей окружности на участке дистального отдела толстой кишки и на протяжении 1 см удалили серозно-мышечную оболочку на этом участке. Затем на десерозированный и демускуляризированный участок после нанесения 0,1 мл 5%-ного раствора AgNO₃ наложили и закрепили полихлорвиниловую трубку, создав тем самым ригидную неперистальтирующую зону. Брюшную полость ушили наглухо. Со вторых суток послеоперационного периода крысу начали кормить, как и до операции, 2 раза в день. Вес крысы со временем стал увеличиваться, а частота стула уменьшилась до 1-2 раз за 60-72 ч. На 14-е сутки животное умерщвлено внутриплевральным введением гексенала. На вскрытии: около половины толстой кишки выше ригидного участка заполнено кишечным содержимым и расширено, особенно сильно в области, расположенной над ригидной зоной. Ниже этой зоны кишечник пустой. Таким образом, наблюдение свидетельствует о воспроизводимости болезни Гиршпрунга и эксперименте, используя предложенную методику.

Пример 2. Крысе под эфирным наркозом выполнили нижнюю срединную лапаротомию. Нашли конечный отдел толстой кишки. Рассекли наружный футляр по всей окружности на участке дистального отдела толстой кишки и на протяжении 1 см удалили серозно-мышечную оболочку на этом участке. Затем на десерозированный и демускуляризированный участок после нанесения 0,1 мл 5%-ного раствора AgNO₃ наложили и закрепили полихлорвиниловую трубку, создав тем самым ригидную неперистальтирующую зону. Брюшную полость ушили наглухо. Животное наблюдалось в течение 30 суток после операции. Вес крысы со временем стал увеличиваться, а частота стула уменьшилась до 1-2 раз за 72-84 ч. На 30-е сутки животное умерщвлено внутриплевральным введением гексенала. На вскрытии отмечается слабая выраженность подкожножировой клетчатки. При осмотре брюшной полости выявлено, что большая часть толстой кишки выше ригидного участка заполнена кишечным содержимым и расширена. Особенно выраженное расширение наблюдалось в области, расположенной сразу над ригидной зоной. Ниже этой зоны кишечник пустой. При гистологическом исследовании в области ригидного участка имеется типично устроенная слизистая оболочка. В подслизистой оболочке выявляется соединительная ткань с наличием фуксинофильных коллагеновых волокон. Подслизистое и межмышечное сплетения здесь же определяются. В расширенной части толстой кишки слизистая оболочка характеризуется более глубокими криптами. Мышечная пластинка слизистой несколько утолщена. Мышечная оболочка расширенной части толстой кишки утолщена, гладкомышечные клетки гипертрофированы, однако некоторые из них имеют светлые ядра с маргинально расположенным хроматином, отдельные миоциты отличаются резко выраженной эозинофилией, что свидетельствует об их гибели. Наружный слой мышечной оболочки дает более выраженное окрашивание по ван Гизону, что является показателем продолжающегося склерозирования мышечной ткани. Эта гистологическая картина свидетельствует о компенсаторной гипертрофии мышечной ткани и наступлении атрофического процесса в мышечном слое расширенного участка толстой кишки.

Таким образом, и на 30-е сутки эксперимента имеются все характерные признаки моделируемого заболевания.

По сравнению с прототипом способ обладает следующими преимуществами.

1. Внутренний футляр кишечной трубки сохраняется, что физиологично и более соответствует клинико-анатомическим признакам болезни Гиршпрунга.

2. Возможно моделирование сегментарной формы болезни Гиршпрунга и формы с суперкоротким неперистальтирующим участком.

3. Предложенный способ моделирования проще, так как проводится на крысах, не требует выполнения технически сложных оперативных приемов, не сопровождается сшиванием разнородных тканей и нет необходимости подыскивать животных со строго определенным диаметром кишки.

4. Способ легковоспроизводим из-за его простоты и отсутствия послеоперационных осложнений. При моделировании по сравниваемому способу существует реальная опасность развития перитонита, так как кишка пересекается и сшиваются разнородные ткани (кишка с сосудистым протезом), что может приводить к несостоятельности анастомоза. Такое осложнение обычно приводит к гибели животного, вследствие чего моделирование болезни Гиршпрунга по сравниваемому способу не всегда осуществимо. Заявленный способ лишен этих недостатков: просвет кишки не вскрывается, наложение анастомоза не требуется. Поэтому воспроизводимость предложенного способа выше, чем у прототипа.

5. Предложенный способ требуeт меньших материальных затрат, так как позволяет использовать более дешевых в содержании животных и не предусматривает использования дефицитных материалов, как клей КЛ-3 в прототипе.

Формула изобретения

Способ моделирования болезни Гиршпрунга путем денервации участка толстой кишки, отличающийся тем, что у экспериментального животного, например, крысы, рассекают наружный футляр толстокишечной трубки, удаляют на протяжении 1 см серозно-мышечную оболочку, а на подслизистую основу обнаженного участка наносят 0,1 мл 5% раствора AgNО₃ и на внутренний футляр кишечной стенки накладывают, фиксируя, полихлорвиниловую трубку.