Способ замещения дефектов костной ткани

 

Изобретение относится к медицине, в частности к способам замещения костной ткани. Крошку деминерализованного костного матрикса вводят совместно с культурой аутофибробластов, культивируемых на частицах деминерализованного костного матрикса в течение суток перед введением больному, что стимулирует остеогенез без отторжения пересаженных клеток.

Известен способ замещения дефектов кости и стимуляции репаративного остеогенеза введением деминерализованного костного матрикса (ДКМ) в костную полость (Н. А. Тенилин. Лечение костных кист у детей и подростков. Автореф. канд. дисс. Н.Новгород, 1996). ДКМ представляет собой измельченную деминерализованную костную ткань с размером частиц от 100 до 300 мкм, которая вводится инъекционно в костную полость. Способ позволяет заполнять дефект костным матриксом, который является пластическим материалом для развития аутогенной костной ткани, а также оказывает остеоиндуктивное действие на остеорепарацию. Однако способ недостаточно эффективен при заполнении больших костных дефектов. В этих случаях требуется неоднократное (2-4 раза) введение ДКМ в костную полость.

Задача предлагаемого технического решения - ускорение остеорепарации.

Эта задача решается за счет того, что для замещения костных дефектов и стимуляции репаративного остеогенеза используется комбинация мелкодисперсного ДКМ с культурой аутофибробластов. Эффект мелкодисперсного ДКМ дополняется выраженным остеостимулирующим действием культуры аутофибробластов. В отличие от описанного в литературе экспериментального опыта стимуляции остеогенеза введением в область перелома ксенофибробластов (И. Г. Никитин. Влияние культуры клеток соединительно-тканного типа на процесс репаративного остеогенеза. //Актуальные вопросы травматологии и ортопедии. Материалы научно-практической конференции травматологов-ортопедов Республики Беларусь. Минск БГЭУ.- 2000.- Т. II.- С.353-357.), использование аутофибробластов с этой целью исключает реакцию отторжения пересаженных клеток. В области введения формируется депо аутологичных клеток - предшественников остеогенной ткани, которые благодаря выделению в процессе жизнедеятельности специфических факторов роста не только оказывают выраженное остеостимулирующее влияние, но и сами в дальнейшем под влиянием остеоиндуктивных факторов ДКМ претерпевают развитие в костную ткань. Способ может быть использован для замещения различных костных дефектов, стимуляции созревания регенерата при удлинении конечности и консолидации переломов.

Способ осуществляется следующим образом. Во время первичного оперативного вмешательства или специально за 4 недели до предполагаемого введения комплекса ДКМ с культурой аутофибробластов в область желаемой остеорепарации производится забор образца соединительной ткани размерами 1 х 1 см (кожа или надкостница пациента). Выращивание культуры аутофибробластов с концентрацией 4-5 млн. клеток на 1 мл матрикса осуществляется по стандартной методике. Однако последнее культивирование проводят на частицах аллогенного деминерализованного костного матрикса в течение суток. Засевают 4-5 млн. клеток на 1 мл частиц матрикса. Через сутки после пересева непосредственно перед операцией культуральную среду отбирают и матрикс с клетками заливают стерильным физиологическим раствором.

Введение комплекса ДКМ с культурой аутофибробластов в область костной полости, дефекта, зону регенерата или перелома производится под местным обезболиванием с помощью инъекции через иглу для внутрикостных вливаний. В зависимости от величины дефекта используется от 5 до 15 мл ДКМ, обогащенного культурой аутофибробластов. В случае введения в полость кисты достаточно однократной пломбировки дефекта из одной точки. При введении в область формирующегося дистракционного регенерата пункция осуществляется из трех точек с целью полноценного заполнения ДКМ зоны остеорепарации. По показаниям (большие дефекты костной ткани, массивные регенераты, замедленная консолидация переломов) введение ДКМ с культурой аутофибробластов можно повторять до 2-3 раз с интервалом 7-10 дней. Эффект от введения комплекса контролируется рентгенографически через 4 недели. На рентгенограммах видны признаки активной остеорепарации в зоне введения ДКМ с культурой аутофибробластов.

Клинический пример 1 Больная С., 23 лет. Диагноз: солитарная киста межвертельной области правой бедренной кости больших размеров, рецидив после костнопластического замещения патологического очага 8 лет назад. Больной произведена диагностическая пункция костной полости и диагноз верифицирован с помощью иммунологического и цитологического исследований. Во время пункции осуществлен забор участка кожи размерами 1 х 1 см для культивации фибробластов. После курса пункционного лечения больной в полость кисты введен комплекс ДКМ с культурой аутофибробластов объемом 15 мл. Больная выписана на амбулаторное лечение через 5 дней. Контрольное рентгенологическое обследование через 3 мес констатировало полное замещение полости костной тканью.

Клинический пример 2 Больная К., 14 лет. Диагноз: укорочение правой нижней конечности на 5 см на почве исхода врожденного вывиха бедра. С целью выравнивания длин нижних конечностей больной произведена остеотомия костей левой голени с фиксацией аппаратом Илизарова. На 5 день после операции начата дистракция с темпом 1 мм в сутки за 4 приема. Период дистракции составил 60 дней с образованием диастаза между отломками в 5,5 см, заполняющегося регенератом. За 4 недели до планируемого срока окончания дистракции у больной под местной анестезией взят участок кожи в области рубца, сформировавшегося после предшествующего вмешательства на тазобедренном суставе. Образец кожи культивирован и абсорбирован на ДКМ по описанной выше методике. Комплекс ДКМ с аутофибробластами в количестве 15 мл по окончании периода дистракции введен через внутрикостную иглу последовательно в 3 зоны регенерата из одного вкола. На контрольной рентгенограмме через 30 дней фиксации отмечается бурная оссификация регенерата вокруг зон введения ДКМ с культурой аутофибробластов. Срок фиксации в аппарате до формирования костной плотности регенерата составил 3,5 мес. Аппарат снят, разрешена дозированная возрастающая нагрузка на конечность.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет существенно активизировать остеорепарацию в зоне костных дефектов, сократить сроки и улучшить результаты лечения больных.

Формула изобретения

Способ замещения дефектов костной ткани путем введения крошки деминерализованного костного матрикса, отличающийся тем, что крошку деминерализованного костного матрикса вводят совместно с культурой аутофибробластов больного, культивируемых на частицах деминерализованного костного матрикса в течение суток перед введением больному.