Способ профилактики иммунодефицитов в эксперименте

Изобретение относится к медицине и предназначено для профилактики иммунодефицитов в эксперименте. Проводят воздействие облучением тимуса микроволнами миллиметрового диапазона с длиной волны 5,6 мм, разовой экспозицией 1-2 минуты при общем числе процедур - 6 через один - два дня. На следующий день после завершения процедур воспроизводят модель иммунодефицита путем сочетания гексеналового наркоза, абдоминотомии и последующего иммобилизационного стресса, с контролем иммунологических показателей через 5 суток после воспроизведения модели. Способ позволяет повысить эффективность профилактики иммунодефицитов в эксперименте. 1 табл.

 

Изобретение относится к области медицины и касается способов профилактики нарушений иммунного статуса физическими методами.

Наиболее близким к заявляемому является способ профилактики послеоперационных иммунодефицитов (патент РФ №2185216, зарегистрирован в Госреестре изобретений РФ 20 июля 2002 г., авторы В.И.Мельникова, Ю.М.Гринзайд и др.).

Известный способ состоит в том, что тем, что перед оперативным вмешательством воздействуют ультразвуком по лабильной методике на область рукоятки грудины, ежедневно с разовой экспозицией 2-2,5 минуты при общем количестве процедур равном 4-6.

Недостаток данного метода заключается в том, что его применение ультразвука на вышеуказанную область лимитируется целым рядом противопоказаний (патология щитовидной и паращитовидных желез, выраженные вегетативные расстройства, распространенный атеросклероз коронарных сосудов и аорты и пр.). Кроме того, эффективность фонопрофилактики по фенотипическим иммунологическим показателям (Е-РОК различных модификаций, антителообразующие клетки) является не всегда достаточной.

Предлагаемый способ лишен указанных недостатков. Способ состоит в том, что вначале проводят воздействие на область тимуса микроволнами миллиметрового диапазона с длиной волны 5,6 мм, разовой экспозицией 1-2 минуты при общем числе процедур - 6 через один-два дня, на следующий день после завершения процедур воспроизводят модель иммунодефицита.

Способ осуществляют следующим образом. Под контролем параметров иммунного статуса животным, например крысам, вначале проводят облучение указанной области микроволнами миллиметрового диапазона с длиной волны 5,6 мм, разовой экспозицией 1-2 минуты при общем числе процедур - 6 через один-два дня. На следующий день после завершения процедур воспроизводят модель иммунодефицита, например, путем сочетания гексеналового наркоза (введение в зависимости от массы тела 0,3-0,8 мл 5% раствора гексенала внутрибрюшинно), абдоминотомии (разрез кожи, фасции и брюшины по белой линии длиной 2-3 см с последующим наложением соответствующих швов) и иммобилизационного стресса (обездвиживание в индивидуальных клетках-норках на сутки). Через 5 дней проводят контроль иммунологических показателей.

Изучены 40 крыс-самцов линии Вистар массой тела 150-200 г, разделенные на 4 группы по 10 животных. 10 крыс первой группы служили интактным контролем для остальных животных.

У 10 животных второй группы воспроизводилась модель иммунодефицитного состояния. При этом вначале осуществлялось внутрибрюшинное введение в зависимости от массы тела в среднем 0,5 мл 5% раствора гексенала внутрибрюшинно. Через 5-10 минут на высоте сна производился разрез кожи, фасции и брюшины по белой линии длиной 2-3 см с последующим наложением соответствующих швов. Затем животные обездвиживались в индивидуальных клетках-норках на сутки с целью воспроизводства иммобилизационного стресса. Через 5 дней проводили контроль иммунологических показателей.

10 животным третьей группы предварительно производился курс воздействия ультразвуком низкой мощности на область тимуса при интенсивности 0,05 Вт/см², разовой экспозиции - 2 минуты, на курс - 6 процедур через 1-2 дня, после чего у них воспроизводилась модель иммунодефицита (см. гр.2) и через 5 дней проводился контроль иммунологических показателей.

У 10 животных четвертой группы предварительно производился курс воздействия КВЧ-миллиметрового излучения на область тимуса при длине волны 5,6 мм, разовой экспозиции - 2 минуты, на курс - 6 процедур через 1-2 дня, после чего у них воспроизводилась модель иммунодефицита (см. гр.2) и через 5 дней проводился контроль иммунологических показателей.

Изучены следующие параметры: масса тимуса в мг; активность лизоцима сыворотки крови по О.В.Бухарину - в мкг/мл; показатели фагоцитоза нейтрофилами - по А.И.Иванову и Б.А.Чухловину: фагоцитарная активность лейкоцитов (ФАЛ) в % и фагоцитарный индекс (ФИЛ) в ед., показатель завершенности фагоцитоза (ПЗФ) – в %; фенотипические показатели - содержание в крови Е-РОК общ. и Е-РОК акт. по M.Jondal et al. в %, содержание в селезенке антителообразующих клеток (АОК) по N.K.Erne в кл/чП.

Полученные данные свидетельствуют об определенном преимуществе способа изобретения перед способом прототипа. Так, в результате сочетанного воздействия патогенетических факторов получена воспроизводимая модель иммунодефицита (2 группа): снижение массы тимуса с 290,6±18,4 до 183,6±16,9 мг (Р<0,001), уровня фагоцитарной активности крови с 63,7±2,67 до 33,2±4,01% (Р<0,001), фагоцитарного индекса с 1,66±0,16 до 0,91±0,14 (Р<0,01), ПЗФ с 59,1±1,47 до 38,7±2,78 (Р<0,001), Е-РОК общ. с 62,5±1,92 до 44,9±1,74 (Р<0,001), Е-РОК акт. с 50,4±2,31 до 22,3±1,15 (Р<0,001), АОК в селезенке с 164,2±7,51 до 74,5±8,13 (Р<0,001).

Ультразвук предупреждал развитие большинства описанных нарушений (см. таблицу), уступая при этом КВЧ. Так, достоверно больше, чем под влиянием ультразвука, при применении КВЧ перед моделированием иммунодефицита возросли масса тимуса, содержание лизоцима в сыворотке крови, содержание в крови Е-РОК акт. и в селезенке АОК (Р<0,05-0,001). Эффективными в аспекте профилактики, но менее демонстративными оказались фагоцитарные показатели и Е-РОК общ.

Таким образом, статистическая обработка также подтвердила эффективность разработанного способа.

Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.

1. Крыса-самец линии Вистар массой 165 г - интактная. Масса тимуса - 305 мг, лизоцим сыворотки - 9,35 мкг/мл, ФАЛ - 56%, ФИЛ - 1,05 ед., ПЗФ - 63,8%, Е-РОК общ. - 63,0%, Е-РОК акт. - 58,0%, АОК - 160 кл/чП.

2. Крыса-самец линии Вистар массой 165 г - модель (гексеналовый наркоз + абдоминотомия + иммобилизационный стресс в течение 24 часов). Масса тимуса - 205 мг, лизоцим сыворотки - 9,35 мкг/мл, ФАЛ - 28,0%, ФИЛ - 0,98 ед., ПЗФ - 39,9%, Е-РОК общ. - 51,0%, Е-РОК акт. - 23,0%, АОК - 56 кл/чП.

3. Крыса-самец линии Вистар массой 185 г - способ прототипа. 6 сеансов ультразвука на область тимуса при интенсивности 0,05 Вт/см², разовой экспозиции 2 минуты, 6 процедур через 1 (будни) - 2 (суббота-воскресенье) дня. На следующий день после последней процедуры - воспроизведение вышеуказанной модели, а через 5 дней после этого - исследование иммунологических показателей. Масса тимуса - 160 мг, лизоцим сыворотки - 8,85 мкг/мл, ФАЛ - 38%, ФИЛ - 1,55 ед., ПЗФ - 42,6%, Е-РОК общ. - 52%, Е-РОК акт. - 47%, АОК - 120 кл/чП.

4. Крыса-самец линии Вистар массой 190 г - способ изобретения. 6 сеансов микроволн миллиметрового диапазона от аппарата "Явь-1" на область тимуса при длине волны 5,6 мм, разовой экспозиции 2 минуты, 6 процедур через 1 (будни) - 2 (суббота-воскресенье) дня. На следующий день после последней процедуры - воспроизведение вышеуказанной модели, а через 5 дней после этого - исследование иммунологических показателей. Масса тимуса - 353 мг, лизоцим сыворотки - 13,3 мкг/мл, ФАЛ - 58%, ФИЛ - 1,02 ед., ПЗФ - 50,8%, Е-РОК общ. - 60%, Е-РОК акт. - 68%, АОК - 240 кл/чП.

5. Крыса-самец линии Вистар массой 165 г - способ изобретения. 6 сеансов микроволн миллиметрового диапазона от аппарата "Явь-1" на область тимуса при длине волны 5,6 мм, разовой экспозиции 1 минута, 6 процедур через 1 (будни) - 2 (суббота-воскресенье) дня. На следующий день после последней процедуры - воспроизведение вышеуказанной модели, а через 5 дней после этого - исследование иммунологических показателей. Масса тимуса - 358 мг, лизоцим сыворотки - 14,38 мкг/мл, ФАЛ - 58%, ФИЛ - 2,06 ед., ПЗФ - 45,2%, Е-РОК общ. - 62%, Е-РОК акт. - 59%, АОК - 189 кл/чП.

6. Крыса-самец линии Вистар массой 195 г - способ изобретения. 6 сеансов микроволн миллиметрового диапазона от аппарата "Явь-1" на область тимуса при длине волны 5,6 мм, разовой экспозиции 3 минуты (больше граничной), 6 процедур через 1 (будни) - 2 (суббота-воскресенье) дня. На следующий день после последней процедуры - воспроизведение вышеуказанной модели, а через 5 дней после этого - исследование иммунологических показателей. Масса тимуса - 198 мг, лизоцим сыворотки - 10,63 мкг/мл, ФАЛ - 52%, ФИЛ - 1,21 ед., ПЗФ - 45,8%, Е-РОК общ. - 54%, Е-РОК акт. - 58%, АОК - 156 кл/чП.

7. Крыса-самец линии Вистар массой 180 г - способ изобретения. 6 сеансов микроволн миллиметрового диапазона от аппарата "Явь-1" на область тимуса при длине волны 5,6 мм, разовой экспозиции 30 секунд (меньше граничной), 6 процедур через 1 (будни) - 2 (суббота-воскресенье) дня. На следующий день после последней процедуры - воспроизведение вышеуказанной модели, а через 5 дней после этого - исследование иммунологических показателей. Масса тимуса - 255 мг, лизоцим сыворотки - 10,35 мкг/мл, ФАЛ - 45%, ФИЛ - 1,38 ед., ПЗФ -62,1%, Е-РОК общ. - 42%, Е-РОК акт. - 23%, АОК - 96 кл/чП.

Приведенные иллюстрации свидетельствуют о преимуществе способа изобретения перед способом прототипа, а также о том, что оптимальная разовая экспозиция применения ММВ 5,6 мм в целях профилактики иммунодефицитного состояния составляет у животных 1-2 минуты.

Способ профилактики иммунодефицита в эксперименте, включающий воздействие на область тимуса физическим фактором, отличающийся тем, что воздействие проводят путем облучения указанной области микроволнами миллиметрового диапазона с длиной волны 5,6 мм, разовой экспозицией 1-2 мин при общем числе процедур - 6 через один - два дня, после чего на следующий день после завершения процедур воспроизводят модель иммунодефицита, путем сочетания гексеналового наркоза, абдоминотомии и последующего иммобилизационного стресса, с контролем иммунологических показателей через 5 суток после воспроизведения модели.