Способ коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности
Изобретение относится к медицине, в частности к нефрологии и иммунологии, и касается коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальной острой почечной недостаточности. Для обеспечения такой коррекции последовательно внутривенно вводят фармакологические препараты милдронат и эссенциале в дозе по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов. Способ позволяет провести одновременную нормализацию нарушений иммунитета, энергетического статуса эритроцитов и таких биохимических показателей, как содержание макроэргических соединений, активность ферментов антиоксидантной системы, концентрация продуктов перекисного окисления липидов. 1 табл., 1 ил.
Изобретение относится к медицине, в частности к нефрологии и иммунологии.
Нарушение функций иммунной системы является одним из ранних последствий возникновения острых форм патологии. Иммунологический конфликт играет важную роль в патогенезе острого и хронического гломерулонефрита. Для острой почечной недостаточности характерна трудно корригируемая иммуносупрессия. Причиной этого является усиление интенсивности перекисного окисления липидов клеточных мембран, нарушение их состава, структуры и энергетического гомеостаза. Указанные отклонения приводят к дестабилизации мембранных структур и снижению функциональной активности иммуноцитов и клеток их микроокружения.
Используемые лекарственные препараты и средства для терапии и профилактики острой почечной недостаточности зачастую не обеспечивают необходимого терапевтического эффекта, а летальность при лечении данной категории пациентов колеблется от 15 до 50%. Такой достаточно большой диапазон колебаний зависит не только от особенностей поражения почек, но и от состояния иммунологической реактивности организма в целом, что диктует необходимость поиска новых способов коррекции нарушений иммунитета при острой почечной недостаточности, прежде всего, в условиях эксперимента.
В настоящее время наиболее близким к изобретению является способ коррекции азотистого обмена у животных с острой почечной недостаточностью с использованием биофлавоноида леспефлана и антигипоксанта ТБ-4 (К механизму действия биофлавоноида леспефлана и антигипоксанта ТБ-4 на азотистый обмен у животных с острой почечной недостаточностью / В.Г.Гуляев, П.П.Денисенко, В.И.Глызин и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1992. - №4. - С.20-22).
Однако прототип имеет ряд недостатков: использование в лечении препаратов, эффект которых направлен только на повышение функции почек и нормализацию азотистого обмена, тогда как иммунометаболические нарушения, имеющие место при острой почечной недостаточности, остаются без коррекции, что усугубляет течение нефропатии (Афанасьев В.А. О механизме развития иммуносупрессии при острой почечной недостаточности / В.А.Афанасьев, И.Л.Ласкова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1997. - №3. - С.31-35).
Задачей изобретения является разработать способ коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности.
Поставленная задача достигается тем, что для коррекции нарушенных иммунометаболических показателей в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности используется комбинация фармакологических препаратов: эссенциале, фосфолипиды которого обладают заместительным эффектом в клеточных мембранах, а витамины активируют метаболические процессы, и милдронат, как активатор клеточного метаболизма, каждый из которых применяется последовательно внутривенно из расчета по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.
Изобретение поясняется чертежом: динамика иммунометаболических показателей экспериментальных животных с острой почечной недостаточностью, получавших фармакологические препараты по разработанной схеме (пунктирная линия), от уровня животных, не получавших их (сплошная линия), по сравнению с контролем (окружность).
Разработанная комбинированная фармакологическая методика острой почечной недостаточности в условиях эксперимента на крысах Вистар с помощью применения милдроната, обладающего активирующим влиянием на метаболизм клетки, и эссенциале, фосфолипиды которого обладают заместительным эффектом в клеточных мембранах, обеспечивает клетки макроэргическими соединениями в условиях патологии, обладает антиоксидантными свойствами, снижает содержание продуктов перекисного окисления липидов, повышает функциональную активность различных клеток, в том числе и иммуноцитов, что нормализует иммунологические показатели.
Способ осуществляется следующим образом.
После моделирования на крысах Вистар острой почечной недостаточности однократным внутрибрюшинным введением 2 мг/кг хлористой ртути (HgCl2) внутривенно последовательно вводятся милдронат и эссенциале в дозе по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.
Предложенная фармакологическая схема коррекции иммуно-метаболического статуса оказалась эффективной, т.к. совместное применение эссенциале и милдроната позволяет нормализовать показатели гуморального иммунного ответа, гиперчувствительности замедленного типа, функционально-метаболического статуса, содержание макроэргических соединений, активность ферментов антиоксидантной системы защиты и концентрацию продуктов перекисного окисления липидов.
Таким образом, комбинация эссенциале и милдроната в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности одновременно корригирует нарушения иммунитета, восстанавливает энергетический статус эритроцитов и биохимические показатели. Вследствие этого, в процессе лечения пациентов с острой почечной недостаточностью возможно достижение высокого терапевтического эффекта при включении в схему их лечения милдроната и эссенциале.
Пример 1.
Исследования проведены на 126 крысах Вистар массой 150-180 г. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатов группы формировали из 8-10 животных. В контрольные и опытные группы входили животные одного возраста, полученные из питомника одновременно. Разброс в группах по исходной массе не превышал ±10%. Все исследования проводили в одно и то же время суток с 8 до 12 часов. Животных выводили из опыта декапитацией под эфирным наркозом. Исследованию подвергали плазму, сыворотку крови, эритроциты, полинуклеарные лейкоциты, лимфоциты периферической крови, ткань селезенки и подколенных лимфатических узлов.
Для сопоставления результатов коррекции иммунометаболических нарушений при острой почечной недсотаточности по предложенной методике проведено исследование эффективности раздельного использования предлагаемых фармакологических препаратов эссенциале и милдроната.
Животные были разделены на 5 групп.
Первая группа (10 животных) - контрольная (без воздействия нефротоксического яда и применения препаратов).
Вторая группа (29 животных) подвергалась воздействию нефротоксического яда (однократное внутрибрюшинное введение 2 мг/кг хлористой ртути) для развития острой почечной недостаточности, которая манифестировалась повышением в крови содержания мочевины и креатина (у контрольных крыс содержание мочевины и креатина равнялась соответственно 136,4±12,8 ммоль/л и 12,7±1,6 ммоль/л, у отравленных - 268,5±34,2 ммоль/л и 27,9±3,1 ммоль/л).
Третья группа (28 животных) подвергалась воздействию нефротропного яда (хлористая ртуть) и инъекциям эссенциале в дозе 5 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.
Четвертая группа (30 животных) - введение хлористой ртути и милдроната в дозе 5 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.
Пятой группе животных (29 животных) на фоне острого поражения почек хлористой ртутью внутривенно последовательно вводились препараты милдронат и эссенциале в дозах по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 часов.
В условиях острой почечной недостаточности происходит угнетение развития гуморального иммунного ответа (количество антителообразующих клеток) и гиперчувствительности замедленного типа (разница массы лимфоузлов) на эритроциты барана, снижается функционально-метаболическая активность нейтрофилов периферической крови (индекс активности и окислительный резерв), снижается содержание макроэргических соединений (аденозинтрифосфата и 2,3-бисфосфоглицерата) и активность одного из ферментов антиоксидантной защиты (супероксиддисмутаза), что приводит к накоплению продуктов перекисного окисления липидов (ацилгидроперекиси и малоновый диальдегид).
| Таблица 1. | ||||
| Влияние эссенциале и милдроната на функционально-метаболическую активность нейтрофилов периферической крови, развитие гуморального иммунного ответа и гиперчувствительности замедленного типа, энергетический и антиоксидантный потенциал эритроцитов крыс с острым токсическим поражением почек | ||||
| Показатели иммунного и метаболического статусов | Контроль | Введение HgCl2 | Введение HgCl2+эссенциале | Введение HgCl2+милдронат |
| 1 | 2 | 3 | 4 | |
| Индекс активности нейтрофилов | 68,4±7,2 | 26,4±3,2*1 | 38,1±4,3*1,2 | 40,3±4,7*1,2 |
| Окислительный резерв нейтрофилов, % | 17,5±1,1 | 7,7±0,6*1 | 12,3±0,9*1,2 | 13,4±1,0*1,2 |
| Антителообразующие клетки, 103/селезенку | 26,8±3,1 | 10,5±1,3*1 | 19,6±2,3*1,2 | 17,9±2,0*1,2 |
| Разница массы лимфоузлов, мг | 4,8±0,5 | 2,3±0,2*1 | 3,5±0,3*1,2 | 3,7±0,4*1,2 |
| 2,3-бисфосфоглицерат, мкмоль/мл эритроцитов | 5,8±0,6 | 3,7±0,3*1 | 3,8±0,4*1 | 4,7±0,5*1-3 |
| Аденозинтрифосфат, мкмоль/мл эритроцитов | 1,7±0,2 | 0,8±0,1*1 | 0,8±0,1*1 | 1,2±0,2*1-3 |
| Супероксиддисмутаза, ЕД/мл эритроцитов | 56,6±3,1 | 43,5±2,2*1 | 49,3±2,9*1 | 40,6±2,5*1,3 |
| Ацилгидроперекиси, ΔD233 на 1 мл плазмы | 1,5±0,2 | 3,4±0,4*1 | 2,0±0,3*1 | 2,8±0,4*1-2 |
| Малоновый диальдегид, мкмоль/л | 36,7±3,2 | 51,2±4,8*1 | 43,5±4,1*1 | 50,6±4,2*1 |
Применение эссенциале повышает, но не до контрольных значений, показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов и иммунной реактивности и не влияет на нарушенные биохимические показатели.
Инъекции милдроната животным, у которых экспериментальным путем смоделирована острая почечная недостаточность, корригируют нарушенные иммунные показатели, увеличивает содержание макроэргических соединений и снижает концентрацию ацилгидроперекисей, но не до контрольных значений.
Предложенная фармакологическая схема коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности статуса оказалась более эффективной, т.к. совместное применение эссенциале и милдроната позволяет нормализовать показатели гуморального иммунного ответа, гиперчувствительности замедленного типа, функционально-метаболического статуса, содержание макроэргических соединений, активность ферментов антиоксидантной системы защиты и концентрацию продуктов перекисного окисления липидов (см. чертеж).
Следовательно, комбинация эссенциале с милдронатом в дозах по 5,0 мг/кг веса внутривенно 5 раз через 12 часов в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности одновременно нормализует нарушения иммунитета, энергетический статус эритроцитов и биохимические показатели.
Способ коррекции иммунометаболических нарушений в условиях экспериментальной острой почечной недостаточности, отличающийся тем, что последовательно внутривенно вводят фармакологические препараты милдронат и эссенциале в дозе по 5,0 мг/кг веса 5 раз через 12 ч.
