Способ моделирования воспалительных заболеваний женских половых органов

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной гинекологии, и может быть использовано для изучения развития воспалительного процесса в половых органах. Для моделирования используют белых беспородных крыс. Осуществляют введение Staphylococcus aureus в дозе 3·10⁶ микробных тел. Введение производят в заднебоковую стенку средней трети влагалища туберкулиновым шприцем под слизистую. Способ позволяет создать модель с наиболее полным приближением к клиническому течению патологического процесса у женщин. 8 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть применено при моделировании воспалительных заболеваний женских половых органов.

Интерес к проблеме воспалительных заболеваний женских половых органов связан с их частотой, возможностью передачи инфекции плоду, а также их "омоложением". Несвоевременное или неадекватное лечение воспалительных заболеваний женских половых органов приводит к хронизации процесса, часто является причиной бесплодия, внематочных беременностей, инвалидизации (Сметник В. П. , 1995). Несмотря на применение новых медикаментозных препаратов, методов физиотерапии, санаторно-курортного лечения, частота воспалительных заболеваний женских половых органов не имеет тенденции к снижению (Савельева Г. М. , Антонова Л.В., 1987). Поэтому является актуальным изучение этиопатогенетических факторов возникновения и развития воспалительного процесса в половых органах. Для фундаментальных исследований создаются модели воспалительных заболеваний половых органов на лабораторных животных. В литературе описано достаточно много способов моделирования воспалительных процессов половых органов. Их можно условно разделить на 3 группы.

В исследованиях Скакуна Н. П. , Дроговоз С.М. (1968), Старковой Н.И. (1984) лабораторным животным внутривенно вводилась культура микроорганизмов или их токсинов в определенной заданной дозе. Метод позволяет получить генерализованную инфекцию, в том числе и половых органов. Однако в клинических условиях подобное поражение встречается только при сепсисе, что является крайней тяжелым проявлением генерализованной инфекции.

В исследованиях Magnusson, Sveinsson (1988), Moller, Mardh (1970) заражали самцов различными микроорганизмами и подсаживали самцов к самкам. Подобным образом исследуется исключительно и единственно половой путь передачи инфекции, то есть исследуется, какие микроорганизмы способны вызывать сочетанное поражение партнеров, в какой минимальной патогенной дозе, при каком инкубационном периоде.

В исследованиях Гармашевой Н.Л. (1947), Самородиновой Л.А. (1965), Тихоновской О.А. (1986), Маринкина И.О. (1996) с целью создания воспаления половых органов животным под наркозом производилась лапаротомия и в изолированный маточный рог после предварительной его перевязки вводился флогогенный агент. Подобный метод позволяет моделировать воспаление половых органов, но животное повергается операционной травме, что искажает естественное течение воспалительного процесса, этот метод вызывает изолированное поражение одного маточного рога и далек от естественного протекания воспалительного процесса в клинических условиях.

За прототип нами была избрана модель воспаления наружных половых органов, предложенная Шуриной А.М. (1977). Модель основана на возникновении и развитии асептического воспаления в месте инъекции раствора скипидара в область половой губы собаки. Однако и в этой модели есть существенные недостатки: во-первых, создается изолировано воспаление наружных гениталий, во-вторых, асептическое воспаление в клинических условиях встречается намного реже, чем септическое.

Таким образом, вышеописанные способы моделирования воспалительных заболеваний половых органов не отражают реального развития воспалительного процесса в половых органах и затрудняют экстраполяцию полученных данных на человека.

Целью нашего исследования являлось создание модели воспалительных заболеваний половых органов, наиболее приближенной к клиническому течению патологического процесса у женщин.

Предлагаемый нами способ моделирования воспалительных заболеваний половых органов заключается в следующем. Белым беспородным крысам-самкам в заднебоковую стенку средней трети влагалища с помощью туберкулинового шприца под слизистую вводился Staphylococcus aureus, штамм 25923, в дозе 3·10⁶ микробных тел.

За сутки до операции суточную культуру St. aureus суспендировали в 5 мл физиологического раствора, инкубировали при температуре 37^oC в течение 3-х часов. После инкубации центрифугировали, надосадочную жидкость сливали, осадок ресуспендировали в 5 мл стерильного физиологического раствора, вновь центрифугировали для получения необходимой концентрации. Степень мутности определяли по стандарту мутности (3·10⁶ микробных тел).

Наблюдение за развитием инфекционного процесса длилось в течение 14 суток. Исследованию на 4, 6, 14 сутки воспаления подвергались: стенки влагалища, маточного рога, регионарные лимфатические узлы. Использовались общепринятые гистологические методики, окрашивание срезов гематоксилином и эозином.

На гистологических препаратах влагалища на 4-е сутки воспаления отмечается слущивание поверхностных слоев многослойного плоского эпителия, участки его десквамации, обильные инфильтрации сегментоядерными лейкоцитами (фиг. 1). В подслизистой и мышечных слоях также выраженная воспалительная инфильтрация, представленная макрофагами, лимфоцитами, плазмоцитами. Подслизистый и мышечный слои отечны, венозные сосуды неравномерно расширены, полнокровны, с периваскулярной воспалительной инфильтрацией, отдельные из мелких артерий спазмированы (фиг. 2). К 14-м суткам отмечаются признаки обратного развития воспалительного процесса: отек и гиперэмия тканей значительно уменьшены (фиг. 3). На препаратах маточного рога на 4-е сутки признаки воспаления определяются преимущественно в соединительной и мышечной тканях, которые также инфильтрированы в первые сутки воспаления полиморфноядерными лейкоцитами, макрофагами, а затем лимфо- и плазмоцитами, преимущественно перигландулярно. Определяется отек соединительной ткани, выраженное расширение и полнокровие венозных сосудов, лимфостаз (фиг. 4). К 14-м суткам признаки воспалительной реакции постепенно исчезают, наблюдается лимфоплазмоцитарная инфильтрация, также преимущественно перигландулярно и в миометрии (фиг. 5). Подобная гистологическая картина описана при воспалительных заболеваниях влагалища, тела матки и маточных труб в клинических условиях у женщин (Хмельницкий О.П., 1994). В регионарных лимфатических узлах (подвздошных и паховых) на 4-е сутки воспаления определяется нарастание площади мозгового вещества, в корковом веществе наблюдается увеличение площади вторичных лимфоидных узелков, паракортикальной зоны. Резко расширены краевой и мозговой синусы (фиг. 6). В "мазке-отпечатке" подвздошного лимфатического узла на 4-е сутки воспаления определяется кокковая флора вне- и внутриклеточно, количество лимфоцитов увеличено за счет бластных форм (фиг. 7). К 14-м суткам воспаления структура лимфатических узлов практически восстанавливается, кокковая микрофлора не определяется (фиг. 8).

Таким образом, предлагаемая модель воспалительного процесса женских половых органов наиболее полно отражает клиническое течение воспалительных заболеваний в клинической практике.

Список используемой литературы.

1. Гармашева Н.Д. Экспериментальный инфекционный эндометрит. - Л.: Медицина, 1947, с. 168.

2. Дроговоз С.М. Желчеобразовательная функция печени при стафилококковой инфекции и интоксикации. Автореф... канд. мед. наук. Черновцы, 1968, с. 19.

3. Здродовский П. Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии. - М., 1963, с. 268-268.

4. Кейт Л., Бергер Г. Причины инфекционных заболеваний малого таза. кн. Репродуктивное здоровье. Под ред. Кейта Л. и др.: Пер. с англ. - М.: Медицина, 1988, т. 1, гл. 1, с. 123-132.

5. Маринкин И.О. Структурная организация лимфоидных органов при остром воспалительном процессе матки и в условиях его коррекции. Автореф. ...док. мед. наук. Новосибирск, 1996, с. 39.

6. Русньяк И., Фельди М., Сабо Д. Физиология и патология лимфообращения. Из-во Акад. Наук Венгрии, 1957, с. 125-126.

7. Савельева Г.М., Антонова Л.В. Острые воспалительные заболевания внутренних половых органов женщины. - М.: Медицина, 1987, с. 56.

8. Самородинова Л. А. Использование стероидных гормонов коры надпочечников при воспалительных заболеваниях женских половых органов. Автореф ... канд. мед. наук. Ленинград, 1965, 21 с.

9. Сметник В.П., Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология - С.-П.: Сотис, 1995, с. 12-26.

10. Старкова Н.И. Морфогенетическое изменение периферических лимфоидных органов беременных крыс после введения токсина стафилококка. "Морфогенез лимфатического и кровеносного русла и их тканей в норме, при патологии и в эксперименте". - Пермь, 1984, с. 45-47.

11. Тихоновская О. А. Моделирование острого и хронического воспаления придатков матки. В сб. : Молодежь и научно-технический прогресс., Томск, Из-во Томского ун-та, 1986, с. 76.

12. Хмельницкий О. П. Патоморфологическая диагностика гинекологических заболеваний. - С.-П.: Сотис, 1994, с. 37-299.

13. Шурина А.М. Морфофункциональное исследование лимфатических узлов при асептическом воспалении. Дисс. ...канд. мед. наук. Новосибирск, 1977.

14. Moller B.R., Mardh P.A. Experimental salpingitis in grivet monkeys by chlamydia thrachomatis. Acta path. microbiol. scand. Sect. B 1970, v. 88, n. 1, p. 107-114.

Формула изобретения

Способ моделирования воспалительных заболеваний женских половых органов, заключающийся во введении флогогенных агентов в женские половые органы, отличающийся тем, что в заднебоковую стенку средней трети влагалища белым беспородным крысам с помощью туберкулинового шприца вводят под слизистую Staphylococcus aureus в дозе 3 · 10⁶ микробных тел.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8