Способ диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях мужской репродуктивной системы

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Изобретение относится к области медицины, а именно биохимии, и может быть использовано для диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы. Сущность способа состоит в том, что методом иммунофлуоресценции исследуют мазки, приготовленные из осадка, образовавшегося после центрифугирования спермы в течение 15 мин при 12000 об/мин. Техническим результатом является повышение чувствительности способа. 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно биохимии, и может быть использовано, в частности, для диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы.

В практической медицине известны различные способы диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы, основанные на выявлении в сыворотке крови антител против антигенов возбудителей с использованием иммуноферментного анализа (Колкова Н.И., Мартынова В.Р. К вопросам диагностики хламидийных инфекций. Клиническая лабораторная диагностика, М.: 1998. №2. С.20, 21), на использовании метода ДНК-гибридизации с применением меченного биотином ДНК-зонда, включающий обнаружение в нанесенном на нитроцеллюлозный фильтр исследуемом образце ДНК возбудителя (Квасов А.В., Жданов А.В., Письменская И.В., Файзуллина Н.М., Файзуллин Л.З., Сухих Г.Т. Применение меченного биотином ДНК-зонда для выявления возбудителей хронических урогенитальных инфекций.//Клиническая лабораторная диагностика. - М.: 1998. - №11. С.12-15.).

Недостатками этих способов являются:

- не достаточно хорошая воспроизводимость;

- трудоемкость, применение дорогостоящей аппаратуры;

- сравнительно частая встречаемость ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

Наиболее близким способом к предлагаемому является способ диагностики хламидиоза по исследованию нативного мазка, основанный на реакции антигена и антитела с детекцией образовавшихся комплексов с помощью иммунофлуоресцентного анализа (Микроскопическая техника: Руководство. / Под ред. Д.С.Саркисова и Ю.Л.Перова. - М.: 1996. - С.315, 316).

Недостатком этого способа являются:

- не достаточно хорошая воспроизводимость;

- сравнительно частая встречаемость ложноотрицательных результатов из-за часто недостаточного количества клеточных элементов в нативном мазке и, соответственно, сравнительно низкой чувствительности.

Целью представленного изобретения является повышение чувствительности и прогностического значения отрицательного результата способа диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы при одновременной простоте и доступности для широкого практического применения.

Поставленная цель в изобретении достигается тем, что мазок готовят из осадка, полученного после центрифугирования спермы в течение 15 мин, при 12000 об/мин с последующим исследованием полученного образца методом иммунофлуоресцентного анализа.

Центрифугированием достигается повышение концентрации клеточных элементов в осадке, из которого в последующем делается мазок, и, соответственно, чувствительность способа диагностики хламидиоза в целом.

Таким образом, преимущество предлагаемого способа в более высокой чувствительности при достаточно высокой специфичности, относительно низкой себестоимости и простоте выполнения (что делает предлагаемый способ доступным для широкого практического применения) обеспечивается предварительным центрифугированием спермы и получением мазка из образовавшегося осадка с последующим исследованием методом иммунофлуоресцентного анализа.

Положительный эффект предлагаемого способа достигается повышением концентрации клеточных элементов в мазке. Специфичность предлагаемого способа составляет 82,3%, чувствительность 95,0%, эффективность 88,6%, прогностическое значение положительного результата 84,1%, прогностическое значение отрицательного результата 94,3%, что превышает аналогичные показатели прототипа (таблица).

Предложенный способ был успешно апробирован в Астраханском областном кожно-венерологическом диспансере и в Астраханском городском центре планирования семьи и репродукции с медико-генетической консультацией с ноября 2001 года по сентябрь 2002 года на 202 пациентах с воспалительными заболеваниями уретры и предстательной железы.

Ниже приводятся результаты апробации.

Пример №1. Пациент А. 1970 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №215/2002/. Обратился с жалобами на зуд, жжение в уретре. Болеет 2 недели. Выделения скудные слизистые. Объективно: кожные покровы чистые, губки не изменены, выделения скудные слизистые. Мазок без особенностей, лейкоцитов мало. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 20-30 в поле зрения, липоидных телец - умеренно, гонококки - отсутствуют, трихомонады - отсутствуют. Иммунофлуоресцентный анализ мазка из уретры выявил наличие единичных хламидий при наличии менее 10 клеточных элементов в поле зрения.

Для подтверждения наличия хламидий проведено исследование мазка из осадка эякулята. Для приготовления мазка коагулировавший эякулят после полного разжижения центрифугировали в течение 15 мин при 12000 об/мин. Затем надосадочную жидкость удаляли микродозатором, а из осадка готовили мазок, который исследовался методом иммунофлуоресцентного анализа. Результат положительный, обнаружены хламидии, диагноз подтвержден. Назначено соответствующее лечение.

Пример №2. Пациент И. 1979 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №304/2002/. Обратился с жалобами на рези при мочеиспускании, зуд, жжение в уретре. Болеет 3 недели. Выделения умеренные слизисто-гнойные. Кожные покровы чистые, губки уретры инфильтрированы, гиперемированы, выделения слизисто-гнойные. Мазок: лейкоциты - до закрытия полей зрения, слизи умеренно, трихомонады - отсутствуют, гонококки - отсутствуют. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 30-45 в поле зрения, липоидных телец умеренно, гонококки отсутствуют, трихомонады отсутствуют. Иммунофлуоресцентный анализ мазка из уретры наличие хламидий, уроплазм, микоплазм, гарднерелл не выявил. Дополнительно проведено исследование мазка из осадка эякулята по описанной выше методике (см. пример №1). Выявлены многочисленные хламидии ассоциированные с хвостами сперматозидов. Диагноз - хламидиоз. Для подтверждения диагноза проведена ПЦР-диагностика - результат положительный. Назначено лечение.

Пример №3. Пациент М. 1976 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №884/2002/. Обратился с жалобами на жжение в уретре. Болеет 3 недели. Выделения умеренные слизистые. Кожные покровы чистые, губки уретры умеренно гиперемированы, выделения слизистые. Мазок: лейкоциты - до 10-15 в полей зрения, слизи умеренно, трихомонады - отсутствуют, гонококки отсутствуют. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 20-30 в поле зрения, липоидных телец много, гонококки - отсутствуют, трихомонады - отсутствуют. Иммунофлуоресцентный анализ мазка из уретры наличие хламидий, уроплазм, микоплазм, гарднерелл не выявил, эпителиальные клетки единичные в поле зрения (недостаточно клеточного материала для окончательного заключения). Дополнительно проведено исследование мазка из осадка эякулята по описанной выше методике (см. пример №1). Выявлены хламидии. Диагноз хламидиоз. Для подтверждения диагноза проведена ПЦР - диагностика - результат положительный. Назначено адекватное лечение.

Пример №4. Пациент С. 1971 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №1102/2002/. Обратился для обследования, после контакта с малознакомой женщиной, имевшего место 3 недели назад. Жалобы не предъявляет. Кожные покровы чистые, губки уретры не изменены, выделения незначительные, слизистые. Мазок: лейкоциты единичные в полей зрения, слизи умеренно, трихомонады - отсутствуют, гонококки - отсутствуют. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 4-6 в поле зрения, липоидных телец - много, гонококки - отсутствуют, трихомонады - отсутствуют. Реакция иммунофлуоресценции выявила уреаплазмы. Дополнительно проведено исследование мазка из осадка эякулята по описанной выше методике (см. пример №1). Выявлены хламидии, ассоциированные с хвостами сперматозидов. Диагноз - микст-инфекция (уреаплазмоз, хламидиоз). Для подтверждения диагноза проведена ПЦР-диагностика - наличие уреаплазм и хламидий подтверждено. Назначено лечение, соответствующее диагнозу.

Предлагаемым способом достигается положительный эффект: повышается точность диагностики хламидиоза за счет увеличения чувствительности, эффективности и значительного увеличения прогностического значения отрицательного результата. Это позволяет назначить адекватное лечение, повысить его эффективность, избежать у ряде случаев гипердиагностики. Специфичность предлагаемого способа составляет 82,3%, чувствительность 95,0%, эффективность 88,6%, прогностическое значение положительного результата 84,1%, прогностическое значение отрицательного результата 94,3%, что превышает аналогичные показатели прототипа.

Предлагаемый способ может быть использован в клинической практике для диагностики хламидиоза при урогенитальных заболеваниях у мужчин.

Формула изобретения

Способ диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы путем иммунофлуоресцентного исследования мазков, отличающийся тем, что мазки готовят из осадка, образовавшегося после центрифугирования спермы в течение 15 мин при 12000 об/мин.

Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для диагностики присоединения туберкулеза силикозу

Модифицированная молекула фно человека, способная индуцировать образование нейтрализующих антител к человеческому фно, днк, ее кодирующая, вектор (варианты), способ получения, вакцина против фно (варианты), способ тестирования на присутствие фно, способ тестирования жидкостей тела человека, способ диагностики, способ лечения и профилактики, медикамент для лечения // 2241715

Изобретение относится к биотехнологии, генной инженерии и медицине и может быть использовано для получения модифицированной молекулы ФНО человека, способной индуцировать образование нейтрализующих антител

Способ дифференциальной диагностики сотрясения головного мозга и ушиба головного мозга легкой степени у детей на ранней стадии // 2241225

Изобретение относится к области клинической иммунохимии

Способ и устройство фотоиммуномодулирующей терапии по гевондян и жарову // 2240843

Изобретение относится к медицине и биологии, в частности к физиотерапии и иммунологии для коррекции иммунодефицитных состояний и ассоциированных с ними заболеваний при воздействии света на различные зоны человека

Способ получения флуоресцирующего антивидового конъюгата против ig g человека или животного для реакции непрямой иммунофлуоресценции // 2240823

Изобретение относится к области медицины, а именно к биотехнологии диагностических препаратов, и может быть использовано при производстве медицинских иммунобиологических препаратов, предназначенных для выявления специфических антител и антигенов в биологических субстратах

Способ получения веществ из тканей и органов млекопитающих, обладающих аутоиммунной активностью in vitro и in vivo // 2240807

Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической иммунологии

Способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров вах и ki-67 // 2240560

Изобретение относится к офтальмоонкологии и может быть использовано для прогнозирования метастазирования увеальной меланомы

Способ прогнозирования развития нефрогенной гипертензии при гломерулонефрите у детей // 2240045

Изобретение относится к области медицины, в частности к детской нефрологии

Способ прогнозирования повторного развития тяжелых форм гестоза // 2239839

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования гестоза у женщин, перенесших тяжелый гестоз

Способ диагностики рефлюкс-нефропатии // 2239838

Изобретение относится к области медицины, а именно к нефроурологии, и может быть использовано при диагностике рефлюкс-нефропатии

Способ оценки тяжести течения псориаза // 2242001

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматовенерологии, и может быть использовано для оценки тяжести течения псориаза

Способ диагностики стадии наружного генитального эндометриоза // 2242002

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии

Способ прогнозирования осложнений после антиглаукоматозной операции при врожденной глаукоме // 2242003

Изобретение относится к офтальмологии

Способ дифференциальной диагностики доброкачественной и прогрессирующей форм хронического лимфолейкоза // 2242004

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии и онкологии

Набор для количественного определения общего простатспецифического антигена в сыворотке крови человека методом одностадийного твердофазного иммуноферментного анализа // 2242006

Изобретение относится к области биологии и медицины и может быть использовано для диагностики рака простаты, контроля эффективности проводимого лечения опухолей простаты, в скрининговых программах для выявления группы риска, прогноза развития опухолевого процесса и обнаружения рецидивов

Изделие и способ для многопрофильного иммуноанализа сывороток // 2242762

Изобретение относится к иммунохимическим методам анализа сывороток человека и животных и может быть использовано для одновременного выявления в исследуемых образцах специфических антител (АТ) к ряду маркеров инфекционных, паразитарных, аллергических и соматических заболеваний в медицине, ветеринарии, биотехнологии, экологических исследованиях и научных экспериментах

Способ определения фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови живых организмов // 2242763

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, аллергологии, пульмонологии, дерматологии, инфекционной микробиологии, а также ветеринарии

Способ определения концентрации основного белка теплового шока 70 кда // 2242764

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике

Способ получения диагностической агглютинирующей сыворотки против бруцелл в l-форме // 2242765

Изобретение относится к области ветеринарии и медицины и может быть использовано для диагностики возбудителя бруцеллеза в L-форме

Способ прогнозирования риска развития эклампсии у беременных // 2243562

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству