Моноклональные антитела против s100

 

Изобретение относится к области иммунологии, в частности к новым моноклональным антителам против связывающего кальций белка S100, применению полученных антител для разработки иммуноанализа, специфичного для определения общего S100 или различных изоформ S100 в сыворотке, плазме, спинномозговой жидкости и других биологических жидкостях, при этом заявленным способом возможно определить S100ββ, S100αα и S100αβ изоформы. Изобретение позволяет определять различные изоформы белка S100 при лечении пациентов с мозговой травмой, нейродегенеративными заболеваниями, а также злокачественной меланомой и некоторыми другими злокачественными опухолями мягких тканей. 5 с. и 9 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).

Формула изобретения

1. Способ количественного определения общего количества изоформ S100ββ и S100αβ кальцийсвязывающего белка S100 в образце, включающий определение количества изоформы S100ββ путем выполнения стадий: (a) контактирование аликвоты образца с моноклональным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, распознающим такой эпитоп S100, который доступен в S100ββ, но в S100αα и S100αβ доступен не более чем на 5%, в условиях, позволяющих связывание антитела с S100ββ и образование комплекса с ним; (b) определение количества антигена, связавшегося с указанным антителом, тем самым определяя количество S100ββ в образце; и определение количества изоформы S100αβ путем выполнения стадий: (c) контактирование аликвоты указанного образца с моноклональным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, распознающим такой эпитоп S100, который доступен в S100αβ, но в S100αα и S100ββ доступен не более чем на 5%, в условиях, позволяющих связывание антитела с S100ββ и образование комплекса с ним; (d) определение количества антигена, связавшегося с указанным антителом, тем самым определяя количество S100αβ в образце.

2. Способ количественного определения количества изоформы S100ββ кальцийсвязывающего белка S100 в образце по п.1, включающий выполнение стадий (а) и (b).

3. Способ количественного определения количества изоформы S100αβ кальцийсвязывающего белка S100 в образце по п.1, включающий выполнение стадий (с) и (d).

4. Набор для определения общего количества изоформ S100αβ и S100ββ кальцийсвязывающего белка S100 в образце, включающий: (a) моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, распознающее такой эпитоп S100, который доступен в S100ββ, но в S100αα и S100αβ доступен не более чем на 5%, в условиях, позволяющих связывание антитела с S100ββ и образование комплекса с ним, служащее для определения количества антигена, связавшегося с указанным антителом, что тем самым определяет количество S100ββ в образце; (b) моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, распознающий такой эпитоп S100, который доступен в S100αβ, но в S100αα и S100ββ доступен не более чем на 5%, в условиях, позволяющих связывание антитела с S100ββ и образование комплекса с ним, служащее для определения количества антигена, связавшегося с указанным антителом, что тем самым определяет количество S100αβ в образце.

5. Набор по п.4, в котором моноклональное антитело является связывающим антителом, а набор дополнительно включает детектирующее антитело.

6. Набор по п.4, в котором моноклональное антитело представляет собой антитело S10, которое продуцируется клетками гибридомы линии S10:3 (ECACC № 98082619).

7. Набор по п.6, в котором моноклональное антитело является связывающим антителом, а набор дополнительно включает детектирующее антитело.

8. Набор по п.7, в котором детектирующее антитело представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое продуцируется клетками гибридомы линии S23:2 (ECACC № 98082617).

9. Набор по п.4, в котором моноклональное антитело представляет собой антитело S35, которое продуцируется клетками гибридомы линии S35:2 (ECACC № 98082616).

10. Набор по п.9, в котором моноклональное антитело является связывающим антителом, а набор дополнительно включает детектирующее антитело.

11. Набор по п.10, в котором детектирующее антитело представляет собой антитело S23 или его антигенсвязывающий фрагмент, которое продуцируется клетками гибридомы линии S23:2 (ECACC № 98082617).

12. Линия клеток гибридомы S10:3 (ECACC № 98082619), продуцирующая моноклональные антитела, распознающие эпитоп, присутствующий только в S100ββ, но отсутствующий в S100αα и S100αβ.

13. Линия клеток гибридомы S35:2 (ECACC № 98082616), продуцирующая моноклональные антитела, распознающие эпитоп, присутствующий только в S100αβ, но отсутствующий в S100αα и S100ββ.

14. Линия клеток гибридомы S23:2 (ECACC № 98082617), продуцирующая моноклональные антитела, распознающие эпитопы, присутствующие в S100ββ и S100αβ, но отсутствующий в S100αα.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26