Способ получения l-лизина

 

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения L-лизина включает культивирование бактерии Escherichia, накопление L-лизина в культуре и сбор указанной аминокислоты. Для улучшения продуктивности используют бактерию Escherichia, у которой увеличена активность аспартат-полуальдегиддегидрогеназы или фосфоенолпируваткарбоксилазы и при этом увеличена активность(и) специфического фермента(ферментов). Данное изобретение позволяет получать L-лизин с высокой степенью эффективности. 3 с. и 6 з.п. ф-лы, 20 ил., 4 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)н

Формула изобретения

1. Способ получения L-лизина, который включает культивирование бактерии в подходящей среде для продуцирования, накопление L-лизина в культуре и сбор L-лизина из культуры, где указанная бактерия представляет собой бактерию Escherichia, у которой (1) увеличены внутриклеточные активности дигидродипиколинатсинтазы, аспартокиназы и дигидродипиколинатредуктазы и (2) увеличена/увеличены внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы или внутриклеточные активности тетрагидродипиколинатсукцинилазы и сукцинилдиаминопимелатдеацилазы, при этом внутриклеточная активность аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы или фосфоенолпируваткарбоксилазы увеличена.

2. Способ получения L-лизина, который включает культивирование бактерии в подходящей среде для продуцирования, накопление L-лизина в культуре и сбор L-лизина из культуры, где указанная бактерия представляет собой бактерию Escherichia, у которой (1) увеличены внутриклеточные активности дигидродипиколинатсинтазы, аспартокиназы и дигидродипиколинатредуктазы и (2) увеличена/увеличены внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы или внутриклеточные активности тетрагидродипиколинатсукцинилазы и сукцинилдиаминопимелатдеацилазы, при этом внутриклеточная активность фосфоенолпируваткарбоксилазы и внутриклеточная активность никотинамид-аденин-динуклеотид-трансгидрогеназы или аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы увеличены.

3. Способ получения L-лизина, который включает культивирование бактерии в подходящей среде для продуцирования, накопление L-лизина в культуре и сбор L-лизина из культуры, где указанная бактерия представляет собой бактерию Escherichia, у которой (1) увеличены внутриклеточные активности дигидродипиколинатсинтазы, аспартокиназы и дигидродипиколинатредуктазы и (2) увеличена/увеличены внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы или внутриклеточная активность тетрагидродипиколинатсукцинилазы и сукцинилдиаминопимелатдеацилазы, при этом внутриклеточные активности фосфоенолпируваткарбоксилазы и никотинамид-аденин-динуклеотид-трансгидрогеназы и внутриклеточная активность аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы и/или аспартазы увеличены.

4. Способ по п.3, где увеличены внутриклеточные активности аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы и аспартазы.

5. Способ по п.3 или 4, где аспартокиназа, дигидродипиколинатредуктаза, тетрагидродипиколинатсукцинилаза, сукцинилдиаминопимелатдеацилаза, фосфоенолпируваткарбоксилаза и аспартат-полуальдегид-дегидрогеназа получены из бактерии Escherichia, никотинамид-аденин-динуклеотид-трансгидрогеназа и аспартаза, если присутствуют, получены из бактерии Escherichia; дигидродипиколинатсинтаза получена из бактерии Escherichia или бактерии Brevibacterium, и диаминопимелатдегидрогеназа получена из бактерии Brevibacterium.

6. Способ по любому из пп.1-5, где внутриклеточная активность фермента, внутриклеточная активность которого увеличена, увеличена посредством внедрения плазмиды, имеющей ген этого фермента.

7. Способ по любому из пп.1-5, где внутриклеточная активность фермента, внутриклеточная активность которого увеличена, увеличена посредством увеличения числа копий гена этого фермента в хромосоме.

8. Способ по любому из пп.1-5, где внутриклеточная активность фермента, внутриклеточная активность которого увеличена, увеличена посредством модификации промоторной последовательности гена фермента в хромосоме.

9. Способ по любому из пп.1-8, где внутриклеточная активность дигидродипиколинатсинтазы и аспартокиназы увеличена за счет содержания дигидродипиколинатсинтазы, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином десенсибилизировано и аспартокиназы, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином десенсибилизировано, и внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы увеличена за счет внедрения гена диаминопимелатдегидрогеназы.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73